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11.
通过对补反、琼扩双阳性及补反或琼扩单汨性的79份免疫马血清和52份自然感染马血清的ELJSA终点滴度测定,确定了被检血清适宜稀释倍数。还证明采用多头份健康马混合血清作为不同地区被检血清的阴性对照是适宜的。对1.625份不同地区的马血清的检测。进一步证明本法的特异性的, 用ELISA检测30份国际参照血清,所获结果与琼扩试验完全一致。  相似文献   
12.
应用间接荧光抗体试验和琼脂扩散试验对绵羊进行性肺炎诊断的研究表明,这两种诊断方法的特异性是强的,用以对采自于四川凉山州罗吉山羊场的108份血清进行检查,其共同阳性或疑似的有17份。阳性羊均是从新西兰和澳大利亚进口的“边区来斯特”种羊及其后裔。用间接荧光抗体试验检测了内蒙呼盟地区的绵羊血清135份,阳性有7份.由此证明,我国确有绵羊进行性肺炎病的存在,应予以高度重视。  相似文献   
13.
根据已发表的马流感病毒核蛋白基因序列,设计并合成一对特异性引物,经反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)成功扩增出了我国马流感病毒(A/equine/Qinghai/1/94核蛋白基因。将该片段连接到PGEM-T-EASY载体并转化DH5α,提取阳性菌落的质粒径EcRo1酶切的PCR鉴定其大小为1.5kb左右,对其测序并进行分析发现,与A/Equine/Kentucky/2/86,A/Equine/Miami/1/63等关系较近,同源率为93.3%--93.4%,而与我国马流感吉林A/Equine/Jilin/1/89株关系较远,同源率仅为84.6%。  相似文献   
14.
将EIAV驴白细胞弱毒疫苗株在驴胎皮肤细胞中连续传代,分别提取第13代、18代、21代、23代、26代病毒培养物的前病毒DNA,以LTR特异性引物PCR扩增前病毒LTR,并进行克隆及测序分析。与本实验室已测定的驴白细胞毒株LTR的序列比较发现,驴胎皮肤细胞毒株LTR的U3负调节区出现大段的插入、点突变、缺失,U3增强子区变异较小。将LTR片段插入到pCAT-basic载体CAT报告基因前,转染驴胎皮肤细胞,通过检测CAT表达量来评价LTR的启动子活性。驴胎皮肤细胞毒株LTR的启动子活性随着病毒传代次数的增加而逐渐增强,而驴白细胞弱毒株LTR的启动子活性很低。  相似文献   
15.
有研究认为病毒基因组长末端重复序列LTR与病毒的毒力和复制能力直接相关.中国马传染性贫血弱毒疫苗是由一株高致病力毒株经体外白细胞传代而致弱的疫苗.经过体外超过110代传代后,病毒丧失了对马高致死性毒力并保持了良好的免疫原性.本文对传代过程中的不同代次病毒基因LTR进行了克隆和序列测定,发现传代过程中LTR发生了一系列明确的变异,一是转录起始位点在64代之前均以GGAC为特征,64代之后则表现为不规律的GAAC,AAAC,AGAC或GGTC;二是TAR起始碱基在59代之前多数为A,而64代之后均为G;三是在45代之后(55代除外),poly(A)附加位点一致表现为AA,这种一致的核苷酸变化均发生在毒力明显降低的代次,提示这些突变引起的位点或结构变化很可能与病毒毒力减弱有直接关系.  相似文献   
16.
按最新的病毒分类和命名,慢病毒被划为反转录病毒科的慢病毒属,并分为5个亚属8个种:灵长类慢病毒,包括人免疫缺陷病毒Ⅰ型(HIV-1)、人免疫缺陷病毒Ⅱ型(HIV-2)和猴免疫缺陷病毒(SIV);绵羊和山羊慢病毒,包括梅迪-维斯纳病毒(MVV)和山羊关...  相似文献   
17.
山羊关节炎-脑炎(CAE)是年80年代新发现的一种由反转录病毒科慢病毒亚科成员引起的山羊慢病毒传染病。由于该病与马传染性贫血(EIA)、绵羊进行性肺炎(OPP)以及人类艾滋病(AIDS)等慢病毒密切相关而引起极大重视,相继建立了CAE琼脂扩散试验和酶联免疫吸附试验等诊断方法。流行病学普查结果表明,美洲CAE感染率为83%,欧洲为61%,我国在1985年从进口萨能氏奶山羊检出CAE阳性羊。迄今为止,  相似文献   
18.
马传贫驴白细胞弱毒疫苗株基质蛋白基因的克隆与表达   总被引:5,自引:0,他引:5  
从感染驴白细胞的马传贫驴白细胞弱毒疫苗株前病毒DNA中克隆了编码基质蛋白(p15)的基因,并在大肠杆菌中进行了表达,所表达的蛋白是一种可溶性的融合蛋白,其氨基端带有6个组氨酸的标签,因此可以用固定化金属离子亲和层析法在非变性条件下进行纯化,在间接ELISA和免疫印迹试验中,重组的基质蛋白可与马传贫阳性血清样品发生反应,而与健康马血清无任何反应,这表明该重组蛋白具有良好的抗原性和特异性,可用于马传贫弱毒疫苗株在体内外复制及在接种马体人免疫应答的研究中。  相似文献   
19.
山羊关节炎脑炎间接ELISA诊断方法的建立赵亚光王振漪沈荣显(中国农科院生物技术研究中心)(中国农科院研究生院)(中国农科院哈尔滨兽医研究所)山羊关节炎脑炎(CAE)是80年代新发现的一种由反转录病毒科慢病毒亚科成员CAE病毒引起的山羊慢病毒传染病。...  相似文献   
20.
一种简单,快速提纯腹水单克隆抗体(IgG)的方法   总被引:2,自引:0,他引:2  
  相似文献   
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