犬瘟热病毒荧光抗体的制备及其鉴定     

郝淑美  岳妙妹  苏建青  杨松涛  夏咸柱  李牧 《中国兽医学报》2008,28(9)

采用常规方法建立杂交瘤细胞株并制备抗犬瘟热病毒(Canine distemper virus,CDV)(Onderstepoort株)核蛋白单克隆抗体(MAb);小鼠腹腔注射阳性克隆生产腹水;以G蛋白亲和层析法进行纯化;用透析法对单抗进行FlTC(异硫氰酸荧光素)标记;Sephadex G-25去除游离荧光素;测定F/P值及荧光抗体工作浓度;以吸收、阻断、抗原交叉试验对荧光抗体进行特异性鉴定.结果表明,获得6株能稳定分泌CDV单克隆抗体的杂交瘤细胞株,选取抗CDV核蛋白的CE3单抗成功地制备了质量较高的荧光抗体.  相似文献   

仔猪病毒性腹泻免疫的研究现状   总被引：1，自引：0，他引：1  

乔军  夏咸柱 《当代畜牧》1999,(3)

仔猪腹泻是养猪业最常见的疾病，轻者引起仔猪胃肠机能紊乱，生长缓慢，重者引起水和电解质的大量丢失，造成脱水、酸碱平衡紊乱，甚至发生大批死亡。能引起仔猪腹泻的病因有多种，如细菌（仔猪黄痢、仔猪白痢、仔猪红痢、仔猪副伤寒、猪密螺旋体病）、病毒（猪传染性胃肠...  相似文献   

犬冠状病毒超免疫血清的制备及应用   总被引：2，自引：0，他引：2  

夏咸柱  范泉水 《中国兽医科技》2000,30(10):26-27

采用犬冠状病毒（ＣＣＶ）弱毒株和强毒株多次免疫健康犬，采集超免疫血清，其ＣＣＶ血清中和（ＳＮ）抗体效价高达１：２１０。试验结果表明，该超免疫血清安全、特异，无毒副作用，每只幼犬注射１．５ｍＬ／ｋｇ体重的该血清即可使９０％以上的犬获得１０￣１５ｄ的被动免疫保护；对１１０只患ＣＣＶ性肠炎病犬的临床治疗结果表明，该超免疫血清治疗效果可靠，其治愈率达９４％。  相似文献   

抗狂犬病病毒ERA株单克隆抗体的制备、鉴定及初步应用   总被引：5，自引：0，他引：5  

薛琳  夏咸柱  高明华  高玉伟  侯小强 《中国兽医学报》2007,27(3):343-346

将狂犬病病毒ERA株纯化后免疫雌性BALB／c小鼠。取其脾细胞与SP2／0骨髓瘤细胞进行融合，经克隆和间接ELISA筛选，获得3株稳定分泌抗狂犬病病毒ERA株单克隆抗体的杂交瘤细胞株，分别命名为c7、c4和H3。经过鉴定：其腹水效价分别为1：1×10^3、1：5×10^4及1：1×10^4；且与犬瘟热病毒（CDV）、犬细小病毒（CPV）、犬腺病毒（CAV）不发生交叉反应；3株单抗均为IgG类型。采用G蛋白亲和层析柱对腹水进行纯化，将纯化后的单抗腹水用FITC（异硫氰酸荧光素）标记制备荧光抗体，建立了检测狂犬病病毒的荧光染色法。结果表明，该方法对狂犬病的实验室诊断具有快速和特异性高的特点。  相似文献   

亚洲Ⅰ型口蹄疫病毒VP1基因重组犬2型腺病毒的构建     

张秀芹夏咸柱  卫产森常惠芸 高玉伟 《中国兽医科技》2006,36(2):118-121

应用PCR方法扩增出亚洲Ⅰ型口蹄疫病毒的VP1基因，继而构建出真核表达载体pVAX—VP1。再将含有巨细胞启动子CMV的目的基因表达盒连接到穿梭载体pVAX△E3上，筛选出VPl表达盒方向与E3区转录方向一致的重组子，获得转移载体。再经酶切，连接等方法获得重组腺病毒质粒。利用脂质体介导将重组质粒转染DK细胞，转染3次后，细胞出现明显的腺病毒病变。经PCR扩增、测序检测及基因组酶切鉴定，证明该病毒即为重组犬2型腺病毒。命名为CAV2／FMDV。经验证，该重组毒可稳定遗传，其毒价为10^3.5TCID50／mL。  相似文献   

