猪链球菌快检法通过鉴定     

《中国动物保健》2005,(8):19-19

一种只需4小时即可知道结果的猪链球菌病2型的检测方法——猪链球菌多重PCR检测法，在京通过专家鉴定。这标志着我国已经掌握猪链球菌的快速检测方法。该方法把检测时间由原来的4天减少到4个小时，它由中国检验检疫科学研究院和江苏检验检疫局联合攻关研制。  相似文献   

猪瘟病毒E0基因在CHO细胞中的表达     

陈振海  范学政  夏春  王琴  宋立  王在时  宁宜宝 《中国预防兽医学报》2005,(6)

将EGFPE0融合基因插入哺乳动物细胞表达载体pCI-dhfr中,构建重组质粒pCI-EGFPE0。将重组质粒转染CHO(dhfr-),在荧光显微镜下观察到少数细胞呈现绿色荧光,表明转染成功。通过MTX加压筛选后,在荧光显微镜下观察到多数细胞呈现强绿色荧光,表明重组融合蛋白EGFPE0在CHO细胞中得到大量表达。高效表达重组融合蛋白细胞克隆的获得为进一步大量制备可溶性的猪瘟病毒E0糖蛋白、制备其单抗筛选抗原表位及研究E0蛋白的生物学功能奠定基础。  相似文献   

荧光PCR快速诊断一起新城疫     

谢海燕温清萍  朱燕秋 《中国动物检疫》2005,22(11):36-37

2005年1月底．广东省某规模养殖场的鸡出现了张口喘气、呼吸困难，有呼噜声、咳嗽，排黄绿色粪便等症状．部分鸡还有神经症状。发病约450只．发病率为1．2％。三天后鸡只陆续出现死亡．两天内死亡50只左右。解剖病死鸡，可见：喉头、气管粘膜明显出血，小肠轻度炎症。回肠、直肠、泄殖腔粘膜出血。临床无法确诊。经实验室快速诊断．为新城疫感染。  相似文献   

应用PCR技术检测空肠弯曲菌及结肠弯曲菌的研究     

王振国  刘金华  罗雁菲  蔡阳  肖成蕊  刘和平  徐宝梁  王岸英 《中国家禽》2005,9(Z1):133-135

本研究根据空肠弯曲菌及结肠弯曲菌的16s rRNA基因相同保守序列来设计引物,建立了一种PCR检测方法,该方法具有较强的特异性及灵敏性,其对空肠弯曲菌及结肠弯曲菌的最低检测限度为5 CFU/mL,它无需增菌培养过程可以直接对样品进行检验,在对鸡肉样品空肠弯曲菌及结肠弯曲菌的检测中取得了较好的效果.  相似文献   

乳牛布鲁氏菌病病原DNA快速检测技术的研究   总被引：16，自引：1，他引：16  

邱昌庆曹小安  杨春华周继章高双娣  程淑敏 《中国兽医科技》2005,35(2):85-89

在国内首次建立了乳牛原乳中布鲁氏菌外膜蛋白(OMP)25ku基因套式聚合酶链反应(nested—PCR)检测技术。结果显示，本方法的特异性好，只能扩增布鲁氏菌DNA，而不能扩增同样能引起乳牛流产的鹦鹉热衣原体、弓形虫、胎儿弯杆菌DNA；乳样的检测灵敏度达50CFU／mL，重复试验35次，可重复性和稳定性均十分理想；对4批331头凝集试验阳性(24份)或阴性(307份)乳牛的乳样用本方法检测，符合率为100％。在48h内即可获得诊断结果。本方法同样可用于血液或其他流产病料中布鲁氏菌DNA的检测。  相似文献   

PRRSV间接免疫荧光检测法的建立和应用   总被引：9，自引：0，他引：9  

彭长凌高崧  刘秀梵 《中国兽医科技》2005,35(4):256-260

以猪生殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)ATCC VR-2332株人工单独感染3头3周龄仔猪，并用PRRSV ATCC VR-2332株和猪圆环病毒2型(PCV2)联合感染2头3周龄仔猪，每日检查试验猪体温、采食情况及临床表现，并用HerdChek IDExx试剂盒测其血清抗体。PRRSV PCV2联合感染猪分别在感染后1、3周剖杀，PRRSV单独感染猪和健康对照猪分别在感染后1、2和3周剖杀，对全部试验猪的肺组织进行灌洗处理以获得肺泡巨噬细胞(PAM)．用PAM进行抹片，同时用肺组织直接进行触片做间接免疫荧光(IIF)检测。结果表明，用所获得的3株单克隆抗体均检测到人工感染猪肺组织中的PRRSV抗原。另外，用IIF检测7头临床疑似PRRS病猪的PAM抹片。其中沭阳县的2头猪呈现阳性反应；对这2头猪的肺组织进行病毒分离。在盲传到第4代时Marc-145细胞上产生明显的细胞病变，进一步证实用所获得的3株单克隆抗体检测临床样品的结果准确而可靠，且获得的3株单克隆抗体均可通过IIF用于检测猪肺组织中的PRRSV抗原。  相似文献   

