应用乙脑荧光抗体直接染色法快速鉴定乙型脑炎病毒的初步结果     

许基龙  胡敬尧  武德丽  孙恩贵  夏咸柱 《中国兽医学报》1981,(4)

1980年9月,我们于长春市、怀德县、双辽县的脑炎病马体内,先后获得9株病毒、均鉴定为乙型脑炎病毒。过去,鉴定病毒的程序通常是:动物感染范围试验、交互补体结合反应、交互中和试验或交互保护力试验等,最终判定。此法颇麻烦,最快需三周才得结果,不能满足临床诊断上的要求。本次病毒鉴定,我们应用冷冻切片荧光抗体染色法和一般方法对比进行,9株病毒,用荧光抗体法在3小时内即得出肯定结果,一般方法则需45天完成,两法结果完全一致。  相似文献   

联合PCR诊断大熊猫犬瘟热和犬冠状病毒的混合感染   总被引：6，自引：1，他引：6  

高凤山  胡桂学  夏咸柱  柏亚铎  余春  乔军 《吉林农业大学学报》2003,25(1):91-93

采用一步法提取大熊猫肝脏细胞总RNA，经反转录，选择CDV和CCV联合PCR引物，一次性扩增出CDV和CCV目的片段，进一步证明了大熊猫同时感染了CDV和CCV。  相似文献   

虎源流感病毒RT-PCR检测方法的建立及其应用研究     

贺文琦  高玉伟  夏咸柱  杨松涛  王立刚  刘丹 《勤云标准版测试》2006,(11)

为临床上能快速诊断虎流感,通过对已分离获得的虎源H5N1流感病毒和GenBank中报道的A型H5N1亚型流感病毒的NP、HA、NA序列,设计合成各个基因的特异性PCR扩增引物和A型流感病毒通用反转录引物。通过优化反应体系及条件,建立一步法可同时扩增出3个基因的联合RT-PCR检测方法。将该方法用于临床病料检测,并与电镜负染、HA/HI及病毒分离等方法进行比较。结果,NP、HA、NA基因的扩增片段大小分别为464bp、581bp、173bp,其检测的敏感性约100个TCID50。该方法的检出率和病毒分离结果相符,高于电镜负染和HA/HI试验。结果显示,该方法可用于虎源流感病毒的临床或实验室检测。  相似文献   

虎源猫泛白细胞减少症病毒VP1、VP2和NS1基因的克隆与序列分析   总被引：1，自引：1，他引：0  

于亚丽  华育平  曾祥伟  田丽红  夏咸柱  刘丹 《东北林业大学学报》2009,37(1)

根据Genbank上发表的猫泛白细胞减少症基因序列数据,设计了3对引物,并采用PCR方法对从东北虎粪便中分离出的FPV-HLJ的结构蛋白VP1、VP2和非结构蛋白NS1基因进行了扩增,将各片段克隆至pMD18-T载体,经PCR鉴定后进行了序列测定和分析.结果显示:FPV-HLJ与GenBank上公布的FPV、CPV和MEV毒株相比,核苷酸序列同源率VP1为98.8%～99.8%,VP2 为98.1%～99.4%,NS1为98.6%～99.7%.VP1氨基酸同源率为97.6%～99.2%,VP2、NS1氨基酸同源率与其核苷酸同源率相同.并且VP1、VP2和NS1上分别有 4、3和9处氨基酸发生变异.  相似文献   

我国军警用动物人兽共患病现状与防控策略     

杨松涛  王化磊  叶俊华  宋珍华  丁壮  余春  才学鹏  马继红  池丽娟  夏咸柱 《中国动物检疫》2017,34(2):46-50

通过收集信息、查阅资料和充分调研,结合我国军警用动物疫病防控实际,对严重威胁我国军警犬、军马、军鸽的人兽共患病现状进行了分析,借鉴国外防控经验,提出符合我国实际的军警用动物人兽共患病防控建议,为保障我国军警用动物的健康发展提供科学依据。  相似文献   

我国犬瘟热病毒的生态学调查研究   总被引：25，自引：0，他引：25  

李金中  夏咸柱  胡桂学  范志强  邹啸环  武银莲  黄耕  袁书智  乔贵林 《畜牧兽医学报》1999,30(4):375-379

本研究应用电子显微镜技术检查了１７个毛皮动物和野生动物的６７６份材料,从犬,貂,貉,狐熊,小熊猫,大熊猫,狼,狮,虎,猞狮、金猫等１２种动物病料中,检出含有ＣＤＶ材料４８７份。应用间接ＥＬＩＳＡ、免疫荧光和中和试验等技术检测了８种动物１５８份血清,其中从犬,狐,小熊猫、虎、金猫,狼等６种动物的１０６份血清中检出了抗ＣＤＶ抗体。应用ＲＴ－ＰＣＲ和基因探针检查了４种动物的３７份材料,其中有２９份阳性。  相似文献   

