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【目的】探究植物激素和光暗培养条件对卷丹百合（Lilium lancifolium Thunb）再生体系的影响,为卷丹百合种质资源开发和大面积推广种植打下基础。【方法】以卷丹百合鳞片为外植体,分析培养基中不同植物激素［NAA、6-BA、2,4-D、噻苯隆（TDZ）和毒莠定（PIC）］配比及光（光照时间14 h/d）、暗（全天黑暗）培养条件对卷丹百合鳞片愈伤组织诱导、增殖及不定芽再生的影响,建立卷丹百合组培高效再生体系。【结果】与不添加任何激素的对照（CK）相比,添加激素的培养基均能显著提高卷丹百合鳞片愈伤组织的诱导率（P<0.05）,其中TDZ 0.4 mg/L+NAA 0.2 mg/L组合的效果最佳,暗培养条件下其愈伤组织诱导率达65.57%;在TDZ 0.4 mg/L+2,4-D 0.05 mg/L的培养基中暗培养20 d后,再转入TDZ 0.4 mg/L+NAA 0.2 mg/L的培养基中继续暗培养40 d,愈伤组织增殖倍数最高,可达2.45倍。6-BA与NAA组合比6-BA与PIC组合更利于诱导不定芽的产生,芽再生倍数最高的培养基为6-BA 0.6 mg/L+NAA 0.1mg/L,暗培养条件下其再生倍数最高可达6.08倍。与光培养相比,暗培养更利于愈伤组织诱导和增殖,但在愈伤组织诱导不定芽阶段,长时间暗培养不利于芽的生长,暗培养20 d后转移至光培养条件下继续培养40 d,生成的不定芽色泽鲜绿,叶片伸展,长势旺盛,利于壮苗和生根。【结论】卷丹百合组织培养的不同阶段受不同种类和浓度的植物激素组合影响;暗培养条件更利于愈伤组织的诱导和增殖,暗培养结合光培养条件最适合不定芽的再生和分化。 相似文献
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【目的】栎空腔瘿蜂(膜翅目:瘿蜂科)危害栓皮栎及麻栎的重要害虫,该虫形成虫瘿并在虫瘿内取食危害,隐蔽性强,导致对其进行化学防治非常困难,而用寄生性天敌进行防治可能成为一种非常有效的方法。本研究旨在明确栎空腔瘿蜂虫瘿内天敌的种类和生物特性,为进一步利用天敌防治栎空腔瘿蜂提供科学依据。【方法】本文通过对栎空腔瘿蜂越冬期和生长期虫瘿进行田间调查和室内解剖,调查虫瘿内天敌种类及其优势天敌生活史和行为特性。【结果】栎空腔瘿蜂虫瘿内主要有3种优势天敌,均以幼虫在无性虫瘿内越冬。长尾小蜂Torymus sp. 1年发生2代,越冬成虫5月上旬开始出现,产卵于无性虫瘿内,7月上旬第1代成虫出现;广肩小蜂1年发生2代,越冬成虫5月上旬开始羽化,成虫产卵于无性虫瘿内,6月下旬第1代成虫羽化;金小蜂1年发生3代,越冬成虫4月上旬羽化,成虫产卵于有性虫瘿内,第1代成虫5月上旬羽化,成虫羽化后将卵产于无性虫瘿内,第2代成虫6月下旬开始羽化。【结论】栎空腔瘿蜂虫瘿内主要优势天敌为长尾小蜂、广肩小蜂和金小蜂,可作为栎空腔瘿蜂幼虫生物防治的有效手段。 相似文献
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应用RT-PCR和实时荧光定量PCR技术,从烟夜蛾雄虫触角中克隆气味受体目的基因,分析鉴定了其在烟夜蛾不同组织的特异性表达情况.序列分析结果表明,目的基因为新的烟夜蛾气味受体基因,命名为HassOR18(GenBank登录号:HM750915).该基因阅读框架全长1 197 bp,编码398个氨基酸,推测编码蛋白质的相对分子质量为46.6 kD,等电点为5.82.氨基酸序列比对表明,烟夜蛾气味受体HassOR18与其他夜蛾科昆虫OR18的氨基酸序列一致性均达80％以上.实时荧光定量PCR结果显示,HassOR18仅在雌雄虫触角中和雌虫喙内表达,而且在雄虫触角内的表达量远高于在雌虫触角和喙内的表达量,推测该基因可能参与性信息素的识别. 相似文献
