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本文进行现代新型育苗技术研究的目的和意义进行了论述,并分析了在生态林业建设中应用育苗技术的现状,提出了育苗技术的具体应用措施,以供参考。 相似文献
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原核真核双表达加强型绿色荧光蛋白质粒的构建 总被引:2,自引:0,他引:2
将原核启动子Ptrc和加强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因从EGFP原核表达质粒pYA3334—EGFP上切下,然后将其插入至真核表达质粒pVAXI真核启动子Pcmv的下游,构建成具有真核和原核启动子的双表达杂合质粒pVAXD-EGFP,其长度为3823bp。将pVAXD—EGFP分别转化鼠伤寒沙门氏菌X4550和转染COS—7细胞,应用流式细胞术、可见光谱扫描、SDS—PAGE测定EGFP原核表达;应用荧光显微镜观察EGFP在COS—7细胞内的表达。重组鼠伤寒沙门氏茵X4550(pVAXD-EGFP)表达EGFP的量与仅以原核方式表达EGFP的X4550(pYA3334—EGFP)相当;将质料pVAXD-EGFP转染COS—7细胞,EGFP可在COS—7细胞核和胞浆表达,在荧光显微镜下发出强烈荧光。结果表明:不仅成功地构建原核、真核表达集中于同一质粒的新型质粒pVAXD-EGFP,而且原核、真核目的蛋白表达量达到很高水平,显示其在新型重组细菌疫苗方面有着诱人的应用前景。 相似文献
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1993~2006年间分离鸡白痢沙门氏菌141株,通过抗生素敏感性试验测定其对三甲氧苄氨嘧啶(TMP)耐药性,并用PCR方法检测dfrA基因的流行及与Ⅰ类整合子的关系。141个分离株对TMP的耐药率为90.8%(128/141)。128株TMP耐药性沙门氏菌中检测到4种dfrA基因,即dfrA1、dfrA12、dfrA13和dfrA17。dfrA12和dfrA17基因广泛分布。PCR产物测序表明:所有dfrA1和dfrA17基因都位于Ⅰ类整合子中;而dfrA12和dfrA13基因与Ⅰ类整合子无关,主要通过接合性质粒发生转移。鸡白痢沙门氏菌中TMP耐药性居于首位,其主要原因是dfrA基因广泛由接合性质粒和Ⅰ类整合子携带。 相似文献
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应用淋巴细胞杂交瘤技术,以纯化的原核表达产物His-ChIFN-γ作为免疫原,以纯化的GST-ChIFN-γ作为检测原,制备抗鸡γ-干扰素(ChIFN-γ)mAb;采用ELISA、Dot-ELISA和ECL法鉴定单克隆抗体(mAb)的生物学特性。获得4株可稳定分泌抗ChIFN-γmAb的杂交瘤细胞株1G10、2C3、3E5、3E3,其腹水ELISA效价为2×104~8.2×105;Ig亚类分别为IgG1、IgG1、IgG1和IgG2a。Dot-ELISA和ECL试验结果均表明:4株mAb只与表达ChIFN-γ的重组大肠杆菌反应,而与未表达ChIFN-γ的菌株不反应,表明4株mAb均特异性针对ChIFN-γ。鸡脾脏淋巴细胞经PMA刺激后,经固定、破膜,用mAb 2C3标记,利用流式细胞术可成功地检测到表达ChIFN-γ的T淋巴细胞。mAb为家禽的免疫检测、免疫细胞功能分析和免疫调节等研究提供依据。 相似文献
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以结核分枝杆菌H37Rv基因组DNA为模板,PCR扩增复活促进因子E(rpfE)基因,并将其克隆到表达载体pET-32a(+)中,重组表达质粒pET32a-rpfE转化E.coli BL21(DE3),经IPTG诱导,SDS-PAGE结果显示目的蛋白在细菌裂解上清和沉淀中均有表达,进一步对可溶表达的蛋白通过镍柱亲和纯化,获得高纯度的重组蛋白。Western-blotting试验结果表明:重组RpfE蛋白能与兔抗H37Rv多抗血清发生特异反应,具有良好的反应原性。这为探索RpfE蛋白在结核病疫苗开发和新型诊断试剂研制等奠定基础。 相似文献
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近年来,杂交棉在我国的推广正加速推进,对我国的棉花生产和品种结构产生了极大影响,也大大地提高了我国棉花生产的单产水平和纤维品质。但因目前生产上推广应用的杂交棉品种大多采用人工去雄的杂交方法,F1的制种产量有限(一般100kg/667m2),繁种系数较低,成本普遍较高(一般种子零售价达100元/kg),农户种子投入与常规棉相比大大提高,因而仅仅利用一代种不利于杂交棉的快速普及和全面推广应用。为此国内外学者和有关工作者对棉花杂种F2的产量和纤维品质衰退情况以及其在生产上的应用潜力进行了研究,主要结果均表明,杂交棉F2有一定的利用价值,… 相似文献