应用间接ELISA检测犬冠状病毒抗体     

范志强  夏咸柱  胡桂学  黄耕  邹啸环  武银莲  毕森林  张治国 《中国兽医学报》1999,19(2):129-132

为了建立一种快速、敏感、特异的检测犬冠状病毒（ＣＣＶ）的方法,利用感染ＣＣＶ的犬肾传代细胞包被酶联反应板,以辣根过氧化物酶标记的金黄色葡萄球菌Ａ蛋白（ＨＲＰ－ＳＰＡ）作为第２抗体,建立了检测ＣＣＶ抗体的间接ＥＬＩＳＡ方法。抗原的包被量为每孔３×１０４个染毒细胞,酶标抗体的工作浓度为１∶４０。试验发现,包被的病毒抗原经甲醇固定３０ｍｉｎ后可以提高试验的敏感性,减少病毒抗原的使用量。与中和试验比较证实,２种抗体检测方法的测定结果呈正相关  相似文献   

流感病毒不同宿主的感染情况     

贺文琦  夏咸柱  陆慧君  高丰  高玉伟  成军 《吉林畜牧兽医》2004,(7):12-14

流感病毒感染是由病毒基因和宿主基因产物相互作用而的复杂事件。流感病毒部分基因的突变率高及基因分节段的特点,决定了基因可以通过变异或重配形成不同的病毒株,从而感染不同的宿主。  相似文献   

中国首株H13N6亚型禽流感病毒遗传进化分析及致病性和传播性评估   总被引：1，自引：0，他引：1  

高晓龙  范胜涛  李胜楠  国娇  王爱荣  孙伟洋  李雪  虞一聪  王铁成  李元果  桑晓宇  于志君  张坤  高玉伟  夏咸柱 《中国预防兽医学报》2015,(3):172-176

为了解我国首次分离的H13N6亚型禽流感病毒(AIV)生物学特性,本研究对该分离株进行全基因序列测定和分析,并对其进行BALB/c小鼠和SPF鸡致病性试验以及豚鼠传播试验。序列分析表明HA碱性裂解位点序列为PAISNR↓G,为低致病性AIV。遗传进化分析表明NA基因属于北美谱系,其余7个基因均属于欧亚谱系;其中NA、NP、M、NS基因来源于鸥类,而HA、PB2、PB1、PA基因来源于野鸭类。动物致病性和传播试验结果显示,该病毒株在鸡和小鼠体内不能进行有效复制,在豚鼠和鸡体内也不能进行排毒和有效传播。基因序列分析结合致病性和传播性试验表明H13N6亚型AIV分离株可能是通过候鸟迁徙而传入我国的新型重组AIV,但该病毒株仍只能感染野生水禽尚未获得跨越种间屏障感染陆生家禽和人的能力,尚不具备哺乳动物间和家禽间的传播能力。  相似文献   

犬传染性肝炎病原、诊断与实验免疫研究     

夏咸柱  武银莲  钟志宏  林庆年  袁书智 《中国预防兽医学报》1990,(6)

首次应用原代和传代犬肾细胞从临床疑似犬传染性肝炎(ICH)和狐狸脑炎(FE)的犬、狐病料中分离获得4株腺病毒。经形态学、理化学、生物学等系统鉴定,证明为犬1型腺病毒(CAV-1),即犬传染性肝炎病毒ICHV)和狐狸脑炎病毒(FEV).以往对 ICH 犬肝测不出HA 效价的原因,是因为其中含有大量不耐热的非特异 HI 物和可与完整病毒竞争红细胞 HA 受体的单价游离血凝素.通过加热和加犬2型腺病毒(CAV-2)免疫血清的方法,可检出其中的 CAV-1血凝素而确定 ICH 诊断.用 ICH 犬肝中的游离血凝素免疫 ICH 易感犬,可使其产生抗 CAV-1HI抗体,获得 ICH 免疫.研究了用于检测 ICH 犬血清、腹水和肝脏样品的处理方法,首先建立了 ICH 微量补反诊断法;在对 ICH 犬肝 HA 特性研究的基础上,应用新鲜或醛化人0型红细胞和犬抗 CAV-1与 CAV-2血清,又研究成既可用于临床诊断又可用于抗体调查的微量血凝诊断法.进行了 CAV-1和 CAV-2弱毒苗的复制和实验免疫试验,证明 CAV-2弱毒复制苗对各类犬、狐均安全有效.而且对 CAV-1母源抗体有较强的抵抗力.通过回忆反应和特异淋转试验,汪明 CAV-2弱毒对 ICH 的免疫主要在于细胞免疫.  相似文献