猪圆环病毒2型ORF2基因的表达及活性研究   总被引：1，自引：1，他引：0  

陈涛  闫若潜  谢彩华  吴志明  张志凌  张健  刘英 《动物医学进展》2009,30(2)

根据猪圆环病毒2型(PCV-2)基因序列设计1对特异性引物,PCR扩增PCV-2去核定位信号(nuclear localization signal,NLS)的Cap蛋白基因(oRF2),经Bam H Ⅰ/HindⅢ双酶切后将其克隆到表达载体pQE30中并转化大肠埃希菌JM109,采用IPTG进行诱导表达,采用自行创新的纯化方法对表达的融合蛋白进行纯化,Western blot鉴定纯化后的重组Cap蛋白(rCap)活性.结果表明,成功克隆了无核定位信号的ORF2基因,其分子质量大小为579 bp;表达的rCap蛋白大小为24.1 ku左右,与预期大小相一致;经纯化后的rCap蛋白纯度在95%以上;Western blot鉴定结果表明,Cap蛋白可以和抗PCV-2抗体反应,具有很好的抗原性.本研究为进一步建立以Cap蛋白为包被抗原的PCV-2间接ELISA诊断方法以及PCV-2疫苗的研究奠定了基础.  相似文献   

鸡腿菇液体发酵工艺的优化     

兰蓉  杨国伟  吴志明  苑函 《安徽农业科学》2009,37(15):7179-7181

[目的]对鸡腿菇液体发酵培养基和培养条件进行筛选及优化。[方法]以鸡腿菇为供试材料,胞外多糖和菌丝体生物量为指标,通过单因素试验和正交试验对鸡腿菇液体发酵培养基配方及培养条件进行筛选及优化。[结果]鸡腿菇液体发酵产胞外多糖的最佳培养基组合为：葡萄糖2．0％,酵母膏0．75％,CaCl0．2％;鸡腿菇液体发酵产菌丝体的最佳发酵培养基组合为：葡萄糖2％,酵母膏0．75％,KH2PO4 0．2％;鸡腿菇液体发酵产胞外多糖和菌丝体的最佳发酵条件均为：起始pH值7．0,接种量20．0％,装液量120ml,培养天数6d;[结论]该研究为鸡腿菇的进一步开发提供了科学依据。  相似文献   

常德市绿地灌木植物应用现状调查   总被引：1，自引：0，他引：1  

吴志明 《农业科技通讯》2011,(3):215-218

通过对常德地区园林绿地灌木的调查,发现有常用灌木植物70余种,同时对这些灌木进行了归纳统计,对其应用形式、种类、多样性、群落结构以及灌木的特性进行了详细的调查总结,认真地分析了应用中存在的问题,并针对这些问题提出了6条建议。  相似文献   

不同处理对桂花扦插繁殖的影响   总被引：2，自引：0，他引：2  

吴志明  向国红 《贵州农业科学》2011,(11):178-180

为探索不同激素、不同扦插时间和不同扦插基质对桂花扦插繁殖效果的影响,以便更好地指导当地桂花扦插繁殖生产,进行了不同激素、不同扦插时间和不同扦插基质处理桂花插穗的试验.结果表明,激素、扦插时间和扦插基质的选择对桂花成活率均有显著的影响;对桂花扦插繁殖效果最佳的处理组合是每年5～6月切取生长壮实、成熟的桂花茎节,以珍珠岩作...  相似文献   

霞草红树莓复合饮料的研制     

王晓杰  吴志明  刘玮  刘亚红 《安徽农业科学》2010,38(11):5831-5833,5847

[目的]以霞草和红树莓为主要原料,研制霞草红树莓复合饮料。[方法]采用正交试验确定霞草汁的最佳浸提条件、复合饮料最佳配方和复合稳定剂的添加量。[结果]霞草汁最佳浸提条件为料液比1∶1（g/ml）,pH值7,浸提时间5h,浸提温度90℃。最佳配方为霞草汁用量50%（V/V）,红树莓汁用量30%（V/V）,白砂糖添加量45g/L,柠檬酸添加量0.5g/L,在此配方下复合稳定剂的最佳配比为黄原胶10.04mg/ml,柠檬酸三钠0.12mg/ml。[结论]在最佳条件下生产的复合饮料,经感官审评、理化指标和微生物指标检验均合格,故霞草红树莓复合饮料口感好、风味独特、工艺简单,含有丰富的营养成分,并且有药用价值和保健功能,具有较好的推广价值。  相似文献   

黄瓜6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶基因cDNA片段的克隆及表达分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

魏跃  陈啸寅  李振陆  王永平  史建磊  吴志明  张蜀宁  陈劲枫 《南京农业大学学报》2010,33(1)

以黄瓜品种露丰为材料,根据已报道的6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶基因(6PGDH)的保守氨基酸序列设计简并引物,利用RT-PCR技术获得黄瓜6PGDH的cDNA同源片段,命名为CSPG(登录号为EU815934)。该片段长度为1 207 bp,包含一个936 bp的开放阅读框(编码311个氨基酸)和271 bp的Poly A 3′非翻译区末端,无内含子;该基因编码的氨基酸序列与拟南芥、大豆、水稻、玉米、菠菜的6PGDH基因有75%以上的同源性。运用半定量RT-PCR技术对6PGDH基因的转录水平进行分析,结果表明:该基因在叶、根、茎中均有表达,高温胁迫下的表达量高于常温对照,说明6PGDH基因与热胁迫相关。  相似文献   

