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1.
干扰素调节因子（irf3）是干扰素调节因子（IRF）家族的一员,是I型干扰素依赖性免疫反应的主要转录调节因子,在针对DNA和RNA病毒的先天免疫反应中发挥重要作用。本研究中,斑石鲷irf3基因（Oplegnathus punctatus interferon regulatory factors 3,Opirf3）来自实验室斑石鲷基因组数据库,经分析鉴定Opirf3的CDS序列全长1362 bp,可编码453个氨基酸,预测其蛋白分子量为50.0 kDa,理论等电点为4.97,有一个IRF结构域和一个IRF-3结构域。荧光定量分析显示,Opirf3在斑石鲷肝脏、鳃、心脏、皮肤、脾脏、肠、脑、肾、胃和头肾组织均有表达;虹彩病毒感染7 d时,免疫组织肝、脾和肾脏中Opirf3的表达水平显著上调。斑石鲷肾细胞系体外刺激实验显示,不同浓度poly I:C刺激后,Opirf3的表达量较对照组均显著升高,poly I:C浓度为100 μg/mL时,肾细胞中Opirf3的相对表达水平升高,为对照组的86.8倍。siRNA干扰后,斑石鲷肾细胞系中Opirf3表达水平显著下调30%,下游基因IFN-α、CD40、CD80和IL-1β显著下调,IL-6显著上调。以上结果可能表明Opirf3基因参与了I型IFN在斑石鲷抗虹彩病毒过程中的先天免疫反应。本研究可为斑石鲷抗病分子育种提供理论依据。 相似文献
2.
为探究斑石鲷(Oplegnathus punctatus)干扰素调节因子irf7在虹彩病毒(Iridovirus)感染过程中的作用机制,本研究通过PCR扩增获得了斑石鲷irf7基因CDS区序列,对其序列特征进行分析,并在组织水平和细胞水平研究该基因在病毒感染中的表达模式。结果显示,Opirf7基因CDS区全长为1332 bp,编码443个氨基酸的多肽,具有干扰素调节因子家族的保守结构域。荧光定量PCR (qRT-PCR)结果显示,Opirf7基因在健康个体的不同组织中均有表达,在肝脏中表达量最高,在皮肤和肠等免疫组织中的表达量也较高。对斑石鲷腹腔注射虹彩病毒诱导抗病毒免疫反应,在组织水平检测Opirf7对病毒感染的响应模式。与对照组(0 h)相比,Opirf7在免疫组织中的表达水平有不同程度的升高。在细胞水平,建立poly I: C感染的斑石鲷脑细胞系模型,利用qRT-PCR检测Opirf7的表达变化。结果显示,poly I: C刺激后,脑细胞系Opirf7的表达量显著升高。结果表明,Opirf7在斑石鲷抗病毒病的免疫应答过程中发挥重要作用。 相似文献
3.
齐口裂腹鱼(Schizothorax prenanti)是长江上游水域的珍稀鱼类, 近年来由于环境变化和疾病爆发野外齐口裂腹鱼数量急剧减少, 现已被列入长江上游二级急切保护的特有鱼类, 因此, 对齐口裂腹鱼的保护刻不容缓。建立齐口裂腹鱼细胞系是保护其种质资源的有效手段, 也可以在不伤害现有鱼群的条件下进行多种齐口裂腹鱼相关生物学研究。本研究建立了首个来源于齐口裂腹鱼的细胞系, SPG 细胞系。原代细胞分离自齐口裂腹鱼鳃丝组织, 呈均一的上皮状, 使用含 15%血清的 L-15 培养, 在 15 个月时间里成功传至 55 代。线粒体 COI 基因鉴定, 证明该细胞来源于齐口裂腹鱼, 核型检测细胞染色体数目为 2n=96。在液氮中保存 12 个月的细胞, 复苏后能保持 75%以上活力。EGFP-N3 质粒转染 SPG 细胞后观察到明显的绿色荧光蛋白表达。病毒类似物 poly(I:C)和大肠杆菌脂多糖 LPS 可引起细胞 IL-1β、IL-8、TNFa 和 TLR22 等免疫相关基因表达量升高。表明本研究建立的齐口裂腹鱼鳃丝细胞系可用于免疫学研究。此外, 此细胞系还将在种质保存, 外源蛋白表达和齐口裂腹鱼体外生物学研究中发挥重要作用。 相似文献
4.
