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1.
为了建立青蒿的SRAP最佳扩增体系,并筛选出SRAP多态性引物,本研究以青蒿叶片DNA为模板,采用正交试验设计,以Mg^2+、dNTP Mix、Taq DNA聚合酶、引物和DNA模板5种因素5个水平,对青蒿SRAP反应体系进行研究。结果表明,青蒿SRAP-PCR最佳反应体系为:引物0.6μmol/L、Mg^2+2.0 mmol/L、模板DNA 5.1 ng、Taq DNA聚合酶2.0 U、dNTPs 0.25 mmol/L,总体积为25μL。各因素对扩增反应均有不同影响,其中引物浓度的影响最大,dNTPs的影响最小。运用该体系对不同种质资源的青蒿进行验证,证明该体系稳定可靠,并在30个引物组合中筛选出了25对扩增条带清晰,多态性丰富的引物组合。这一结论为今后利用SRAP标记技术进行青蒿分子遗传学研究提供了科学依据。 相似文献
2.
3.
4.
以前的研究表明,B-单型地抵抗超强毒马立克病病毒攻击的效果依所使用的马立克氏病疫苗的种类不同而不同。为了测定同一血清型MD疫苗接种同一单型鸡后用MDMd5强毒攻击是否产生相似的保护性。 相似文献
5.
6.
RAPD技术对地方鸡种群体遗传结构的分析 总被引:16,自引:1,他引:15
利用RAPD技术对4个地方鸡种和1个引进鸡种的群体遗传结构进行分析,通过筛选的5个随机引物OPH-02、OPH-05、OPH-13、OPH-16、OPG-07对5个鸡种的池DNA进行多态性研究,结果表明:5个引物共产生条带61个,扩增产物片段的长度一般从150bp-4kb。 相似文献
7.
8.
香蕉ACC氧化酶基因(MAO3)的克隆及其表达特性分析 总被引:3,自引:0,他引:3
根据同源扩增得到香蕉(Musa acuminata) ACC氧化酶基因(MAO3) 的核心部分, 再通过3'和5'RACE扩增上、下游序列以及Genome-Walker的方法得到启动子部分, 共获得3 718 bp长度的序列。将所得结果进行聚类分析, 发现香蕉中ACC氧化酶的氨基酸序列非常保守, 各序列间的同一性高达99% ,与单子叶植物和双子叶植物中ACC氧化酶的氨基酸序列的同源性在66.7%~71.8%之间。组织原位杂交试验表明MAO3基因的表达具有组织特异性, 初步认为是在韧皮部筛管组织中特异表达。运用实时荧光定量PCR技术, 实时监测到了MAO3基因和香蕉乙烯受体基因ERS2受机械伤诱导的定量变化。 相似文献
9.
猪弓形虫病特异PCR诊断方法的建立 总被引:11,自引:2,他引:11
以核糖体DNA第一内转录间隔区(ITS1)序列作为弓形虫种特异的遗传标记.建立了猪弓形虫病特异PCR诊断方法。应用人工感染的方法建立了猪弓形虫病动物模型.摸索出猪弓形虫病PCR检测的最佳条件。敏感性和特异性试验结果显示,该PCR方法最低能检测到10个弓形虫速殖子的DNA,且与相关的8种原虫和线虫均无交叉反应,证明该PCR方法具有高度的敏感性和特异性。动物感染试验结果证明.在试验猪出现明显临床症状时(感染后第5d).对取材的8个组织样品用该PCR方法检测,有6个组织样品为阳性,其中检出率最高的组织为肺门淋巴结。 相似文献
10.
本文对大蚕、蛹的石蜡切片制作及其核酸特异染色方法进行探讨,针对虫体大和蛹体壁高度丁质化特点,对组织固定,脱水、透明、透蜡的时间相应的增加和固定前蛹皮剪开,在截位时要考虑切片段两头保留一段仅用来起保护作用的部分,并采用了二种核酸特异染色方法染色。结果表明:制片设计方案基本可行,部分细节需进一步改进;甲基绿-派罗宁(昂纳-帕彭海姆)染色法的切片组织颜色层次分明,DNA含量丰富的丝腺组织呈紫黑色,其它组织的DNA呈紫红色,RNA呈淡红色,改良的甲基绿一派罗宁染色法的切片组织颜色偏淡;孚尔根染色法的切片组织颜色层次分明,核酸呈紫红色,其它无色,能较好的以颜色的深浅来判断核酸的丰度。更理想的染色方案还有待进一步摸索。 相似文献