猪附红细胞体病诊断与防控     

拜廷阳  赵德明  吴志明  闫若潜  普志平 《动物医学进展》2010,31(8):106-109

猪附红细胞体病是由猪附红细胞体引起的一种以黄疸和贫血为主要特征的人畜共患传染病。该病流行范围广泛,对养猪业危害严重。根据其16 S RNA序列,现将猪附红细胞体划为支原体属的单个新种。猪附红细胞体主要通过接触被病原污染的血液、胎盘感染、蚊虫叮咬等途径传播。猪附红细胞体对干燥敏感,对低温的抵抗力较强;对青霉素类药物不敏感,但对强力霉素敏感。通过引种时做好种猪的选育、在夏秋季节加强畜舍消灭蚊蝇工作、加强饲养管理以增强猪体抵抗力、采用敏感药物进行早期治疗等相关措施可对该病起到积极预防作用。论文主要对猪附红细胞体的病原学、流行病学、临床症状、病理变化、诊断、预防及治疗等进行了综述。  相似文献   

甜瓜属野生种Cucumis hystrix Chakr.胞质葡萄糖-6-磷酸脱氢酶基因的克隆与启动子结构分析     

曹明明  吴志明  娄群峰  阮氏清云  陈劲枫 《南京农业大学学报》2013,(2):25-30

根据植物葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PDH,EC1.1.1.49)氨基酸保守区域,设计简并引物,采用RT-PCR技术克隆得到甜瓜属野生种Cucumis hystrix Chakr.(2n=24)G6PDH基因cDNA片段;随后基于该序列设计特异引物,PCR方法筛选野生种BAC文库,获得2个BAC阳性单克隆。测序后获得了G6PDH基因全序列及其上游启动子序列,GenBank登录号:JQ771576。序列分析显示:G6PDH基因全长约6.5 kb,由15个外显子和14个内含子组成;内含子序列均符合5’-gt-ag-3’结构。外显子拼接后获得了G6PDH基因的开放阅读框(ORF)序列,序列全长1 551 bp,编码516个氨基酸,与黄瓜基因组网站公布的G6PDH基因核苷酸序列和氨基酸序列同源性分别为98.71%和99.03%。野生种G6PDH氨基酸序列N端缺少转运肽序列,确定为野生种胞质G6PDH。氨基酸序列与烟草、马铃薯、荷兰芹、猕猴桃、拟南芥、大豆、小麦、玉米、葡萄、杨树等植物胞质G6PDH同源性高达77%以上。系统发育树分析发现,甜瓜属胞质G6PDH与茄科植物最先聚类,植物胞质G6PDH在分子进化水平上与物种进化相符。启动子结构分析表明:序列含有启动子基本元件TATA-box、CAAT-box,还含有丰富的光响应元件,与环境胁迫响应相关的不同顺式作用元件,促进高水平转录的5UTR Py-rich stretch元件和提高表达的CAT-box元件等。  相似文献   

甜瓜属种间杂交质体DNA多态性遗传分析     

魏跃  颜志明  王全智  薄凯亮  吴志明  陈劲枫 《中国农业大学学报》2013,18(6):143-147

为研究甜瓜属种间杂交质体DNA的遗传规律,利用PCR直接测序法对甜瓜属异缘四倍体新种(Cucumis×hytivus Chen and Kirkbride.)S₅自交后代及其杂交母本甜瓜属野生种(Cucumis hystrix Chakr.)和父本栽培黄瓜''北京截头’(Cucumis sativus cv. ''Beijingjietou’)叶绿体基因Matk-trnK和rbcL-accD区域的部分DNA序列进行比较分析。结果显示在长度为2 036 bp Matk-trnK区域中存在着18个多态性位点,其中有16个多态性位点的碱基子代与母本相同,只有2个位点与父本相同;在长度为945 bp的rbcL-accD区域中存在着19个多态性位点,其中有18个多态性位点的碱基子代与母本相同,只有1个多态性位点与父本相同。这表明甜瓜属hystrix×sativus种间杂交中质体DNA遗传主要表现为母系遗传。  相似文献   

河南省部分地区猪群大肠杆菌分离菌的耐药性比较分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

张钧杰  杨洁  张青  李金磊  吴宁鹏  吴志明 《中国兽药杂志》2020,54(8):20-25

为掌握河南省猪源大肠杆菌的耐药情况,于2013年至2018年对河南省郑州、开封、焦作、许昌四个地区部分规模化养猪场分离出的856株大肠杆菌,采用CLSI推荐的微量肉汤稀释法,调查其对8类13种代表性抗菌药物的耐药性。结果表明,856株大肠杆菌对氧氟沙星、黏菌素、庆大霉素、头孢噻呋和阿莫西林/棒酸等5种药物的耐药率在35.0%以下,分别为32.2%、31.1%、25.5%、15.5%和30.0%;对恩诺沙星、四环素、多西环素、大观霉素、氟苯尼考、磺胺异恶唑、复方新诺明和氨苄西林等8种药物的耐药率范围为45.0%～95.0%,其中对四环素、多西环素和磺胺异恶唑等3种药物的耐药率高达90.0%以上;多重耐药集中于耐5、6和7类抗生素,耐3类及以上药物的菌株占90.0%。本研究结果表明河南省部分养殖场猪源大肠杆菌耐药形势严峻,应加强对其监测和控制。  相似文献