笛鲷属线粒体基因组编码序列的系统进化分析能力评估 总被引：2，自引：0，他引：2
运用通用引物长距PCR(Long-PCR)和常规PCR相结合的方法测定了鲈形目笛鲷科的4种笛鲷属鱼类(孟加拉笛鲷、四带笛鲷、千年笛鲷和马拉巴笛鲷)和军曹鱼科的军曹鱼线粒体DNA基因组全序列(GenBank序列号分别为FJ171339,FJ416614,FJ824741,FJ824742 和NC_011219),得出所用全序列测定体系的方法通用性较强,操作简单。线粒体基因组的比对分析表明,测定的mtDNA基因组的绝大部分区段与GenBank中现有的脊椎动物的序列有较高的同源性。以军曹鱼外群结合GenBank中近缘笛鲷鱼类(勒氏笛鲷、蓝点笛鲷和黑带鳞鳍梅鲷)进行的聚类分析中,勒氏笛鲷与黑带鳞鳍梅鲷的聚类关系近于同属物种,与形态学分类存在矛盾。通过单个基因和基因拼接序列比较,综合考虑邻位连接法构建系统进化树的置信度和序列的信息量,对13种蛋白质编码基因在属内种间的系统进化分析能力进行了评估,将基因分成不同的4等:很好的为ATPase6和cox2;好的序列为ND2和cox1;差的为ND6、ND3和ATPase8;包括Cyt b在内的其余6种基因为中等。分析还揭示出序列长度的增加可以提高系统进化树的置信度,且属内物种间比较时序列长度的影响小于高级阶元。 相似文献
5.
漠斑牙鲆(Paralichthys lethostigma)是中国近年新开发的重要海水养殖鱼类,本研究以漠斑牙鲆囊胚期胚胎为材料,探索了鱼类胚胎细胞分离和培养的条件,建立了漠斑牙鲆胚胎细胞培养技术。建立的漠斑牙鲆胚胎细胞系(SFEC)至今已经培养了240多天,传至80多代。SFEC的完全培养基采用添加抗生素、胎牛血清(FBS)、花鲈血清(SPS)、成纤维生长因子(bFGF)的DMEM。SFEC形态小而呈圆形、多边形,在培养基中生长迅速。本实验检测了温度、胎牛血清浓度、成纤维生长因子对SFEC生长的影响。在24~30℃之间SFEC生长良好,但当温度低于18℃时细胞生长速度明显减慢。在含15?S的培养基中,SFEC生长速度明显比在含7.5?S的培养基中快,在培养基中添加bFGF可以使细胞生长速度显著提高。SFEC的二倍体核型为2n=6st 42t。将GFP报告基因通过脂质体介导的方法转入SFEC中并成功地获得了表达,转化率为20%。 相似文献
6.
酪氨酸酶蛋白家族(tyrosinase gene family)是一类调控黑色素合成的关键酶, 在黑色素细胞形成的过程中起着不可替代的作用, 然而 Tyr 基因家族在东星斑体色形成中的潜在机制尚不清楚。豹纹鳃棘鲈(Plectropomus leopardus)俗称东星斑, 是我国重要的热带经济养殖鱼类, 但是人工养殖的东星斑因环境等变化而逐渐出现体色变淡或者变黑的现象, 严重影响其品质和经济价值。本研究从东星斑全基因组中共筛选鉴定获得 5 个 Tyr 基因家族成员, 氨基酸序列比对结果显示不同物种间的同源基因保守性较高, 尤其是 Tyr 家族典型的酪氨酸酶功能域在不同物种各成员之间均具有高度保守性。系统发育和共线分析均显示东星斑 Tyr 基因家族进化过程中存在基因复制和丢失现象。此外, 荧光定量 PCR 结果表明 Tyr 基因家族所有成员在东星斑黑色个体的皮肤组织中表达量均显著高于红色个体(P＜0.05)。本研究初步鉴定和分析了东星斑 Tyr 基因家族在其体色形成中的作用, 旨为深入解析东星斑酪氨酸蛋白酶基因家族的进化及功能机制提供依据。 相似文献
7.