犬传染性肝炎病原,诊断与实验免疫研究   总被引：14，自引：0，他引：14  

夏咸柱  武银莲 《中国畜禽传染病》1990,(6):38-40,48

  相似文献   

犬冠状病毒YS1株细胞培养弱毒的实验免疫研究     

余春  夏咸柱  范泉水  何洪彬  邱薇  黄耕  王允海 《畜牧与兽医》2001,33(4):1-4

应用纯化后的犬冠状病毒 (CCV)YS1株细胞培养致弱的弱毒 (CCVYS1V60 ) ,经口鼻和肌肉接种CCV ,SN抗体小于 1∶2的易感犬作安全试验 ,结果未见任何CCV临床症状与病理解剖学改变 ;用不同剂量的该CCV弱毒分组免疫CCV易感犬 ,经SN抗体测定与用CCV强毒攻毒试验 ,结果SN抗体达 1∶60以上的犬 90 %以上可获得免疫保护 ;应用该CCV弱毒分别免疫母源抗体达 1∶4和 1∶8的 2组试验犬 ,第 1次免疫 1 4d后SN抗体均未见升高 ,追加 2～ 3次免疫后 ,SN抗体才逐渐上升至 1∶60以上的免疫保护水平 ;用CCV易感犬和猫肾传代细胞 (CRFK)分别将该CCV细胞培养弱毒连续传 5代和 2 0代 ,结果对犬仍然安全 ,免疫原性也未见下降 ;与犬瘟热病毒 (CDV)、犬传染性肝炎病毒 (ICHV)和犬细小病毒(CPV)弱毒作免疫互扰试验 ,结果与各弱毒的单独免疫结果未见差异 ;该毒的免疫期在 1年以上 ,- 2 0℃冻结保存的保存期为 9个月。  相似文献   

犬瘟热病毒高压灭活疫苗的制备与应用   总被引：3，自引：0，他引：3  

夏咸柱  池元开 《中国兽药杂志》2000,34(2):6-8

本试验用静水压高压灭活的方法对ＣＤＶ进行灭活,并加入蜂胶佐剂制备犬瘟热病毒高压灭活疫苗。将此灭活疫苗免疫接种ＣＤＶ易感犬,同时以用福尔马林灭活的犬瘟热病毒灭活疫功为对照,检测结果表明：犬瘟热病毒高压灭活疫苗安全、可靠,其诱导试验犬所产生中和抗体的能力明显高于该病毒的福尔马林灭活苗,临床应用证明该疫苗对犬的保护率达８９％。  相似文献   

虎源流感病毒RT-PCR检测方法的建立及其应用研究     

贺文琦  高玉伟  夏咸柱  杨松涛  王立刚  刘丹 《中国农学通报》2006,22(11):16-16

为临床上能快速诊断虎流感,通过对已分离获得的虎源H5N1流感病毒和GenBank中报道的A型H5N1亚型流感病毒的NP、HA、NA序列,设计合成各个基因的特异性PCR扩增引物和A型流感病毒通用反转录引物。通过优化反应体系及条件,建立一步法可同时扩增出3个基因的联合RT-PCR检测方法。将该方法用于临床病料检测,并与电镜负染、HA/HI及病毒分离等方法进行比较。结果,NP、HA、NA基因的扩增片段大小分别为464bp、581bp、173bp,其检测的敏感性约100个TCID50。该方法的检出率和病毒分离结果相符,高于电镜负染和HA/HI试验。结果显示,该方法可用于虎源流感病毒的临床或实验室检测。  相似文献   

夏咸柱院士为《畜牧与兽医》创刊75周年题词     

夏咸柱 《畜牧与兽医》2010,42(1)

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