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试验旨在设计和构建基于鸡传染性支气管炎病毒(IBV)S1蛋白和鹦鹉热衣原体(Cps)主要外膜蛋白(MOMP)的抗原多表位DNA疫苗,并分析其免疫原性。研究利用免疫信息学方法筛选出IBV S1蛋白和Cps MOMP蛋白的优势抗原表位,设计多表位基因M,并利用多种生物信息学软件对其进行预测分析;将M基因、S1和MOMP串联基因分别连接至真核表达载体pEGFP-N1并转染至DF-1细胞,利用Western blot检测目标蛋白的表达情况。将上述重组质粒肌内注射7日龄雏鸡,四免后检测免疫鸡血清中特异性抗体IgG、细胞因子及T淋巴细胞含量。结果显示:构建的表位蛋白结构稳定、免疫原性较好且无副作用;重组质粒pEGFP-M和pEGFP-S1-MOMP与预期大小相符;与pEGFP-N1组和PBS组相比,四免后,pEGFP-M免疫组鸡血清中抗IBV IgG和抗Cps IgG抗体水平极显著升高(P<0.01),与pEGFP-S1-MOMP组相当;pEGFP-M组鸡血清中细胞因子γ-干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-4(IL-4)水平,T淋巴细胞抗原CD3+、CD4+和CD8+含量均极显著高于pEGF... 相似文献
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为研究日粮中添加不同浓度纳米硒对华北柴鸡蛋品质的影响,试验选择60周龄健康的华北柴鸡160只,随机分为对照组、低浓度组、中浓度组和高浓度组,每组4个重复,每个重复10只鸡。对照组饲喂基础日粮,低浓度组、中浓度组、高浓度组分别在基础日粮中添加0.3,0.6,1.2 mg/kg纳米硒。预试期3 d,正试期28 d,分别在第7,14,21,28天收集鸡蛋对其蛋品质进行测定和分析。结果表明:第7天时,低浓度组、中浓度组及高浓度组的蛋黄颜色均显著高于对照组(P0.05),低浓度组蛋黄比率显著低于对照组(P0.05),中浓度组蛋清比率显著高于对照组(P0.05);第14天时,中浓度组蛋黄重显著高于低浓度组(P0.05),低浓度组哈氏单位显著高于其他3组(P0.05),高浓度组蛋壳厚度显著高于其他3组(P0.05);第21天时,低浓度组蛋黄颜色显著高于对照组和中浓度组(P0.05),中浓度组蛋壳比率显著高于对照组和高浓度组(P0.05);第28天时,低浓度组和高浓度组的蛋黄颜色均显著高于对照组(P0.05),高浓度组哈氏单位显著高于低浓度组(P0.05)。说明日粮中添加纳米硒能够改善鸡蛋的蛋黄颜色、哈氏单位、蛋壳厚度、蛋壳强度等指标,但不同比例的纳米硒对蛋品质的影响无规律性。 相似文献
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肉鸡克雷伯氏菌病的病原分离鉴定及其防治 总被引:2,自引:0,他引:2
克雷伯氏杆菌(klebsiella)既是一种人兽共患病病原,又是一种可引起多种动物患病的条件性致病菌。克雷伯氏菌对鸡的感染除了能水平传播外,带菌种鸡还可以通过鸡蛋垂直传给子代,现国内外已从患病的鸡、猪、牛、兔、麝鼠、甲鱼、大熊猫等多种动物体内分离到这种细菌。该菌属于肠杆菌科、克雷伯氏菌属的成员,可致人和动物发生肺炎、肠炎、子宫炎、腹膜炎,甚至败血症。因此,随着近年来环境的变化,该菌成为人兽共患病的病原已被重视。2004年5月份,长春市某肉鸡养鸡场发生了一种以鸡冠苍白、肉髯发绀、精神萎顿、缩颈闭目嗜睡、共济失调、体重减轻为特征的传染性疾病,经检验确诊为肉鸡克雷伯氏杆菌感染。现将诊疗情况报道如下。 相似文献
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低温应激对小鼠不同组织脂质过氧化状态的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
