应用Mc—Ab.BA—ELISA快速检测动物源空肠弯杆菌的研究     

沈广  韩文瑜 《中国畜禽传染病》1991,(4):38-41

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BA—ELISA检测空肠弯曲菌的研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

韩文瑜  汪询 《中国兽医科技》1990,(8):5-7

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肝X受体激动剂抑制NLRP3炎性体活化     

胡啸竹  李宁  杜崇涛  崔治华  韩文瑜  杨勇军  陈巍 《中国兽医学报》2014,(2):259-263

为探讨肝X受体激动剂对NLRP3配体ATP诱导小鼠巨噬细胞炎性复合体活化的影响,应用荧光定量PCR方法测定肝X受体激动剂对LPS诱导的Pro-IL-1β、NLRP3等基因表达的影响,并用免疫蛋白印迹的方法检测Caspase-1的活化片段。结果证明,肝X受体(LXRs)激动剂能抑制NLRP3炎性体的活化。LXRs激动剂T0901317和GW3965显著抑制LPS联合ATP诱导的Caspase-1剪切成熟和IL-1β分泌,并且LXRs激动剂对NLRP3炎性体的抑制作用,部分源于其抑制NLRP3和IL-1β的基因转录。  相似文献   

结核分枝杆菌RD1区T细胞表位分布情况预测及分析     

姚翠梅  孙长江  赵娅娅  刘珊珊  刘宏  韩文瑜 《农业科学与技术》2011,(9):1401-1404

[目的]对结核分枝杆菌RD1区T细胞表位分布情况进行预测和分析。[方法]利用NetMHC server生物信息学软件,以和HLA-Ⅱ和HLA-Ⅰ类分子结合能力为指标,分别对结核分枝杆菌RD1区9个编码蛋白进行T细胞抗原表位预测。[结果]通过预测,共获得和HLA-Ⅱ类分子结合的抗原表位1580个和HLA-Ⅰ类分子结合的抗原表位336个。[结论]预测获得的T细胞抗原表位将对结核病特异性检测及新的结核疫苗研发起到借鉴作用。  相似文献   

金黄色葡萄球菌噬菌体裂解酶LysK的表达及其多克隆抗体的制备   总被引：1，自引：0，他引：1  

李跃  宫鹏娟  夏斐斐  宋军  顾敬敏  张蕾  杨梅  孙长江  冯新  韩文瑜 《兽医大学学报》2014,(1):45-49

将噬菌体与细菌孵育25min提取噬菌体感染细菌的总RNA,通过逆转录的方法获得cDNA,以此为模板进行PCR扩增得到目的片段,以pET-15b为载体构建重组质粒pET-15b—lysK并转入大肠杆菌BL21中,IPTG诱导表达金黄色葡萄球菌噬菌体K裂解酶基因lysK,表达产物蛋白经镍柱纯化后,测定LysK的裂解活性、裂解谱,并免疫家兔制备多克隆抗体。结果表明,成功诱导表达可溶性LysK并获得重组蛋白,酶谱试验证明LysK对金黄色葡萄球菌具有裂解活性,LysK比噬菌体K裂解谱广。制备的兔多克隆抗体能够与LysK发生特异性反应且具有较高效价,为后续进行LysK体内治疗研究打下了基础。  相似文献   

2型猪链球菌烯醇化酶的原核表达及其对体外血脑屏障模型通透性影响的检测     

李娜  雷连成  朱僧  孙莹莹  潘风光  孙长江  韩文瑜 《兽医大学学报》2014,(1):78-82

通过原核表达的方式获得能在多种病原茵表面表达的烯醇化酶（Enolase,Eno）,探索Eno在脑膜炎致病过程中的作用。根据GenBank上公布的基因序列设计Eno特异性引物,通过PCR技术扩增2型猪链球菌（Streptococcussuis serotype2,SS2）的Eno基因序列,克隆到pMD18-T载体,进-步亚克隆到原核表达载体pET28a（＋）,构建重组表达质粒pET28a—Eno,转化入大肠杆菌BL21CodonPlus（DE3）感受态中诱导表达,经镍离子螯合柱纯化后,检测其对体外血脑屏障模型通透性的影响。结果显示,经1mmol／LIPTG诱导5h为最佳诱导条件,目的蛋白约54000,与预期蛋白大小相符合;纯化的蛋白Westernblotting分析表明,其具有较好的免疫原性;Eno可致体外血脑屏障模型通透性增加。结果表明,Eno作为SS2潜在的毒力因子在SS2引起脑膜炎的致病过程中起到重要的作用。  相似文献   

貂源肺炎克雷伯菌的分离与鉴定     

胡本钢  杜崇涛  雷连成  韩文瑜 《中国预防兽医学报》2011,33(8)

本研究从疑似感染肺炎克雷伯菌(Kpn)的病死水貂病料中分离得到5株革兰氏阴性杆菌,通过对其进行细菌形态学、培养特征、生化特性和分子生物学鉴定,确认分离得到的菌株为Kpn。16S rRNA基因序列分析结果显示:该分离菌株与已知的Kpn相应序列的同源性为100%;药敏试验显示分离株对头孢曲松和舒巴坦高度敏感。动物致病性试验显示该分离株对小鼠具有较强的致病性。  相似文献   

接种仔猪副伤寒—大肠杆菌腹泻双价基因工程菌苗妊娠母猪的抗体应答     

韩文瑜  侯万文 《中国畜禽传染病》1993,(3):40-41

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接种仔猪副伤寒-大肠杆菌腹泻双价基因工程菌苗妊娠母猪的抗体应答     

韩文瑜  黎诚耀  侯万文  宋新安 《中国预防兽医学报》1993,(3)

应用仔猪副伤寒-大肠杆菌腹泻双价基因工程活苗口服和肌注接种妊娠母猪,用间接 BA-ELISA 监测其血清及乳清中对猪霍乱沙门氏菌、大肠杆菌 K88ac、LT-B 三种抗原的 IgG、IgA、IgM 型抗体应答.结果,在其血清及乳清中均可形成对这三种抗原较高水平的抗体反应。这提示,接种本菌苗妊娠母猪的仔猪通过吮乳可获得相应的被动保护抗体.  相似文献   

人肿瘤坏死因子α逆转录病毒表达载体的构建     

黎诚耀  韩文瑜 《中国兽医学报》1994,14(2):135-138

应用ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔｌｌｋｓ质粒构建了含人肿瘤坏死因子－α　ｃＤＮＡ的过渡性载体ｐＢＴ１和ｐＢＴ２。用限制性内切酶ＢａｍＨＩ与ＥｃｏＲＶ消化ｐＢＴ１ＤＮＡ，分离出了ＴＮＦ－α　ｃＤＮＡ基因片段，并在其平末端加入了ＢａｍＨＩ接头。进而将带有ＢａｍＨＩ粘性末端的ＴＮＦ－αｃＤＮＡ克隆到了逆转录病毒载体ｐＺＩＰＮｅｏＳＶ（Ｘ）１５′－端长末端重复序列（ＬＴＲ）下游的ＢａｍＨＩ切点上，构建了重组质粒ｐＺＩＰＴＮＦ。该重组质粒经琼脂糖凝胶电泳，限制性内切酶消化和核酸杂交鉴定分析，证明ｐＺＩＰＮｅｏＳＶ（Ｘ）１中插入了ＴＮＦ－α　ｃＤＮＡ，并且方向正确。本研究为应用重组逆转录病毒介导ＴＮＦ－α基因转移与治疗奠定了基础。  相似文献