为建立大黄鱼肿大细胞病毒的培养方法,明确其分类地位,用肿大细胞病毒检测呈阳性的大黄鱼幼鱼病料 (FD201807和SA201808)肾组织匀浆液感染鳜仔鱼细胞系 (mandarin fish fry cell line-1,MFF-1)并连续传代,从病料组织匀浆液和细胞冻融液中提取病毒DNA,克隆病毒主要衣壳蛋白基因 (mcp),测序后与NCBI GenBank中的虹彩病毒科肿大细胞病毒属病毒mcp以及2018—2020年所检出的15株大黄鱼肿大细胞病毒mcp进行比对分析。结果显示,病毒传至第4代才可引起MFF-1细胞病变,细胞病变的主要特征为细胞脱壁、变圆、折光度增强;感染时间越长脱壁细胞越多,同时培养液中的颗粒增加;透射电镜下可见感染细胞的细胞质散在大小为130~150 nm的六边形病毒粒子和空壳。感染细胞的病变周期随传代代次的增加而缩短,第15代次的FD201807株感染细胞80%细胞病变的时间为3 d,第15代次的SA201808株感染细胞80%细胞病变的时间为7~8 d。mcp序列比对和聚类分析发现,SA201808株与FD201807株的mcp序列存在21个碱基差异,二者的mcp序列分别与大黄鱼虹彩病毒(large yellow croaker iridovirus, LYCIV) LYCIV-Zhoushan (GenBank: MW139932.1)和花鲈虹彩病毒 (Lateolabrax maculatus iridovirus, LMIV) (GenBank: MH577517.1)相近。15株从大黄鱼病料检出的肿大细胞病毒中,12株的mcp序列与SA201808株聚类;3株与FD201807聚类。本研究利用MFF-1细胞系分离培养了大黄鱼肿大细胞病毒,揭示了大黄鱼肿大细胞病毒存在差异,为更好地了解大黄鱼肿大细胞病毒提供了数据参考。 相似文献
8.
罗非鱼肾脏细胞系的建立及其生物学特性 总被引：1，自引：1，他引：0
采用组织块移植法,对尼罗罗非鱼（Oreochromis niloticus）的肾脏组织细胞进行原代培养,建立了罗非鱼肾脏细胞系,已稳定传代培养50代以上,命名为TiK。罗非鱼肾脏细胞系为纤维样细胞,其最佳培养基为DMEM,最适培养温度为28℃,最适血清浓度为15%。在最适培养条件下,罗非鱼肾脏细胞系的群体倍增时间为45.8 h。细胞经液氮冷冻保存6个月后进行复苏,经台盼蓝染色,约（89.84±3.48）%的细胞具有活性,复苏后细胞生长旺盛。染色体分析显示,第32代罗非鱼肾脏细胞系染色体数目分布在20~66之间,众数为48。使用本实验室分离鉴定的罗非鱼病毒感染罗非鱼肾脏细胞,可产生典型的细胞病变效应,表明罗非鱼肾脏细胞对该病毒敏感。该细胞系的建立为罗非鱼病毒病防控技术研究提供了重要的实验材料。 相似文献
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10.
渔业数据缺乏是渔业资源评估和管理面临的难题。以2006—2018年北部湾二长棘鲷体长频率数据为例,运用基于长度频率的贝叶斯生物量方法(LBB),估算二长棘鲷的渐近体长(L∞)、最适开捕体长(Lcopt)、相对自然死亡率(M/k)和相对捕捞死亡率(F/k)等种群参数。结果发现,2006—2018年间北部湾二长棘鲷的渐近体长平均为21.0 cm,最适开捕体长平均为12.6 cm,相对死亡率M/k、F/k、Z/k和开发率E分别为1.49、3.65、5.15和0.67。二长棘鲷的开捕体长和渐近体长的变化趋势一致,均呈下降趋势,且其生长速度有加快趋势。基于LBB估算的最适开捕体长和开发率与运用独立评估模型估算的结果基本一致。如果长度频率能代表资源开发阶段的长度组成,使用LBB估算的结果将较好地反映其真实情况。基于LBB的研究方法可为渔业数据缺乏情况下进行渔业资源评估提供借鉴。 相似文献
11.
