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61.
62.
将马传贫弱毒在LP、LL和LX继代细胞上培养传代,获得三株传代毒——LPV、LLV和LXV。传代毒对继代细胞能有规律地引起细胞病变;在电镜下,可见大量的典型马传贫病毒粒子以出芽方式成熟;经用补体结合(CF)反应、免疫扩散(ID)反应、免疫荧光(IF)抗体及ELISA等方法检测,传代毒随传代次数的增加,其对细胞的感染性也规律的增强;第5代和第10代传代毒对驴白细胞的TCID_(60)分别为5.5和6.5。将LPV、LLV和LXV传代毒接种健康马,临床观察293天,未见异常;接种后21天,感染马100%出现CF和ID抗体;攻击马传贫强毒后,分别保护4/4、3/4和2/4。 相似文献
63.
为建立美洲马传贫毒株和我国弱毒疫苗株鉴别诊断PCR,对接种马传贫阿根廷流行毒株后马4个发热期(23、40、51和70d)外周血单核细胞前病毒DNA gag基因和gP90基因的核苷酸序列进行了监测,经过序列分析发现4个发热期中前病毒gag基因核苷酸序列变化不明显,变异率在1%之内,表明前病毒gag基因在马体内比较保守,可以作为设计鉴别诊断引物的区域;gp90区的基因变化比较大,核苷酸序列变异率在8%~10%之间,通过对几个发热期核苷酸序列推导氨基酸的分析,可以划分出A1、A2、A3和A44个可变区,但其中A1和A4变异都很稳定,在马体发病的整个过程中均只发生1次变异,而A2区第3个发热期变异后,在第4个发热期又回复了突变。对马传染性贫血病毒阿根廷代表毒株前病毒gag和gp90基因核甘酸序列的动念检测结果表明,马传贫病毒在马体整合为前病毒之后比较稳定,这就为建立PCR鉴别诊断方法提供了依据。 相似文献
64.
马传染性贫血病毒感染马免疫控制机制的研究进展 总被引:3,自引:0,他引:3
马传染性贫血病(equine infectious anaemia,EIA)是由反转录病毒科慢病毒属的马传染性贫血病毒(equine infectious anaemia virus,EIAV)引起的一种马属动物传染病。已有许多直接的证据表明,尽管EIAV在马体内经常而迅速地发生变异,宿主的免疫系统最终有能力控制病毒的繁殖。慢性EIA的临床过程,实质上是机体带病毒产生保护性免疫的过程。EIAV进入体内后因大量复制产生病毒血症,临床表现发热等症状。同时刺激机体产生免疫应答,使病毒的复制逐渐受到抑制,直至病毒血症消失,病马暂时恢复正常,病毒在体内迅速变异形成一个异质性群体,在免疫压力选择之下可产生一个优势的抗原变异株,它能逃避机体的免疫控制重新大量复制,再次导致病毒血症和临床发病。 相似文献
65.
本试验以纯化的重组马传贫病毒跨膜蛋白主要免疫决定区蛋白作为诊断抗原建立了间接ELISA诊断方法,确定其最佳工作条件为每孔包被重组抗原2仙g,兔抗马IgG酶标抗体以1:4000,血清以1:40倍稀释,底物作用时间为10 min;判定标准为P/N值大于2,且OD值大于0.2的血清为阳性,否则判为阴性。本试验所建立的诊断方法与琼扩试验以及以琼扩抗原作为包被抗原的ELISA试验进行了比较,表明该诊断方法敏感性更高。特异性和重复性试验表明该诊断方法具有良好的特异性和重复性。通过对4匹马传贫驴白细胞弱毒疫苗免疫马血清抗体的检测,发现均在接种2周后可产生抗马传贫病毒跨膜蛋白主要免疫决定区相应抗体。此抗体一直持续存在到本试验检测的免疫后17个月,且效价较高。,用此方法检测203份马血清样品,其中161份呈抗体阳性,还检测了马传贫自然感染马血清93份,结果全部为阳性。 相似文献
66.