为了研究低温应激对小鼠不同组织脂质过氧化状态的影响,试验选择健康清洁级昆明白小鼠40只,随机分为对照组和应激组,每组20只。采集对照组和经过-20℃处理120 min的低温应激组组织样品,测定丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果表明:与对照组相比,应激组小鼠肝脏、肾脏MDA含量显著升高(P<0.05),心肌、肺脏MDA含量有上升的趋势(P>0.05),腿肌MDA含量无明显变化(P>0.05);应激组小鼠肝脏、肾脏和肺脏SOD活性显著降低(P<0.05),心肌SOD活性有下降的趋势(P>0.05),腿肌SOD活性无明显变化(P>0.05)。说明冷应激对小鼠组织脂质过氧化反应的影响具有组织差异性特点,即对肝脏和肾脏影响最大,肺脏次之,心肌和腿肌最小。 相似文献
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为了确诊天津市某规模化猪场送检病猪是否为产气肠杆菌感染,试验采集濒死仔猪十二指肠内容物,对其进行细菌分离培养、革兰氏染色镜检、生化试验、药敏试验,并特异性扩增分离所得菌株16S rRNA基因片段,测序后与GenBank进行BLAST比对。结果表明:该菌株为革兰氏阴性短杆菌,生化反应与肠杆菌科的产气肠杆菌属最相似,对头孢类抗生素敏感而对部分氨基糖苷类和四环素类抗生素耐药,16S rRNA基因片段测序结果与GenBank中产气肠杆菌相似性达99.9%。说明该分离菌株为产气肠杆菌。 相似文献
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试验旨在构建pET28a-DCpep-GSE原核表达载体,并制备猪链球菌(Streptococcus suis)重组表位蛋白。应用生物信息学方法预测猪链球菌保护性抗原三磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)、烯醇化酶(Enolase)、DNA核酸酶(SsnA)的跨膜区结构、信号肽、B细胞表位、辅助T细胞(Th细胞)表位及蛋白的二级结构;设计重组蛋白(DCpep-GSE蛋白)的氨基酸序列并分析其理论等电点、亲疏水性等理化性质;构建重组原核表达载体pET28a-DCpep-GSE,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,优化诱导表达条件,His镍柱纯化并检测目的蛋白的细胞毒性和溶血性。结果显示,SsnA蛋白第1-50及1 036-1 059位氨基酸为胞内或跨膜片段,第1-56位氨基酸为信号肽片段,GAPDH和Enolase无跨膜区及信号肽;B细胞和Th细胞表位处于二级结构中的无规则卷曲与β-转角区域,表位抗原性良好;DCpep-GSE蛋白共373个氨基酸,分子质量为45.3 ku,理论等电点(pI)为4.57,平均亲水性(GRAVY)为-0.677,属于酸性亲水性蛋白;质粒双酶切得到5 369 bp的载体条带和1 131 bp的目的条带,PCR扩增产物测序结果与设计序列一致,载体构建正确;以1 mmol/L IPTG于37 ℃诱导6 h蛋白表达量最高,超声破碎后得到可溶性蛋白;试验组蛋白浓度为500 μg/mL时,RAW264.7、PK15和MARC145细胞的相对增殖率分别达到92.3%、99.5%和99.7%,细胞形态与对照组一致,生长旺盛;各样品组的溶血率均<5%。本研究设计了重组蛋白DCpep-GSE,成功地表达和纯化了DCpep-GSE蛋白,并验证了其安全性,为后续猪链球菌病亚单位疫苗的研制奠定了基础。 相似文献
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为研究不同断奶日龄对仔猪肝脏热休克蛋白70(Hsp70)、热休克蛋白90(Hsp90)和热休克蛋白27(Hsp27)表达的影响,对24头体重相近、健康的杜长大仔猪,按断奶日龄(14、21、28、35日龄)进行随机分组,每组包含6个重复,于42日龄处死取样,用蛋白免疫印迹法检测肝脏中上述蛋白的表达水平。结果表明,35日龄断奶组肝脏Hsp70蛋白表达水平显著低于21日龄断奶组(P0.05),35日龄断奶组Hsp90蛋白表达水平均显著低于14日龄和28日龄断奶组(P0.05),35日龄断奶组Hsp27蛋白表达水平均显著低于其他3个断奶组(P0.05)。结果提示,仔猪肝脏Hsp70、Hsp90及Hsp27蛋白表达量受断奶日龄影响显著。 相似文献