An analysis of the food of 274 specimens of Tilapia aurea (Steindachner), which had been collected in Lake Kinneret, showed that this species is mainly a zooplankton consumer.A study of the quantitative dynamics of the food components in the course of a year has proved that the species in question feeds more intensely in spring, this being the time when zooplankton forms are more abundant in the water of the lake. Vegetable detritus, mixed with plankton and benthos forms, served as additional and alternative food.The lack of clearly positive degree of food component selectivity, as well as the low values of the intestine repletion index and of the condition coefficient, account for the slowness in growth of Tilapia aurea in Lake Kinneret.The low values of the growth and feeding indices are due, according to the authors, to the pressure brought to bear by the other local fish species, which are competitors for the same food. 相似文献
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Pepietta Spataru 《Aquaculture (Amsterdam, Netherlands)》1978,14(4):327-338
Analysis of the gut content of 329 specimens of T. zillii (Cichlidae) collected from Lake Kinneret, has shown great variation in the sorts of food.A study of seasonal dynamics has proved the prevalence in the food of Chironomida pupae (Diptera) in winter and spring and of zooplankton forms in summer and autumn. The additional food consisted of the various groups of algae, the most frequently found being Cyanophyta (100%) and Pyrrophyta (64.16%). An extremely voraceous species, it consumes — while searching for its preferred food — anything that comes its way in the water: algae, scraps of macrophytes, autochthonous and allochthonous insects, and forms of benthic origin, such as Nematoda, Ostracoda, Porifera and Chironomida (larvae).The satiation index is high (between 4.08 and 5.63), in contradiction to the low values of the coefficient of condition (between 3.05 and 3.51), and with the slow rate of growth in Lake Kinneret. The main food of Tilapia zillii, consists of arthropod species with a chitin content (which is eliminated unchanged) of more than 50% of the total weight, and this may account for the poor exploitation of the trophic base.This species of fish may be considered as being detrimental to others (i.e. commercially important species) because of its successful competition for food, and not, as is often incorrectly assumed, because it is an aggressive consumer of their spawn and fry. 相似文献
13.
叶尔羌高原鳅胚胎发育与胚后发育观察 总被引：1，自引：0，他引：1
采用形态学和生态学方法,对叶尔羌高原鳅[Triplophysa(Hedinichthys)yarkandensis(Day)]胚胎发育和胚后发育阶段全过程进行观察、拍照并测量。结果显示:叶尔羌高原鳅,卵微黏性,略有沉性,受精卵呈卵圆形,卵径为(0.60±0.052)mm,在水温(20.0±1.0)℃下,历时65 h 34 min完成整个胚胎发育分为7个生理阶段过程;胚后发育主要根据卵黄囊、体色、鼓鳔和须的变化分为仔鱼期、稚鱼期、幼鱼期。初孵卵黄囊仔鱼全长(2.0±0.65)mm,出膜后7 d,卵黄囊吸收完毕,完全消失;初孵仔鱼继续培育至16日龄,仔鱼鳃盖后缘鼓鳔明显长出,须清晰可辨,体色加深,心脏红色素明显,体色与成体相似,标志后期仔鱼发育完全进入稚鱼期,此时鱼苗全长(8.0±0.45)mm;培育至30日龄,仔鱼鼓鳔完全,鳃盖张合明显,身体透明特征消失,稚鱼阶段完成发育进入幼鱼期,此时全长达(13.0±0.55)mm,其外部形态和生态习性均与成鱼相似。试验中,卵黄囊长度(LY)和出膜天数(D)的关系式:LY=0.0286D2–0.0636D+3.1196(R2=0.9050);用直线方程拟合卵黄囊长度(LY)和卵黄囊仔鱼全长(LT)的关系式:LY=–1.315LT+5.368(R2=0.8199);拟合卵黄囊仔鱼全长(LT)和出膜后仔稚鱼天数(D)的关系式:LT=–0.0263D2+0.5113D+1.6169(R2=0.9890)。本研究旨在通过了解叶尔羌高原鳅的早期发育特征为该物种的保护和增殖对策提供科学依据,并对其苗种生产提供理论指导。 相似文献
14.
