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31.
NA-1株鹅源副黏病毒表面结构蛋白HN的真核表达 总被引：1，自引：1，他引：0
应用特异性引物,从鹅源副黏病毒NA-1株中扩增出HN蛋白基因,PCR产物纯化后克隆入pGEM-T载体,得到重组质粒pTHN。用EcoRⅠ和NotⅠ双酶切pTHN,回收目的基因HN片段并将其定向克隆到pPICZαA中,构建重组质粒pPICZαAHN。用SacⅠ酶切pPICZαAHN使其线性化,并电击转化至感受态毕赤酵母细胞GS115。PCR法鉴定阳性重组子,用1%甲醇诱导表达后,进行SDS-PAGE及Western-blot分析。结果在酵母菌培养基上清中检测到相对分子质量为63000的重组蛋白,且该重组蛋白可与NA-1株病毒多克隆抗体发生特异性血清学反应,表明NA-1的HN蛋白片段在Pichiapastoris中获得成功表达。 相似文献
32.
参照GenBank中的日本脑炎病毒序列设计一对特异性引物,采用RT-PCR法扩增E基因得到cDNA,克隆至pMD-18T载体,经测序证实后亚克隆至原核表达载体pET-28a中,转化入BL21(DE3),IPTG诱导表达,对表达产物进行SDS-PAGE电泳分析。结果表明,成功构建了重组质粒pET-28a/JEV E,目的蛋白主要以包涵体形式表达。Western blot检测表明,表达产物与兔抗JEV多克隆抗体呈阳性反应,在ELISA试验中,用表达出的E蛋白包被,能够很明显地区分出猪日本脑炎阴性、阳性血清。 相似文献
33.
2007-2008年从吉林省某猪场采集疑似流感发病猪的鼻咽拭子,经病毒分离鉴定获得3株H3N2亚型流感病毒,分别命名为A/swine/Jilin/5/2007（Sw/Jilin/5/07）、A/swine/Jilin/19/2007（Sw/Jilin/19/07）、A/swine/Jilin/37/2008（Sw/Jilin/37/08）。HA进化树分析结果表明：3株H3N2亚型流感病毒属于近代人源病毒谱系;但是在NA进化树中,Sw/Jilin/37/08株与早期人源和近代人源关系密切,暗示它可能是早期人源和近代人源H3N2亚型猪流感病毒之间的过渡毒株,进一步证实猪在流感病毒种间传播过程中充当＂中间宿主＂作用。 相似文献
34.
针对猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）JL/07/SW株GP5基因设计了4个脱氧核酶,经体外切割试验筛选得到具有体外切割活性的脱氧核酶,并通过RT-PCR、TCID50、CPE、间接免疫荧光（IFA）检测具有切割活性的脱氧核酶抑制PRRSV复制效果进行评价。结果针对GP5基因的Dz-GP5-10抑制效率最高可达到82.4%,Dz-GP5-12也表现良好的抑制效果,表明GP5基因的这2个位点可能是PRRSV复制所必需的。本研究为PRRSV复制及基因组功能研究、抗病毒药物开发和转基因动物研究奠定了基础。 相似文献
35.
今年7月中旬,我市宽城区某养鸡场新购进 AA 父母代种雏6280羽.1日龄注射过MD 疫苗,运雏成活率100%。3日龄开始突然大批发病,3日内死亡3000余只。雏鸡发病急、死亡快、未见明显临床症状,经综合诊断确诊为绿脓杆菌感染,紧急采取庆大霉素等药物治疗,一周后控制了疫情,现将结 相似文献
36.
20多年来,双山鸭场一直延用氯霉素、痢特灵及土霉素等传统药物对育雏期肉鸭进行预防用药,但愈来愈达不到预期的预防和治疗效果,加之这些药品易产生抗药性、价格贵而增加饲养成本等诸多因素,因此各基层单位在考虑应用那些抗耐药性、疗效好而又提高饲料转化率、价廉、增重快的药物。作者在实践中采 相似文献
37.
38.
旨在应用新型Cephodex D微载体悬浮培养ST细胞增殖猪瘟病毒。通过优化工艺条件初步实现了病毒抗原的大规模高效生产,培养过程采用流加方式保证ST细胞的营养供应。用含6%(v/v)无牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV)及其抗体的双阴牛血清MEM生长液培养ST细胞。当达到3.8×109个细胞时,接种入生物反应器中,Cephodex D微载体用量为4 g/L。当反应器内ST细胞生长至48 h,接种猪瘟病毒(classical swine fever virus,CSFV)液。继续培养4 d后进行首次病毒收获,之后每3 d收获1次,直至第5次收毒结束。整个培养过程持续18d,细胞培养至72 h,密度可达2.8×106cells/m L,生产的CSFV滴度均在100万兔体反应量(RID)/m L以上。较现有的国家标准相比,应用生物反应器和新型Cephodex D微载体悬浮培养技术,不仅病毒滴度提高了1倍,而且整个生产周期缩短了5 d,大大提高了生产效率。因此,本研究采用的新型微载体悬浮培养工艺在CSFV大规模生产中具有重要的应用价值。 相似文献
39.
三个猪场暴发乳猪冠状病毒性脑脊髓炎 总被引：9，自引：0，他引：9
猪冠状病毒性脑脊髓炎是新生仔猪一种急性传染病 ,在我国猪群中已有发生[1,2 ] 。 1999年 2～ 3月间 ,吉林省三个市县猪场 (编为Ａ、Ｂ、Ｃ猪场 )暴发了乳猪冠状病毒性脑脊髓炎。现将本病的流行病学、临床症状、病理学及实验室检验结果报道如下。1 流行病学三个猪场饲养瘦肉型长白种猪。Ａ猪场 1999年 3月 2～ 9日 ,妊娠母猪初产仔 6窝 ,前 4窝仔猪37头 ,在产后 3天全部死亡 ,后 2窝在产后 5～ 7天死亡 12头 ,存活 8头。Ｂ猪场 1999年 3月 1～ 18日 ,妊娠母猪初产仔猪 10窝 ,前 5窝仔猪 4 5头 ,在产后 3天全部死亡 ,后 3窝在产后 3～ 5天死… 相似文献
40.