高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒HuN4株致弱毒株特异性抗原表位的鉴定     

姜一峰  周艳君  田志军  安同庆  肖燕  韦天超  王瑜  彭金美  于海  李国新  闫丽萍  张善瑞  童光志 《中国兽医寄生虫病》2009,17(3):1-7

通过对高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒（Highly Pathogenic Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virtls,Hp-PRRSV）HuN4株亲本毒及其不同代次传代毒株Nsp2（Nonstnduralprotein2）蛋白氨基酸序列比较分析,发现不同代次的Nsp2蛋白存在4处氨基酸点突变,针对每个突变点分别人工合成编码短肽的核苷酸序列,经原核表达后进行Western blot分析。结果表明表达的融合蛋白F65-11（^749KGEPvsdqpak^759）能够特异性的与HuN4-F40、HuN4-F65和HuN4-F112感染猪的血清发生反应,而与HuN4 F5感染猪的阳性血清和CH-1a株阳性血清不发生反应,证实第4个氨基酸点突变（S754）处存在一个免疫优势抗原表位。将该表位肽段由N端和C端逐步缩短继续鉴定,当N端缩短到第5个氨基酸（^754SDQPAK^759）C端缩短到第3个氨基酸（^749KGEPVSDQ^757）时,表达的融合蛋白不能与PRRSV阳性血清反应,最终推测该抗原表位必需氨基酸为^753VSDQ^756。选取GenBank中提交的部分高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒的Nsp2氨基酸序列,对该表位氨基酸所在位置进行序列比较,分析结果显示位于Nsp2蛋白749→759位氨基酸序列高度保守,F65—11变异位点C^754→7^754为HuN4株系列传代毒株所特有。本研究结果证实抗原表位F65—11可以作为鉴别HuN4-F112弱毒疫苗所诱导产生的特异性抗体的候选抗原。  相似文献   

乙型脑炎病毒E蛋白抗原优势区域的鉴定     

闫丽萍  华荣虹  亓文宝  周艳君  李国新  于海  姜一峰  童光志 《中国兽医寄生虫病》2009,17(3):8-13

流行性乙型脑炎（Japanese Encephalitis,JE）是一种人与动物共患的虫媒病毒性疾病,严重危害着人畜的健康。E蛋白是乙型脑炎病毒（Japanese Encephalitis Virus,JEV）的主要结构蛋白,在病毒的吸附、融合、血凝、细胞趋向性、病毒毒力和诱导保护性免疫反应中起重要作用。为了确定该蛋白的抗原优势区域,本研究设计了3对引物,将E蛋白分成3个大段,分别是EF1（1～291aa）、EF2（292～402aa）和EF3（403-500aa）,又将EF1分成4个相互重叠的小片段,分别是EF1-1（1～88aa）、EF1—2（68～155aa）、EF1—3（129～222aa）和EF1—4（202～291aa）,将以上基因片段分别克隆到原核表达载体进行GST融合表达。SDS-PAGE电泳鉴定各融合蛋白均获得表达,各表达产物以包涵体的形式存在。通过Western blot分析表明融合蛋白GST-EF1、GST—EF2、GST—EF1—1、GST-EF1-2、GST—EF1—3和GST—EF1～4均能被阳性血清识别。通过ELISA鉴定,GST-EF2反应性最强,GST-EF1反应性比GST-EF2稍弱,而GST-EF3反应性最弱,GST-EF1-1、GST-EF1—2、GST-EF1—3和GST—EF1—4片段融合蛋白反应性与GST—EF1相似。由此本研究鉴定出1-402aa是E蛋白的抗原优势区域,在此区域内包括了12个Cys的保守区及域Ⅰ、域Ⅱ和域Ⅲ3个主要抗原域。E蛋白抗原优势区域的鉴定,为E蛋白抗原表位的鉴定以及针对于E蛋白诊断试剂的开发奠定了基础。  相似文献   

猪咬尾症的防治对策     

那立涛  于海有 《农村实用科技信息》2009,(3):31-31

猪咬尾症，又可称“反不适综合征”，是猪应激综合征（Poreinestresssyndrome，PSS）的一种临床表现形式，它是现代养猪生产条件下，猪受到许多种不良因素刺激而引起的一种非特异性应激反应。凡是能引起猪感觉不舒服的各种环境因素、营养因素和心理因素等均可造成猪群发生咬尾现象，但这不可轻易地就以此判断为是“饲料有问题”。近几年来，我国各地规模化猪场和北方农村一些养猪户中，  相似文献   

中药大黄抗新城疫病毒的试验研究   总被引：5，自引：1，他引：4  

于海  刘玉洁  常维山 《中国畜牧兽医》2005,32(2):50-51

中药大黄具有抗菌、抗病毒、清热、滋阴凉血等作用。大黄的有效成分经乙醇提取，然后在鸡胚上研究其抗新城疫病毒的作用。结果表明，中药大黄提取液对新城疫F48E8毒株具有显著的抑制作用。  相似文献   