F. Lahnsteiner 《Fish physiology and biochemistry》2006,32(2):131-139
The present study compared the carbohydrate metabolism of pelagic eggs of three marine species, Serranus cabrilla (Serranidae), Mullus barbatus (Mullidae) and Sparus aurata (Sparidae). In particular, in Serranus cabrilla and Mullus barbatus the changes in carbohydrate metabolism from the vitellogenic follicle stage to the ovulated egg stage (final maturation of the egg) were investigated, and in Sparus aurata the changes from the unfertilized egg stage to the late-embryo stage just before hatching were observed. In mature, unfertilized eggs of these three species the qualitative and quantitative composition of carbohydrates, enzymes and metabolites were similar, indicating no differences in carbohydrate metabolism. Glycolysis, gluconeogenesis and the pentose phosphate pathway occurred in the follicles and eggs. From the vitellogenic follicle stage to the mature egg stage glycolytic activity was constant in S. cabrilla and M. barbatus, while the activity of the pentose phosphate pathway and of gluconeogenesis decreased. Quantitative carbohydrate composition changed as the levels of hexose, ketose, 6-deoxyhexose, uronic acid and fructose-6-phosphate increased from the vitellogenic follicle stage to the mature egg stage, while the levels of D-glycerate-2-phosphate and phosphoenolpyruvate decreased. In S. aurata, the investigated parameters of carbohydrate metabolism were similar between unfertilized eggs and eggs in the first cleavage stage. From the first cleavage stage to the late embryo stage the levels of hexose, 2-deoxyhexose, ketose, ribose, uronic acid and phosphoenolpyruvate increased, while the levels of D-glycerate-2-phosphate decreased. 相似文献
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建立同时检测鲫(Carassuys auratus Linnaeus)血浆和肌肉中邻苯二甲酸二甲酯(DMP)和邻苯二甲酸二乙酯(DEP)的高效液相色谱方法,进行初步的代谢动力学研究.血浆样品经液-液萃取,肌肉样品经液-液萃取和固相小柱处理后,以乙腈:水= 40:60(V/V)为流动相,流速1.0 mL/min,采用SHIMADZU ODS柱(150 mm×4.6 mm; i.d., 5 μm)色谱柱分离.测定鲫经口染毒后血浆和肌肉中DMP和DEP的浓度.结果表明,标准曲线线性范围为0.05～10.0 μg/mL,线性关系良好(r>0.99),定量限为0.05 μg/mL,回收率95%以上,日内变异系数和日间变异系数均低于15%.经口染毒48 h内,鲫血浆和肌肉中均能检测到DMP和DEP的残留.该法操作简便、快速、灵敏、准确,已经初步用于鲫血浆和肌肉中DMP和DEP的代谢动力学和残留研究. 相似文献
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建立同时检测鲫(Carassuys auratus Linnaeus)血浆和肌肉中邻苯二甲酸二甲酯(DMP)和邻苯二甲酸二乙酯(DEP)的高效液相色谱方法,进行初步的代谢动力学研究。血浆样品经液-液萃取,肌肉样品经液-液萃取和固相小柱处理后,以乙腈∶水=40∶60(V/V)为流动相,流速1.0mL/min,采用SHIMADZU ODS柱(150mm×4.6mm;i.d.,5μm)色谱柱分离。测定鲫经口染毒后血浆和肌肉中DMP和DEP的浓度。结果表明,标准曲线线性范围为0.05~10.0μg/mL,线性关系良好(r>0.99),定量限为0.05μg/mL,回收率95%以上,日内变异系数和日间变异系数均低于15%。经口染毒48h内,鲫血浆和肌肉中均能检测到DMP和DEP的残留。该法操作简便、快速、灵敏、准确,已经初步用于鲫血浆和肌肉中DMP和DEP的代谢动力学和残留研究。 相似文献
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泰山赤鳞鱼与富春江的鲥鱼、青海湖的湟鱼、渤海的油鱼和弓鱼并称为我国“五大贡鱼”,近年来由于生态环境的恶化而使这一珍贵鱼种濒临灭绝。为了保护和开发利用这一珍稀的物种资源,笔者经过多年精心研究,取得了泰山赤鳞鱼人工繁殖实验的成功,通过撰写该稿希望能引起业内有关人士的重视。一、泰山赤鳞鱼生物学特性1.形态泰山赤鳞鱼为小型鱼类,多数个体体重为50g~120g,个别个体体重可达150g,成鱼全长20cm左右,体窄长且略侧扁,头顶钝圆,口下位呈弧形横裂。有上颌须2对,上吻部略向体前方突出,下颌有角质缘,各鳍无棘。在自然环境中,体背侧面沙黄… 相似文献
