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21.
ClassⅠ新城疫病毒概述   总被引:1,自引:0,他引:1  
新城疫病毒是影响养禽业健康发展的主要病原之一。新城疫病毒只有一个血清型,但根据亲源关系可以划分为ClassⅠ和ClassⅡ两大类。ClassⅠ新城疫病毒于2006年被证实存在,当前可被细分为9个基因型(1~9)。ClassⅠ所有自然分离株均为无毒株或弱毒株,但有经人工传代返强的报道,由于其分布广泛,数量庞大,对养禽业有巨大的潜在威胁。为了更好的了解ClassⅠ新城疫毒株的生物学特性,为研究ClassⅠ新城疫病毒提供参考,现将其基因组结构、分子流行病学及检测方法等综述如下。  相似文献   
22.
23.
[目的]研究信号分子AI-2对禽致病性大肠杆菌(APEC)的调控作用.[方法]采用改良结晶紫半定量法和荧光染色法检测AI-2对APEC生物被膜形成能力的影响.Real-time PCR检测AI-2对APEC毒力基因转录水平的影响.活菌计数法观察AI-2对APEC黏附和入侵鸡胚成纤维细胞DF-1的影响.[结果]AI-2在浓度为0.185 mmol·L-1时,生物被膜形成能力显著增强,而浓度为0.037mmol· L-1和0.285mmol·L-1时,生物被膜形成能力无显著变化.Real-time PCR结果显示加入AI-2后,APEC毒力基因pfs,vat,luxS,tsh,fuyA,iucD转录水平显著下调,ompA和iss则上调.加入AI-2后,APEC对DF-1细胞的黏附和入侵能力分别下降到原来的57.35%和36.64%.[结论]AI-2对禽致病性大肠杆菌生物被膜形成具有浓度依赖性,在适宜浓度下能显著增强.AI-2能减弱禽致病性大肠杆菌毒力基因的转录水平和对DF-1的黏附和入侵能力.表明AI-2参与调控APEC致病性.  相似文献   
24.
本研究通过对鸡败血支原体(MG)强毒株黏附素GapA的N端(98aa-322aa)高变区作为免疫原免疫小鼠.利用Bac-to-bac系统构建GapAN重组杆状病毒,感染Sf9昆虫细胞,以作为检测抗原,筛选获得5株抗GapAN端的单克隆抗体:3D4、5810、185、1D7和4B3。经部分免疫学特性鉴定,5株单抗具备良好的免疫反应性,并且在免疫荧光试验及Western-blot检测过程中发现这些单抗针对的抗原表位存在明显差异,这些单抗的成功制备为下一步深入研究MG的黏附特性奠定了基础。  相似文献   
25.
为了对新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)的细胞毒性T细胞(cytotoxic T cell,CTL)表位进行研究,本研究通过在线分析软件预测了NDV弱毒株La Sota和强毒株Herts/33 NP蛋白的MHC I类分子限制性表位,共获得9条可能的表位多肽序列,并人工合成了这些短肽。分别构建了含有La Sota和Herts/33 NP基因的DNA重组质粒并免疫4周龄SPF级C57BL/6小鼠,首免后21 d加强免疫1次,二免后10 d无菌采集脾脏制备脾淋巴细胞悬液,采用ELISpot法测定预测多肽诱导脾淋巴细胞分泌IFN-γ的能力,根据分泌IFN-γ形成的特异性斑点数进行生物统计学分析,发现2条多肽产生的斑点数显著高于无关肽刺激组(P<0.01)。确定了针对小鼠H-2 kb的限制性T细胞抗原表位的2条多肽。这些可用于合成特异性的MHC-肽四聚体,为后续研究NDV与树突状细胞(dendritic cells,DC)及T淋巴细胞之间的免疫抑制机制提供重要保障。  相似文献   
26.
检测鸭疫里默氏杆菌(Riemerellaanatipestifer,RA)10个基因在不同菌株间的分布并进行序列分析,研究其在不同菌株中的保守性。分别选取8株RA的10个基因进行PCR扩增,扩增产物克隆于pMD18-T载体,进行序列测定和分析。结果显示:测定的8株RA菌株中均能检测到Lipid A、LuxE和TCTR编码基因,表明这些基因在不同血清型RA菌株中的保守性良好;TR基因仅从6株具有致病性的RA菌株中扩增得到,而2株非致病性RA菌株NJ1和NJ4未能扩增到,表明TR基因可能与RA菌株的致病性相关;IS1仅从6株血清1型和2型的RA菌株扩增得到,2株血清10型菌株均未扩增得到,提示IS1为血清10型菌株缺失基因。  相似文献   
27.
根据Ⅶ型新城疫病毒基质蛋白基因保守序列设计并合成特异性引物,建立快速检测Ⅶ型新城疫病毒的实时荧光定量RT-PCR方法。通过RT-PCR方法克隆Ⅶ型新城疫病毒M基因靶序列,并将其连入T-Easy载体,制备阳性标准品,优化反应条件,以10倍系列稀释的标准品绘制标准曲线,其相关系数为0.999。检测结果显示,该方法的灵敏度可达100 copies/μL,而且特异性良好,除Ⅶ型新城疫病毒外,对Ⅱ型/Ⅲ型/IV型/Ⅸ型新城疫病毒、H5亚型禽流感病毒、H9亚型禽流感病毒、鸡传染性支气管炎病毒检测结果均为阴性。本研究所建立的检测方法重复性好,批内和批间变异系数均小于5%。对40份实验感染样品的检测结果表明,其检出率为95%,而常规RT-PCR方法检出率仅为70%,表明该方法比常规RT-PCR检测方法灵敏度更高、特异性更强。  相似文献   
28.
在进行病毒学的实验研究中,常需将病毒毒种冻干。毒种冻干后可以长期保存,以免去传代的工作量和频繁传代引起的变异,减少开支。因本研究室尚无小型冻干机,我们在“家禽病毒疫苗开发”的研究中,为达到冻干目的,采用简易冻干的方法,对六种  相似文献   
29.
抗鸡IgM单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立与鉴定   总被引:1,自引:0,他引:1  
  相似文献   
30.
试验采用5个批次的R1—23口服弱毒活疫苗分别对5组合不同日龄健康鸡进行两次饮水免疫,间隔时间为2d,两次免疫的剂量均是2.5×109/只个活菌。各免疫组免疫后每月随机取一定数量的免疫鸡与同批对照鸡一起用C48—1强毒滴鼻攻击,攻击剂量为每只4×107/0.2mL个活菌。测试结果表明:5个批次活疫苗所测得6个月免疫期的平均保护率为76.70%(46/60)。由此可见,R1—23口服弱毒活疫苗具有较明显的延长免疫期的优势。  相似文献   
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