副猪嗜血杆菌和猪链球菌双重PCR方法的建立与应用   总被引：1，自引：0，他引：1  

贾爱卿  李春玲  王贵平  杨冬霞  何丽丽  王金生 《中国兽医学报》2009,29(9)

针对副猪嗜血杆菌和猪链球菌16S rRNA序列各设计1对特异性引物,分别能扩增出822 bp和294 bp的DNA片段,并据此建立了快速准确鉴别副猪嗜血杆菌和猪链球菌的双重PCR方法,临床试验证明该方法具有很好的特异性、敏感性,能对临床病料进行鉴别诊断.对161份临床样本检测结果显示,副猪嗜血杆菌的检出率为23.75%,猪链球菌的检出率为43.48%,二者混合感染率为9.94%.  相似文献   

罗非鱼无乳链球菌生物学特性与致病力研究     

田珂  贾爱卿  陈善真  李守军  王贵平  石和荣 《中国畜牧兽医》2013,40(6):203-207

本试验分离纯化1株致使罗非鱼具有链球菌发病症状的病原菌,药敏试验结果表明,该菌对氯霉素等10种药物敏感。PCR扩增该菌的cfb基因,将扩增片段测序后与GenBank上登录的罗非鱼无乳链球菌的cfb基因序列进行比对。同时对该病原菌的生物学特性进行研究,包括培养时间和pH对该菌生长的影响;培养温度对其致病力的影响;探讨了不同攻毒方式(腹腔、胸腔和背部肌肉注射)与鱼发病快慢的关系;并对不同规格(100和10 g左右)的罗非鱼对该菌的易感性进行分析。试验结果表明,该病原菌为无乳链球菌(Streptococcus agalactiae);该菌的最适培养时间为11.5 h,最适培养pH为7.5;腹腔、胸腔和背部肌肉注射后,其发病时间几乎一致,但胸腔注射的试验鱼死亡速度最慢,背部肌肉注射是较安全可行的攻毒方式;33℃培养的无乳链球菌攻毒的罗非鱼发病最快,死亡最集中;100 g的试验鱼比10 g的试验鱼更易感染。  相似文献   

广东地区副猪嗜血杆菌的分离鉴定     

何丽丽  李春玲  王贵平  贾爱卿  杨冬霞  宣春玲  郑铁锁  王金生 《中国兽医杂志》2010,46(3)

采用细菌分离的方法,结合PCR检测,生化鉴定,对广东地区2007年9月~2008年9月37个患病猪场送检的372份病料进行副猪嗜血杆菌分离鉴定,通过数据统计分析,显示副猪嗜血杆菌分离率达24.00%,副猪嗜血杆菌感染猪场阳性率达40.54%,表明副猪嗜血杆菌病在广东地区已普遍流行。  相似文献   

副猪嗜血杆菌广东分离株外膜蛋白P5基因的克隆及蛋白结构预测   总被引：3，自引：1，他引：2  

陈善真  王贵平  曾振灵  李春玲  贾爱卿  杨冬霞 《中国兽医学报》2010,30(2)

根据GenBank上发表的副猪嗜血杆菌(HPS)外膜蛋白基因的核苷酸序列设计并合成1对特异性引物,从广东省HPS分离株外膜蛋白P5基因中扩增出与预期设计的1116bp大小相符的片段,将扩增产物连接到pMD18-T载体上,进行序列测定和分析。结果表明,克隆出HPS广东分离株的目的基因,核苷酸长为1116bp,共编码371个氨基酸,与已发表的HPS(SH0165)外膜蛋白基因核苷酸序列同源性100%,氨基酸同源性100%。生物学预测分析结果显示,HPS外膜蛋白是一种混合型结构蛋白,含有α-螺旋、β-折叠、β-转角和无规则卷曲,其β-转角和无规则卷曲区域可能形成抗原表位;其N端含有1个信号肽,最佳切割位点在21～22个氨基酸;有15个抗原决定簇;无跨膜区;同源建模分析,未见相似三维结构。  相似文献   

兽用白花蛇舌草黄酮注射液澄清工艺研究     

辛欢欢  李春玲  王贵平 《动物医学进展》2010,31(5)

为研究兽用白花蛇舌草黄酮注射液的澄清工艺,试验采用石硫法和壳聚糖絮凝法制备兽用白花蛇舌草黄酮注射液,通过定性鉴别、黄酮含量测定及注射液有关物质检查,比较两种工艺的澄清效果。结果表明,用壳聚糖絮凝法制作的白花蛇舌草黄酮注射液含量高,但鞣质、树脂检查不合格;石硫法澄清白花蛇舌草黄酮注射液效果较好。  相似文献   