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With an overarching objective of improving the hatchery production of Atlantic salmon (Salmo salar) all‐female progeny, this study comparatively evaluated the reproductive parameters between normal (genotype XY) and neo‐males (genotype XX). Four normal (XY) and seven neo‐ (XX) males, from the same brood stock, distinguished by their ability to or lack of expressing semen, respectively, were comparatively evaluated. The left testicular lobe was used for histomorphometric analyses, while the right for semen collection and sperm quality analyses. Histomorphometric observations revealed that neo‐male testes are irregularly shaped, and have poorly formed seminiferous ducts, higher proportions of interstitial tissue and lower gonadosomatic index (p < .05). In addition, hypertrophied and cyst forming Sertoli cells were found in these individuals which collectively appear to form a physical barrier, precluding the semen collection by standard stripping techniques and reducing sperm quality. Particularly, semen motility (80.69 ± 2.4% and 57.2 ± 36.5% for XY and XX respectively) and duration of motility (99.31 ± 28.03 s and 66.84 ± 23.83 s for XY and XX respectively) of neo‐males were most compromised (p < .05). Interestingly, the TUNEL assay indicated no signs of apoptotic tissue suggesting that the histological differences may relate to delayed physiological/sexual maturity of neo‐males. 相似文献
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褐牙鲆(♀)×犬齿牙鲆(♂)杂交F1及其亲本肌肉营养成分分析与比较 总被引：2，自引：0，他引：2
褐牙鲆(Paralichthys olivaceus)为东亚地区重要的海水养殖鱼类,在中国、日本和韩国海水养殖业中占有重要的地位.目前,褐牙鲆经过连续多代缺乏选择的人工繁育和养殖,造成养殖群体种质发生退化,生长速度和抗逆性下降,极大制约了牙鲆养殖业发展.以选育生长迅速、抗逆性强、饵料转化率高的牙鲆类养殖新品种为目的,作者对褐牙鲆(♀)×犬齿牙鲆(Paralichthys dentatus)(♂)的杂交育种进行了研究.本实验对褐牙鲆(♀)×犬齿牙鲆(♂)杂交F1及其亲本肌肉营养成分进行测定.结果显示,杂交F1含水率显著低于双亲(P＜0.05),粗蛋白含量显著高于双亲(P＜0.05),粗脂肪含量介于二者之间;杂交F1的氨基酸总量、必需氨基酸、非必需氨基酸、半必需氨基酸与鲜味氨基酸总量都显著高于褐牙鲆与犬齿牙鲆(P＜0.05);脂肪酸含量方面,脂肪酸总量、不饱和脂肪酸总量3种鱼由高到低排列顺序为褐牙鲆、犬齿牙鲆、杂交F1,三者饱和脂肪酸总量差异不显著(P＜0.05).对3种鱼肌肉的营养品质进行了评价,杂交F1的必需氨基酸指数EAAI(90.30)明显高于褐牙鲆(77.75)与犬齿牙鲆(79.34),在蛋白质品质上表现出一定杂种优势.上述结果表明,杂交F1的肌肉具有蛋白和氨基酸含量较高、脂肪酸含量较低的特点. 相似文献
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Presence of coastal aquaculture activities in marine landscapes is growing with impacts on the wild fish that share these habitats. However, it is difficult to disentangle subsequent ecological interactions between these activities and marine fish communities. We evaluated the impact of both salmon and halibut farms on mackerel (Scomber scombrus) and whiting (Merlangius merlangus) sampled near sea cages using condition indices and fatty acid (FA) biomarkers. Results of the stomach content analysis indicated that mackerel and whiting consumed waste feed which was also reflected in their modified FA profiles. Both mackerel and whiting had elevated levels of FAs that are of vegetable oils origin. The use of vegetable oils as replacement for marine oils is a lot more common in salmon farming than halibut farming. Additionally, the overall effects of the two fish farms were more pronounced in whiting than in mackerel sampled near the sea cages. By allowing discrimination between sources of trophic interactions, this method could lead to more informed decisions in managing different farming activities. 相似文献