屎肠球菌荚膜多糖的提取纯化及其多糖含量的测定     

刘永安  李学瑞  周建华  马丽娜  刘永生 《中国畜牧兽医》2017,44(5):1309-1314

为提取纯化屎肠球菌（E.faecium）荚膜多糖（CPS）并测定其多糖含量,试验采用高压法破碎菌体,加入核糖核酸酶（25 μg/mL）、脱氧核糖核酸酶（0.5 mg/mL）、溶菌酶（0.25 mg/mL）及蛋白酶K （1.25 mg/mL）等去除核酸和蛋白质,得到荚膜多糖粗提物,经过30 ku和100 ku超滤离心管超滤浓缩和DEAE Sepharose Fast Flow层析柱层析后,得到纯化的屎肠球菌荚膜多糖,再利用苯酚-硫酸法测定其含量。结果表明,成功从屎肠球菌中提取纯化出荚膜多糖,其含量为75.21%,初步确定了屎肠球菌荚膜多糖的提取纯化方法,为今后相关疫苗的研制奠定了基础。  相似文献   

日粮添加屎肠球菌制剂对泌乳中期奶牛泌乳和消化性能的影响     

袁霞  除巧云  王梦芝  霍永久  罗昱宏 《安徽农业科学》2017,45(17)

[目的]研究饲粮中添加屎肠球菌制剂对泌乳中期奶牛泌乳量和表观消化率的影响。[方法]选取24头体重、胎次、泌乳量、泌乳期、体况等基本一致的荷斯坦奶牛,随机分为3组:对照组、低剂量组(30 g/d屎肠球菌)、高剂量组(60 g/d屎肠球菌),测定泌乳量和第0、14、28天的表观消化率。[结果]泌乳量在时间上无显著差异(P0.05);高剂量组泌乳量最高,且显著高于低剂量组(P0.05),并高于对照组8.00%。高剂量屎肠球菌组干物质采食量显著低于低剂量屎肠球菌组(P0.05)。第28天,奶牛粗蛋白消化率显著低于第14天(P0.05),但粗脂肪消化率显著高于第14天(P0.05)。此外,高剂量屎肠球菌组粗脂肪消化率显著高于低剂量屎肠球菌组。[结论]奶牛泌乳中期饲粮中添加60 g/d屎肠球菌制剂能够提高泌乳量及饲料粗脂肪的表观消化率,有利于饲料的转化和利用。  相似文献   

粪肠球菌毒力因子gelE研究进展          下载免费PDF全文

孟庆君  高原  吕娜 《农学学报》2015,5(2):79-82

粪肠球菌与多种感染相关,明胶酶是其主要毒力因子之一,它影响粪肠球菌毒力,与粪肠球菌生物被膜形成有关。现对gelE在生物被膜形成中的作用进行综述。  相似文献   

粪肠球菌累积对虾夷扇贝免疫酶活性的影响   总被引：1，自引：0，他引：1  

李斌  陈碧鹃  齐占会  方建光  廉伟  任仲  王丽丽 《中国水产科学》2011,18(1):89-95

定量分析了粪肠球菌(Enterococcus faecalis)在虾夷扇贝(Pactinopecten yessoensis)中的累积及其组织分布,以及扇贝血淋巴中2种免疫相关酶的活性变化.采用接触染毒法,将扇贝浸泡于含105个细菌细胞/mL的海水中处理2周,采用平板计数法测定了在不同暴露时间和不同扇贝组织中细菌累积数量的变化,并抽取扇贝血淋巴测定了超氧化物歧化酶(SOD)和酸性磷酸酶(ACP)活性.发现处理第7天时,扇贝中含菌量达到最高,为5.20 lg(CFU/g),第14天时又降低到与第3天相当的水平.而累积速率(RA)在第1天时最高,此后均逐渐降低.结果表明,随着在细菌中暴露时间的延长,扇贝累积的细菌数量增长明显减缓.消化道以及外套膜和鳃中细菌含量最高,比软组织平均值高1个数量级以上;而在血淋巴中含量极低,比软组织平均值低2个数量级以上.血淋巴中SOD和ACP酶活性均有先升高后降低的趋势,第7天时2种酶活性均达到最大.实验期间,扇贝血淋巴中免疫酶活性与体内累积的细菌数量变化趋势一致.血清中的可溶性免疫因子对细菌侵染更敏感,2种酶活性与扇贝组织中累积的细菌数量具有明显相关性,但在血细胞中则不明显,由此推测血清可能是扇贝杀灭和消化入侵细菌的茸要场所.  相似文献   

致病性粪肠球菌对脊尾白虾(Exopalaemon carinicauda)免疫相关基因表达的影响          下载免费PDF全文

段亚飞  李健  李吉涛  张喆  刘萍 《渔业科学进展》2017,38(5):148-155

为了研究致病性粪肠球菌(Enterococcus faecalis)对脊尾白虾(Exopalaemon carinicauda)免疫相关基因表达的影响,分别对健康脊尾白虾注射生理盐水和粪肠球菌,测定了不同时间点血细胞和肝胰腺中酚氧化酶原(proPO)、C型凝集素(CTL)、超氧化物歧化酶(SOD)、组织蛋白酶D(Cat D)和组织蛋白酶L (Cat L)基因的相对表达量变化.结果显示,与对照组相比,感染粪肠球菌后,血细胞和肝胰腺中proPO基因表达量均于6h达到最大值(P＜0.05),随后逐渐降低至对照组水平;血细胞和肝胰腺中CTL基因表达量分别于12h和6h上升至最大值,随后逐渐降低;血细胞中CTL基因表达量于72 h虽有降低,但仍显著高于对照组(P＜0.05);血细胞和肝胰腺中SOD基因表达量分别于6h和3h达到最大值,随后逐渐降低,并于72 h达到正常水平;血细胞和肝胰腺中Cat D基因表达量变化趋势基本一致,呈现先降低后升高、然后显著降低再升高的趋势;血细胞和肝胰腺中Cat L基因表达量分别于6h和3h显著降低,随后逐渐升高至最大值,并于72 h达到对照组水平.研究表明,长时间的粪肠球菌感染对脊尾白虾免疫相关基因表达影响显著,本研究所用免疫相关基因均可作为粪肠球菌感染疾病的监测指标.  相似文献   