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黏虫溶菌酶基因Mswly的克隆与真核表达 总被引：1，自引：0，他引：1
为了研究溶菌酶在害虫抵抗虫生真菌中的作用及分子机制,以黏虫为试验材料,利用RT-PCR和RACE技术获得黏虫溶菌酶基因Mswly的全长序列,同时采用体外真核表达系统对Mswly基因进行蛋白质表达。克隆、测序后分析表明,Mswly基因的cDNA全长为652 bp(GenBank登录号为MG692501),开放阅读框序列长度为426 bp,编码141个氨基酸。其编码蛋白质分子质量为16.26 ku,理论等电点为6.57;含有信号肽,剪切位点在第20个和21个氨基酸之间;含有溶菌酶活性所需要的谷氨酸和天冬氨酸活性位点。系统进化树分析表明,Mswly与其他物种的C型溶菌酶聚集在一起,说明Mswly为C型溶菌酶。Western blotting结果显示,Mswly重组蛋白大小约17 ku,与预期分子质量大小一致,说明Mswly基因在昆虫Sf9细胞系能够高效表达。综上,从黏虫脂肪体中克隆得到了1个C型溶菌酶基因Mswly的完整cDNA序列,并将其在草地贪夜蛾细胞系Sf9中进行了高效表达。 相似文献
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为评价一种新型黏虫抗菌肽（armyworm antimicrobial peptide 1，AAP-1）的抗菌活性，本试验首先采用固相化学合成法合成AAP-1，并通过高效液相色谱纯化和质谱检验，用抑菌圈法测定AAP-1对大肠杆菌的抗菌效果，倍比稀释法检测最小抑菌浓度（minimum inhibitory concentration，MIC），细菌平板计数法测定时间抗菌曲线；最后，通过超微量分光光度计评价AAP-1对大肠杆菌核酸泄露的影响，核酸凝胶电泳评价AAP-1对大肠杆菌胞内DNA的影响，透射电子显微镜观察评价AAP-1对大肠杆菌的整体作用效果。结果表明，合成的AAP-1纯度高于98%，分子质量为4 262.17 u；AAP-1对大肠杆菌具有良好的抗菌活性，MIC为7.8 μg/mL；对大肠杆菌的抗菌作用具有浓度依赖性，且在60 min内抗菌效果逐渐增强；AAP-1能够导致大肠杆菌核酸泄露，致使胞内DNA总量减少，且呈现浓度依赖性；AAP-1也会导致大肠杆菌细胞膜破坏、胞内电子密度明显降低、胞质溶解等现象。综上，本研究化学合成了一种新型抗菌肽AAP-1，且纯度高达98%，其对大肠杆菌具有良好的抗菌效果。本研究可为深入研究AAP-1对大肠杆菌的抗菌机制提供前期数据，可为APP-1的临床应用奠定理论基础。 相似文献
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栎空腔瘿蜂Trichagalma acutissimae(Monzen)是危害栓皮栎Quercus variabilis Blume叶片的重要林业害虫,为我国新纪录种。近年来,在南太行山区的栓皮栎林内暴发成灾,长尾小蜂Torymus sp.是栎空腔瘿蜂的一种主要寄生性天敌,为明确栎空腔瘿蜂及其天敌长尾小蜂种群数量消长动态,为预测预报和综合治理提供依据,本文调查了栎空腔瘿蜂和长尾小蜂成虫种群动态以及长尾小蜂的寄生率。结果表明,长尾小蜂成虫种群数量及寄生率一年发生2个高峰,第1个高峰发生在5月中旬,第2个高峰发生在7月下旬;2011—2015年,无性世代虫瘿平均每株发生的数量分别为826.0、816.4、61.8、11.0和3.4个,平均每块粘虫板长尾小蜂成虫发生数量分别为39.00、46.33、19.30、13.33和8.30头,长尾小蜂总寄生率分别为39.7%、51.0%、61.1%、54.9%和29.5%。 相似文献