猪IgG1-Fc与圆环病毒3型Cap融合基因的原核表达与分析     

周玲玲  连凯琪  张明亮  王英杰  张慢  宋玉伟  张福良 《黑龙江畜牧兽医》2019,(17)

为了探索猪Ig G1-Fc(pIgG1-Fc)与猪圆环病毒3型(PCV-3) Cap融合基因在大肠杆菌中的表达效果,试验采用PCR方法扩增pIgG1-Fc-Cap136～645融合基因,通过PCR和双酶切技术鉴定重组质粒pET30a(+)-pIgG1-Fc-Cap136～645,使用SDS-PAGE和Western-blot方法对该重组质粒进行原核表达与鉴定,并进行可溶性分析。结果表明:PCR扩增得到pIgG1-Fc-Cap136～645融合基因,大小为1 221 bp,共编码407个氨基酸,并成功构建重组质粒pET30a(+)-p IgG1-Fc-Cap136～645;该重组质粒在大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中获得表达,表达的融合蛋白分子质量约为53. 0 ku,在25℃、IPTG终浓度为0. 5 mmol/L、诱导8小时时,重组蛋白pIgG1-Fc-Cap136～645的表达量最高,且主要以包涵体形式表达。  相似文献   

豫北新发猪圆环病毒3型的鉴定及全基因序列分析     

连凯琪  周玲玲  张明亮  张慢  王英杰  宋玉伟  关现军 《黑龙江畜牧兽医》2019,(5)

为了对疑似新发猪圆环病毒3型(PCV-3)感染病例进行确诊,试验采用PCR技术鉴定1例疑似感染PCV-3的猪,并将鉴定得到的PCV-3毒株的全基因组分成2个片段进行PCR扩增,分别构建到pMD18-T载体上测序,通过MegAlign软件对全基因序列进行同源性和遗传进化分析,利用在线生物信息学软件预测Cap和Rep蛋白的信号肽、核定位信号和B细胞表位。结果表明:成功鉴定出1株豫北新发PCV-3毒株,将此毒株命名为PCV-3/CN/HNAY-201806;对2个基因片段测序后拼接发现其基因组长度为2 000 bp(登录号为MH683051);同源性和遗传进化分析显示,PCV-3/CN/HNAY-201806与吉林长春毒株PCV-3/CHN/JLCC2016(登录号为KY421348.1)核苷酸同源性(99.6%)较高,与广西毒株PCV-3/GXFC2017-7(登录号为MG250186.1)同源性(98.8%)较低,不同地区间PCV-3基因组有差异但较小;对该毒株Cap和Rep蛋白序列分析显示,2个蛋白都没有信号肽序列,但都有核定位信号,Cap蛋白有9个B细胞表位,Rep蛋白有14个B细胞表位。  相似文献   

高等职业院校园林专业产教结合教学模式探索     

路海兰  周玲玲 《中国城市林业》2014,12(5):29-32

总结高职院校园林专业产教结合教学模式的内涵和类型,着重分析高职院校园林专业产教结合实践中存在的问题和对策,初步探索构建适合钟山职业技术学院园林专业产教结合的教学模式,以期为高职院校园林专业产教结合的深入发展提供参考。  相似文献   

黏虫clip型丝氨酸蛋白酶基因的克隆及原核表达     

连凯琪  纪爽  周玲玲  时志琪  王飞  张元臣 《华北农学报》2022,37(1):195-201

为了克隆黏虫丝氨酸蛋白酶的全基因序列,并进行原核表达,以黏虫为研究对象,利用RT-PCR扩增丝氨酸蛋白酶的部分基因,进而通过RACE技术,得到丝氨酸蛋白酶全基因,通过Blast等软件对获得基因序列和推导的蛋白质序列进行分析,并利用大肠杆菌表达系统对其进行表达.结果表明,成功克隆黏虫丝氨酸蛋白酶全基因,将其命名为MsPG...  相似文献   