网络液压CAD绘图环境的设计与实现     

刘文龙  于海  姜秀萍  曹学云  金艳 《农机化研究》2005,(1):240-242

论述了利用面向对象以及网络开发技术所构建的液压CAD绘图环境。在分析当前液压CAD的特点之后,运用而向对象(object-oriented)技术、对话框和控件技术、数据库图库存储提取技术、导入导出图形图像技术和socket技术开发液压CAD,具体实现辅助图元绘制、原理图生成、数据交换、网络通讯和后台数据库服务各个功能,使液压系统计算机辅助设计得到进一步的完善。  相似文献   

鸡传染性法氏囊病快速诊断试纸的研制     

于海 王应文陈蕾  常维山 《动物检疫》2004,21(4):27-28

本文简述用胶体金免疫层析技术，构建鸡传染性法氏囊病快速诊断试纸。试纸主要由测试端、显色区和手柄端3部分构成，能在很短的时间内完成对鸡传染性法氏囊病的诊断，且无需任何仪器设备，具有简便、快速、敏感、特异的特点。  相似文献   

农业机械拆卸应注意的问题     

于海 《吉林农业》2001,(9)

  相似文献   

消炎灵对兔体内青霉素G钠药动学及组织分布的影响     

张秀英  于海  王新  付士新  靳锐 《黑龙江畜牧兽医》1995,(8)

研究了消炎灵对兔体内青霉素G钠药动学及组织分布的影响,对照组兔给青霉素G钠,实验组同时给青霉素G钠和消炎灵,给药后不同时间采样,用微生物法测定血样浓度及组织中的浓度,二组兔的药时数据均符合有吸收因素二室开放模型。除了动力学参数a、Ka、A、B、t1/2 Ka、t1/2a、Cmax、Tmax外。其它参数在对照组和实验组兔之间具有显著差异。实验组的动力学参数β、K_(21)、Kel值显著减少,而参数K_(12)、t1/2β、AUC、TCP的值显著增加。对照组与实验组的青霉素G钠在血液与肝、肾、肺或肌肉间的分布没有显著差异。  相似文献   

1株重组猪繁殖与呼吸综合征病毒的基因组特征     

谭祥梅  吴瑕  陈鹏飞  赵雄伟  周书亭  虞凌雪  童武  高飞  姜一峰  于海  童光志  周艳君 《畜牧兽医学报》2020,51(12):3181-3186

猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）不断发生变异,其防控难度也逐渐增加。为了及时监测PRRSV在自然感染背景下的遗传进化特点,本研究从上海某发病猪场的临床样品中分离获得1株PRRSV毒株,命名为SHpd1/2018株,并对其生物学特性和基因组序列进行分析。结果表明,该毒株基因组全长为15 018 bp（不含poly A）,不能被针对HP-PRRSV强毒HuN4株的Nsp2的单抗所识别,但其增殖特性与强毒HuN4株相似。序列分析表明,SHpd1/2018株与HP-PRRSV强毒株的相似性最高（与HuN4相似性为94.3%）。重组分析结果显示,SHpd1/2018株是以HP-PRRSV-like为主要亲本毒株,NADC30-like为次要亲本毒株的重组病毒,两个重组断点nt 2002和nt 3205均位于Nsp2基因的高变区。研究证实SHpd1/2018株是1株发生变异重组的PRRSV分离株,该毒株是上海某猪场保育猪发病的主要原因。  相似文献   

高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒HuN4株及其致弱过程中的不同代次病毒的分子特征分析     

周艳君  田志军  郝晓芳  安同庆  于海  李国新  陈瑾  彭金美  童光志 《中国兽医寄生虫病》2011,19(1):1-10

为了追踪高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒（Highly pathogenic porcine reproductive and respiratory syn-drome virus,HP-PRRSV）毒力逐渐减弱的分子轨迹,我们以HP-PRRSV亲本毒HuN4株及其系列传代致弱毒株为研究对象,对HuN4株及其不同代次毒株其全基因序列进行了序列比较分析。结果显示由高致病性的亲本毒HuN4株到无致病性的F112代的疫苗毒,共有65个核苷酸发生突变,其中导致41个氨基酸发生突变,这些突变的氨基酸分散性的存在于不同基因区域。与已经报道的高致病性JXA1株及其致弱毒株JXA80株相比较,可以看到两个强毒株毒力致弱的演变轨迹并不完全相同,二者之间不仅氨基酸突变数量不一致,而且突变氨基酸的位置也不完全相同,但其共同特点是由强毒株到弱毒株的变化过程中,突变率较高的结构蛋白相一致,突变率较高的非结构蛋白基本一致。分析结果提示我们决定高HP-PRRSV毒力强弱的因素可能不是由单个氨基酸的突变来决定的,推测是由一个基因或多个基因或多种因素共同造成的,同时也使我们认识到PRRSV的非结构蛋白区在病毒毒力变化中可能发挥重要作用。  相似文献