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为了探求乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)基因组cDNA克隆在宿主菌中不稳定遗传的影响因子,本研究以猪源JEV HEN0701株基因组片段1~2913 bp为研究对象,分析基因组原核启动子和相关毒力基因在不稳定遗传中的作用。在5’端,分析片段中潜在的原核启动子序列,通过PCR扩增得到不同长度的cDNA片段;在3’端,通过内切酶酶切截断基因组prM蛋白或E蛋白编码区,获得3’末端不同的cDNA片段。将各片段克隆入pCR-BluntII-TOPO载体,转化大肠杆菌,于37℃条件下培养。结果显示,片段73~2913 bp、97~2913 bp、355~2913 bp及1~933 bp、1~1275 bp能够在转化菌中稳定遗传;含有其他片段39~2913 bp、54~2913 bp及1~1800 bp、1~1971 bp的重组细菌不能在37℃条件下生长;片段1~1600 bp虽然能够在转化菌中传代,但是出现不规律突变。以上结果表明:软件所预测各原核启动子片段中,基因组73~118 bp区域与cDNA克隆稳定性有关,且上游的54 bp至73 bp的序列对该区域启动子存在影响;在JEV基因组1275 bp至1600 bp之间可能存在毒性蛋白编码序列。 相似文献
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我国是一个水资源相对贫乏的国家,缺水已成为各地特别是山区发展农业的共性难题。在这方面,地处胶东半岛的山东省乳山市崖子镇进行了一些有益探索。近年来,该镇立足自身实际,扬长避短,积极发展节水灌溉工程,极大地改善了果业生产条件,促进了果业优质高效,收到了生态效益和经济效益的双丰收。 起因 俗话说,靠山吃山,靠海吃海。崖子镇地处乳山市北部山区,共有山峦面积2800公顷,近年来通过农业结构调整,果业这一优势产业得到了迅速膨胀,成为胶东地区小有名气的果业大镇。去年, 相似文献
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通过对文登奶山羊体尺体重的测量资料进行分析表明,成年公羊体重为80.45±6.63kg,体高82.55±3.72cm,体长99.27±5.47cm,胸围99.27±5.47cm;成年母羊体重56.56±4.87kg,体高72.90±2.04cm,体长87.38±4.08cm,胸围92.58±3.47cm。公羔初生重3.61±0.27kg,母羔3.23±0.24kg。八月龄母羊体重30.31±1.99kg,体高63.55±2.48cm,体长66.97±2.38cm,胸围69.08±2.16cm。八月龄公羊体重36.86±2.12kg,体高64.56±2.71cm,体长70.86±2.71cm,胸围73.75±2.88cm。观察发现:母羊八月龄可以参与配种,公羊在十月龄以上可使用。公、母羊三岁可达到成年指标,也是种用价值最高的时期。 相似文献
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新形势下食品工艺学理论课改革初探 总被引:1,自引:1,他引:0
围绕食品工艺学教学内容、教学方法和考核机制,介绍了理论教学过程中的一些改革措施。通过这些改革,激发了学生的学习兴趣,使食品工艺学的课堂教学质量得到了提高。 相似文献
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DNA疫苗的免疫效果与抗原基因的表达量及表达抗原的免疫原性有直接关系。为了提高猪流感病毒(Swine influenza virus,SIV)HA基因DNA疫苗的表达量,增强其免疫效果,本研究通过人工合成的方法将H1亚型猪流感病毒A/Swine/Guangdong/1/01(H1N1)的HA基因密码子优化为猪体内偏嗜性密码子optiHA,同野生型A/Swine/Guangdong/1/01(H1N1)的HA基因分别与真核表达载体PCAGGS连接构成重组质粒PCAGGS—optiHA和PCAGGS—HA,然后分别转染293T细胞,48h后采用间接免疫荧光的方法检测Ⅲ基因的瞬时表达蛋白情况。将质粒PCAGGS—HA、PCAGGS—optiHA以100μg/只的剂量,采用后腿肌肉多点注射的方式,免疫6-8周龄雌性BALB/c小鼠,同时设立空载体PCAGGS对照。共免疫3次,每次间隔2周,三免2周后对每组以10^3.87 EID50的A/Swine/Guangdong/1/01(H1N1)进行攻毒。采用ELISA、血凝抑制试验、细胞因子检测和肺组织病毒含量测定等实验评价这两种DNA疫苗的免疫效果。结果表明,HA基因密码子优化的DNA疫苗可显著提高体液免疫和细胞免疫的应答水平,攻毒后免疫组PCAGGS—optiHA的保护效力明显高于免疫组PCAGGS—HA。这一结果为进一步研究和设计有效的SIVDNA疫苗奠定了基础。 相似文献
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