猪弓形虫病特异PCR诊断方法的建立   总被引：11，自引：2，他引：11  

谢德华朱兴全  崔焕粦丘初集范万红  廖申权翟敏莉林瑞庆  翁亚彪 《中国兽医科技》2005,35(4):289-293

以核糖体DNA第一内转录间隔区(ITS1)序列作为弓形虫种特异的遗传标记．建立了猪弓形虫病特异PCR诊断方法。应用人工感染的方法建立了猪弓形虫病动物模型．摸索出猪弓形虫病PCR检测的最佳条件。敏感性和特异性试验结果显示，该PCR方法最低能检测到10个弓形虫速殖子的DNA，且与相关的8种原虫和线虫均无交叉反应，证明该PCR方法具有高度的敏感性和特异性。动物感染试验结果证明．在试验猪出现明显临床症状时(感染后第5d)．对取材的8个组织样品用该PCR方法检测，有6个组织样品为阳性，其中检出率最高的组织为肺门淋巴结。  相似文献   

安徽省鸡免疫抑制性疾病的流行病学调查   总被引：8，自引：0，他引：8  

杨克礼韦平  潘玲蒋玲艳  李莉萍阳秀英磨美兰  韦天超 《中国兽医科技》2005,35(8):665-670

采集了安徽省6个主要养鸡地区65群鸡的185只病鸡共986份组织样品，对可引起免疫抑制性疾病的5种最常见病毒进行了PCR检测。结果，传染性腔上囊病病毒（IBDV）、鸡传染性贫血病毒（CIAV）、马立克氏病病毒（MDV）、禽白血病病毒（ALV）和网状内皮增生症病毒（REV）的群阳性率和个体阳性率分别为73．08％和40．91％、46．15％和25．95％、41．54％和17．84％、18．46％和7．57％、13．85％和4．86％，其中被检鸡之二重或多重混合感染的总阳性率为24．33％。调查结果证实，免疫抑制性疾病在安徽省的商业鸡群中普遍存在，并与鸡群疾病多而复杂、损失大相关。  相似文献   

摄入不同能量的围产期乳牛肝低密度脂蛋白受体mRNA丰度的比较   总被引：1，自引：0，他引：1  

王雪莹孙玉成  李红梅王哲 杨连玉 《中国兽医科技》2005,35(10):811-815

将30头健康、经产、处于围产期的黑白花乳牛随机分为3组，每组10头。从产前28d开始，低能量组乳牛饲喂《中国奶牛饲养标准（2000）》减少20％日粮（能量摄入80％），对照组乳牛饲喂《标准》日粮（能量摄入100％），高能量组乳牛饲喂《标准》增加20％日粮（能量摄入120％），产后各组乳牛均饲喂标准日粮。至产后第56d结束试验；采用内对照RT-PCR方法检测摄入不同能量的围产期乳牛肝活体组织低密度脂蛋白受体（LDLR）mRNA丰度。结果，不同能量组乳牛肝LDLR mRNA丰度产前至产后均呈现先升高后降低的趋势。100％和120％能量组肝LDLR mRNA丰度在产后14d达最大值，且产后均高于产前（产后56d除外，P〈0．01或P〈0．05）；而80％能量组产后1d即达到最大值，产前14d至产后14d，LDLR mRNA相对表达量显著高于100％和120％能量组；产后28～56d，120％能量组显著高于80％和100％能量组（P〈0．01）。表明围产期乳牛能量摄入水平对肝LDLR mRNA丰度有显著影响。  相似文献   

原位杂交技术展望     

胡守萍  尹训南  付德霞  李伟杰 《畜牧兽医科技信息》2005,(12):14-15

1969年美国耶鲁大学Gall和Pardue首先创立了原位杂交技术，确定了爪蟾核糖体基因定位于卵母细胞的核仁中。与此同时，Buongiomo—Nardelli和A maldi John及其同事等相继利用同位素标记核酸探针进行了细胞或组织的基因定位。Oah应用3H标记的兔乳头状瘤病毒cRNA探针进行了兔乳头状瘤组织的冰冻切片进行杂交，首次用原位杂交技术检出病毒DNA在细胞中的定位。  相似文献