中国环柄菇属真菌1新记录种     

周玲玲  梁俊峰  史东平  周光益 《华中农业大学学报》2011,30(2):129-131

记述了中国环柄菇属真菌的1个新记录种:暗黄褐环柄菇Lepiota forquignonii Quél,标本采自中国黑龙江省佳木斯市.该种的鉴别特征是担孢子侧面观椭圆形,褶缘囊状体宽棒状或近梨形,盖表鳞片呈栅状排列,末端细胞近圆柱状或窄棒状.该种被置于卵孢环柄菇组.  相似文献   

科学发展观赋予高校图书馆作风建设的新内涵     

周玲玲  徐雪琴 《农业环境科学学报》2010,(4)

以科学发展观理论为指导,从思想作风、工作作风、领导作风和学风建设四方面对高校图书馆的作风建设进行了新的思考。  相似文献   

中国白环蘑属真菌1新记录种     

周玲玲  梁俊峰  仲崇禄  史东平  陈羽 《华中农业大学学报》2010,29(4):457-459

记述了中国白环蘑属真菌的1个新记录种: 娇柔白环蘑Leucoagaricus tener (P.D.Orton）Bon,标本采自中国西藏自治区类乌齐县。该种的鉴别特征是菌盖表面具暗灰褐色的鳞片,担孢子椭圆形,菌褶缘囊状体近柱状、窄棒状或纺缍状,盖表栅状排列,菌丝末端细胞无明显分化、圆柱状。  相似文献   

中国白环蘑属真菌1新记录种   总被引：2，自引：1，他引：1  

周玲玲  梁俊峰  仲崇禄  史东平  陈羽 《华中农业大学学报》2010,29(4)

记述了中国白环蘑属真菌的1个新记录种:娇柔白环蘑Leucoagaricus tener (P.D.Orton) Bon,标本采自中国西藏自治区类乌齐县。该种的鉴别特征是菌盖表面具暗灰褐色的鳞片,担孢子椭圆形,菌褶缘囊状体近柱状、窄棒状或纺缍状,盖表栅状排列,菌丝末端细胞无明显分化、圆柱状。  相似文献   

黄瓜绿斑驳花叶病毒生物学特性及对西瓜生长的影响   总被引：7，自引：0，他引：7  

周玲玲  吴元华  赵秀香  李立梅  蔡明  王林  王文航 《沈阳农业大学学报》2008,39(4)

对黄瓜绿斑驳花叶病毒(coculnber green mottle mosaic virus,CGMMV)在辽宁省的分布、生物学特性及病毒侵染对西瓜产量和品质的影响进行了研究.结果表明:CGMMV在辽宁省的营口、鞍山、沈阳、丹东、大连、辽阳等地均有分布;在供试的5科21种植物中,病毒仅可侵染葫芦科的西瓜、黄瓜、葫芦、南瓜、角瓜、甜瓜、瓠瓜7种植物,并表现系统花叶症状.该病毒致死温度95～100℃,稀释限点104～10-5,体外保毒期119d.电镜观察病毒粒子直棒状,长300nm,宽15nm.RT-PCR检测表明,盖州、台安、新民的西瓜花叶样品为黄瓜绿斑驳花叶病毒两瓜株系.利用春秋两季大棚栽培西瓜接种试验表明,西瓜感染CGMMV后,导致植株生长缓慢,结瓜稍小,自根西瓜产量减产幅度很大,秋季大棚减产38.7%～47.6%,春季大棚减产11.4%～19.4%;采用葫芦嫁接的两瓜产量损失变化较小,秋季大棚减产3.4%～17.5%,春季大棚减产2.5%～9.1%.另外,研究结果表明,CGMMV侵染直接导致西瓜倒瓤,使西瓜丧失食用价值,血清学检测倒瓤西瓜携带CGMMV.  相似文献   

UVSG950环保节能型上光机涂布压合系统的关键技术     

曾任仁  周玲玲  李雪锋 《福建农林大学学报(自然科学版)》2009,38(6)

基于UVSG950环保节能型上光机的关键技术,对涂布压合系统的涂布厚度变动系数、疵斑点率及剥离强度进行试验研究.上光涂布压合系统新增了三辊顺转涂布刮油压合机构、精细涂布计量调节装置及精细压力调节装置,可达到涂布厚度均匀、疵斑点率低、剥离强度满足标准要求的涂布压合效果.  相似文献