红将军苹果的化学疏花疏果试验   总被引：2，自引：0，他引：2  

薛晓敏  王金政  路超  聂佩显  王贵平 《落叶果树》2013,45(5)

以14年生红将军苹果为试材,分别在盛花期和谢花后喷45％结晶粉石硫合剂100倍液和10g/L有机钙制剂,研究石硫合剂和有机钙制剂的疏花效果和对果实品质的影响.结果表明,两种制剂疏花效果较好,花朵坐果率较喷清水对照降低10％左右,花序坐果率降低15％左右;每花序只坐一个果者分别为对照的1.41倍和1.55倍;喷两种制剂后对单果重、果形指数、果面色泽、果肉硬度和可溶性固形物含量等影响不大.  相似文献   

山东省苹果园的土壤肥力及培肥措施     

路超  王金政  薛晓敏  聂佩显  王贵平 《落叶果树》2013,(1):4-6

调查了山东省9个地市97个苹果园的土壤肥力状况,分析了土壤酸碱度的变化趋势、有机质含量及矿质元素的状况,提出了提高土壤肥力的措施。  相似文献   

副猪嗜血杆菌外膜蛋白P5对豚鼠树突状细胞成熟及功能影响     

佘志成  范红结  李春玲  王贵平  贾爱卿  杨冬霞 《畜牧兽医学报》2011,42(7)

为研究副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,Hps)外膜蛋白P5对豚鼠骨髓来源的树突状细胞(Dendritic cell,DC)刺激淋巴细胞增殖功能及细胞因子分泌的影响,以GM-CSF、IL-4联合诱导骨髓细胞生成未成熟DC,加入不同剂量副猪嗜血杆菌外膜蛋白P5,观察DC形态,检测混合淋巴细胞反应,ELISA法测IL-6、IL-12p70、TNF-α分泌情况.结果显示:经副猪嗜血杆菌外膜蛋白P5刺激后,可获得具有典型树突状突起形态的DC;经5μg·mL-1P5刺激的DC较对照IL-6、TNF-α分泌量极显著增加(P＜0.01),IL-12的分泌量有所增加(P＞0.05);50 μg·mL-1P5刺激的DC较对照IL-6分泌量极显著增加(P＜0.01),IL-12p70和TNF-α分泌量均极显著下降(P＜0.01).诱导后的DC刺激同种异体T淋巴细胞增殖的能力极显著增强(P＜0.01).本研究证明P5能影响骨髓细胞来源的DC的分化、成熟及功能的发挥,且不同剂量的P5对DC的成熟程度影响有差异.  相似文献   

靶向GP5基因脱氧核酶抑制PRRSV在MARC-145细胞中的复制     

宋德武  袁洁  李鑫  郭育培  杨建新  宣华  王贵平  丁壮 《中国兽医学报》2011,31(12)

针对猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）JL/07/SW株GP5基因设计了4个脱氧核酶,经体外切割试验筛选得到具有体外切割活性的脱氧核酶,并通过RT-PCR、TCID50、CPE、间接免疫荧光（IFA）检测具有切割活性的脱氧核酶抑制PRRSV复制效果进行评价。结果针对GP5基因的Dz-GP5-10抑制效率最高可达到82.4%,Dz-GP5-12也表现良好的抑制效果,表明GP5基因的这2个位点可能是PRRSV复制所必需的。本研究为PRRSV复制及基因组功能研究、抗病毒药物开发和转基因动物研究奠定了基础。  相似文献   

猪繁殖与呼吸综合征病毒TJM92株对猪肺泡巨噬细胞相关因子mRNA表达量的影响     

方鑫玉  黄世静  肖婷  肖海晗  谭建梅  王贵平 《兽医导刊》2020,(6):207-208

用灌洗法从健康仔猪分离猪肺泡巨噬细胞(PAM)。将PAM和TJM92-PRRSV混合孵育作为试验组,用10%RPMI-1640与PAM孵育作为对照组。分别孵育0 h、6h、12 h、18h和24h收获PAM,用qRT-PCR检测相关因子mRNA表达量。结果显示:与对照组相比,试验组TLR2、IL-10、IL-1α、IL-1β和TNF-αmRNA表达量先升后降,最后恢复上升。MHCⅡ和CD40 mRNA表达量先降后升。结论:TJM92-PRRSV可以诱导PAM相关因子mRNA表达量整体短暂下调然后迅速恢复。本试验结果为进一步研究PRRSV对免疫功能影响提供有益参考。  相似文献