包被植物乳杆菌和屎肠球菌对肉鸡生长性能、免疫和抗氧化功能以及肠道菌群的影响     

宋丹  段涛  成俊林  乔琳  王丽  陈丽仙  李爱科  王薇薇 《动物营养学报》2022,34(2):877-887

本试验旨在研究双层包被植物乳杆菌和屎肠球菌对肉鸡生长性能、免疫和抗氧化功能以及肠道菌群的影响.选取144只体重相近、健康的1日龄爱拔益加(AA)肉公鸡,随机分为4个组,每组6个重复,每个重复6只鸡.对照组饲喂基础饲粮,试验组分别饲喂在基础饲粮基础上添加1 g/kg包被植物乳杆菌(活菌数为1.0×1010 CFU/g)(...  相似文献   

两种粪肠球菌的分离方法比较     

韩镌竹  李欣南  苏葳艺  杨文腰 《现代畜牧兽医》2015,(1)

本研究利用采集的鸡泄殖腔和猪肛门拭子样本400份，采用两种方法分离粪肠球菌并进行对比。结果显示，两种方法对4类样品中粪肠球菌的分离率分别为22%、33%、23%、22%（方法Ⅱ）和86%、91%、87%、82%（方法Ⅱ），说明建立了准确、高效、可靠的粪肠球菌分离方法。  相似文献   

产γ-氨基丁酸屎肠球菌的筛选及γ-氨基丁酸的定量     

朱泉  程金龙  朱元召  尹龙  倪晋东  程茂基  杨章平 《动物营养学报》2016,(8):2504-2511

本试验旨在利用分子生物学方法鉴定分离得到1株产γ-氨基丁酸(GABA)屎肠球菌,并定量测定所产GABA的量。从泡菜、酸奶、土壤、新鲜牛奶样品中筛选出一目标菌株F6,进行形态学特征与革兰氏染色鉴定;再扩增菌株F6的16S r DNA基因,然后测定该基因序列和构建系统发育树;同时采用高效液相色谱(HPLC)法定量测定菌株F6发酵液中的GABA含量。结果表明:菌株F6菌落大而光滑、圆形、直径1~2 mm、边缘整齐、乳白色;在分离培养基上菌落周围形成透明圈,使分离培养基呈黄色;在MRS固体培养基上菌落不透明,周围有透明圈。革兰氏染色鉴定菌株F6为阳性菌。分子生物学鉴定分析显示,菌株F6的16S r DNA基因序列与Gen Bank数据库中屎肠球菌(Enterococcus faecium)的相似性大于99%。HPLC法测定得到GABA标准曲线线性方程为Y=7 080 733.139 5 X-4 511.692 7(R2=0.999 4),通过方程得出菌株F6发酵液中的GABA含量为7.1 g/L,保留时间为7~10 min。结果提示,本试验筛选得到1株高产GABA的屎肠球菌F6。  相似文献   

福州动物园动物高水平耐庆大霉素肠球菌耐药表型检测     

陈小丽  罗小青  唐耀  王璜  洪海波  陈夏  俞道进 《动物医学进展》2012,33(7):122-125

为了解福州动物园动物细菌耐药现状,选用肠球菌为指示菌,采用琼脂平板筛选法(ADSP法)筛选高水平耐庆大霉素肠球菌(HLGRE)。根据美国临床实验室标准化协会(CLSI)推荐的微量肉汤稀释法测定耐药菌株对6种抗菌药物的耐药性,用PCR法对分离出的不同来源的高水平耐氨基糖苷类肠球菌进行菌种鉴定。从动物园圈养野生动物共分离出78株HLGRE,不同动物来源的分离率不同,其中草食动物HLGRE分离率最低,占55.56%;肉食动物HLGRE分离率最高,占84.38%。药敏试验结果显示,不同动物来源的HLGRE均对红霉素和土霉素的耐药率最高,分别为100%和96.1%,对氨苄西林和万古霉素的耐药率最低。  相似文献   

不同肠球菌基因组DNA提取方法对PCR鉴定的影响     

张祥  李晓博  谷素美  段志刚  王亚宾  胡慧  陈丽颖 《河南农业大学学报》2012,46(1):67-71

为研究肠球菌基因组DNA的不同提取方法对16SrRNA基因序列PCR、种属多重PCR、RAPDPCR等肠球菌鉴定结果的影响,分别采用6种基因组DNA提取方法(水煮法1、水煮法2、常规酚/氯仿抽提法、chelex-100法1、chelex-100法2和试剂盒法),对1株肠球菌标准菌株ATCC29212基因组DNA进行提取,以这些分别提取的DNA为模板在相同的扩增条件下进行PCR检测.结果表明,在16SrRNA基因序列PCR和种属多重PCR检测中以水煮法1进行肠球菌DNA的提取最适宜,而试剂盒法在RAPDPCR检测中效果最佳.  相似文献