基于实时环介导等温扩增技术快速检测玉米晚枯病菌     

何瑞玒  薛春生  刘思宁  王萌露  李辉 《植物检疫》2023,(2):62-68

为了利用实时环介导等温扩增（loop-mediated isothermal amplification,LAMP）技术,特异、灵敏、快速地检测检疫性病原菌玉米晚枯病菌（Cephalosporium maydis）,本研究选择种间遗传距离较高的Tef-1α和H3基因作为特异性基因,进行特异性引物的筛选、检测温度的优化、灵敏度和特异性检测等研究。实验结果表明,最佳引物组合为Tef-2,检测温度为65℃,最小检测限为0.10 pg/μL,且只对玉米晚枯病菌靶基因特异,检测应用结果可靠。环介导等温扩增技术能够用于玉米晚枯病菌的高效特异性检测,可为检验检疫部门对玉米晚枯病菌的检测工作提供有力的保障。  相似文献   

葡萄扇叶病毒RT-LAMP检测方法的建立     

谈静惠  谢婷  张博文  陈林 《植物检疫》2023,(4):8-12

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反转录-重组酶介导等温扩增（RT-RAA）快速检测基因2型猪繁殖与呼吸综合征病毒     

陈耀  仲欣雨  吴陈雨  丁雪  黄璟  王欢莉  范忠军  孙静  陈星逸  余树培  夏文龙 《中国动物检疫》2023,40(1):121-127

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牛冠状病毒交叉引物扩增快速检测方法的建立     

唐豪  贺泂杰 《中兽医医药杂志》2023,(4):31-35+97

牛冠状病毒(BCoV)引起犊牛腹泻,对养牛业造成极大危害。本研究采用交叉引物扩增(CPA)方法和核酸检测装置相结合,建立了BCoV的可视化快速检测方法。结果表明,CPA体系Mg²⁺最佳物质浓度为2.0 mmol/L,甜菜碱最佳物质浓度为0.4 mmol/L,d NTPs最佳物质浓度为0.6 mmol/L,Bst DNA聚合酶最佳浓度为1.5 U/μL,60℃为最佳反应温度,60 min为最佳反应时间。采用CPA BCoV-N反应体系同时检测沙门菌、大肠埃希菌、弯曲杆菌、牛冠状病毒、牛病毒性腹泻病毒、牛轮状病毒等犊牛腹泻相关病原,层析试纸条检测显示只有牛冠状病毒呈现检测线,未出现交叉反应。结果显示,CPA BCoV-N具有较高的特异性,CPA检测BCoV不需要昂贵的PCR仪器,简单的水浴或培养箱即可完成DNA扩增,封闭式核酸检测装置避免了气溶胶污染,对结果的判断更加直观客观,是一种简便、快速、灵敏的BCoV检测方法。  相似文献   

棉花SSR多重PCR技术的初步研究和利用   总被引：3，自引：0，他引：3  

马雪霞  王凯  郭旺珍  张天真 《分子植物育种》2007,5(5):648-654

简单重复序列(simple sequences repeat,SSR)具有数量丰富、高度多态、共显性等优点,是一种极具实用价值的标记,目前已成为研究种质资源遗传多样性、基因组作图的首选标记.SSR多重PCR扩增法可同时完成多个标记检测,具有高效、经济、快捷的特点,并保持了单一SSR引物扩增的高度敏感性和准确性.本文选取6对SSR引物,配成三组SSR两重PCR反应,并设置五种不同反应体系以探索PCR反应体系对其影响,以单一引物PCR扩增为对照,对用于构建亚洲棉(Gossypium arboreum)遗传图谱所用的亲本、F1及F2群体单株的DNA模板进行多重PCR探索、分析;另外,在扩增产物的电泳检测时,结合银染技术,试验了单一引物PCR扩增产物在同一泳道同时上样和先后分时上样的两重检测的方法,以期对这种方法进行多态性位点检测的效果进行评价.结果表明,即使采用与单一引物PCR相同的反应体系,两重PCR扩增也可获得与之相同的多态性产物;而两重检测法的结果亦显示出与相应的单引物检测到的相应的多态性位点,能准确反映单引物所能达到的检测效果,因而为SSR的多重PCR和扩增后多重检测的技术在高效的遗传图谱构建工作中进一步应用提供实验依据.  相似文献   

牛Myostatin基因单核苷酸多态性分析   总被引：10，自引：0，他引：10  

史明艳  昝林森  李保兰  刘霞  张自富 《中国农学通报》2005,21(6):24-24

Myostatin基因即肌肉生长抑制素，是一种肌肉生长的负调控因子。应运PCR-SSCP和测序的方法对中国秦川牛、南阳牛以及国外引入品种皮埃蒙特牛双肌基因的第三外显子进行了多态性分析。结果表明：第三外显子938处G→A的单核苷酸的突变造成了南阳牛、皮埃蒙特牛第三外显子扩增片段多态性,秦川牛则不然。  相似文献   

SSR分子标记技术及其在玉米种子鉴定上的应用   总被引：10，自引：2，他引：10  

周岚  陈殿元 《中国种业》2005,(6):51-52

近年来,分子标记的研究与利用得到了迅速的发展,对不同分子标记技术的选用,主要取决于应用目的和研究对象,理想的分子标记应既简单又可靠.  相似文献   

对Bt毒蛋白不同抗性水平棉铃虫品系的生物学研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

崔学芬  夏敬源 《棉花学报》2003,15(3):163-165

用对Bt毒蛋白(Cry1Ac)具有一定抗性水平的安阳品系和相对敏感的新疆品系棉铃虫进行Bt毒蛋白(Cry1Ac)的室内毒力测定结果表明,两品系的LC50值分别为8.7645g·L 1和0.2547g·L 1,前者是后者的34.4倍。用转Bt基因抗虫棉中棉所29和常规棉花品种中棉所35蕾期的倒3叶饲养安阳品系和新疆品系棉铃虫的初孵幼虫(孵化后24h),结果表明:两个棉铃虫品系在取食抗虫棉后的累计校正死亡率在1～2d内差异不明显;新疆品系棉铃虫在转Bt基因抗虫棉上发育的最高龄期为4龄,其比率为6.7%;而安阳品系部分棉铃虫能够在转Bt基因抗虫棉上完成生长发育,其4龄幼虫的比率为45.5%,5、6龄幼虫的比率分别为12.6%和3.8%,有1.6%的幼虫能够正常化蛹;用常规棉棉叶饲养的安阳品系和新疆品系棉铃虫各龄幼虫的发育历期差异不显著,而用转Bt基因抗虫棉棉叶饲养的安阳品系棉铃虫幼虫的发育历期与新疆品系虽然差异不显著,但前者的发育历期均短于后者。  相似文献   

小麦光敏雄性不育系A31在不同生态地点的育性变异   总被引：2，自引：0，他引：2  

马翎健  何蓓如  宋喜悦  胡银岗 《中国农学通报》2004,20(2):76-76

本文通过在不同生态点的育性试验，观察光敏小麦雄性不育系A31的育性表现和育性转换特性。A31在7个不同生态点的自交结实率结合各试验点的光温条件分析表明，其雄性育性随日长增加有明显的下降趋势，日长是影响A31育性的主导因素，在日长相近条件下，温度对A31育性也有一定的效应；A31育性转换的临界日长约在14.5h左右。  相似文献   

有用的水稻种质中与白叶枯病抗性基因连锁的DNA标记的多态性     

J.Ramalingam  邱敦莲 《国外作物育种》2002,21(5):1-2

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