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本研究旨在建立水貂生长激素(mink growth hormone,mGH)的原核高效表达体系,探索mGH蛋白规模化生产方法,利用获得的目的蛋白制备特异抗血清。将已构建的原核表达载体pET28b-mGH转化大肠杆菌Rosetta(DE3)TMpLysS感受态细胞,经IPTG诱导表达,超声破碎菌体后离心获得包涵体蛋白,利用8mol/L尿素对其进行溶解和复性,经Ni-NTA树脂亲和层析纯化获得重组蛋白。通过Western blotting检测及MALDI-TOFMS质谱分析对获得的蛋白进行鉴定。用SDS-PAGE电泳法检测蛋白纯度,用BCA法测定其浓度。复性mGH蛋白与完全弗氏佐剂或不完全弗氏佐剂乳化制备免疫抗原,采用皮下多点注射法免疫3只新西兰大白兔,首次免疫剂量为600μg/只,二免剂量为600μg/只,三免剂量为400μg/只。三免10d后分离制备血清,Western blotting法检测其特异性,间接ELISA法检测其效价。结果表明,原核表达的包涵体经Ni-NTA柱纯化后所得蛋白鉴定为mGH融合蛋白;SDS-PAGE电泳鉴定复性mGH蛋白条带单一,纯度达90%以上,BCA法计算蛋白浓度为669μg/mL,均达到了免疫动物的要求;制备的抗血清经Western blotting检测具有良好的结合特异性,间接ELISA法测定其抗体效价达1∶256 000以上。上述结果表明,原核表达载体pET28b-mGH可在大肠杆菌Rosetta(DE3)TMpLysS细胞中高效表达mGH融合蛋白,表达蛋白经变性、复性和纯化后免疫新西兰大白兔,可制备高效价特异性抗血清。 相似文献
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量化森林碳储量对森林经营者的正确决策至关重要。本文以湖南省桃江县为研究区,根据2013年森林资源一类调查数据和Landsat 8遥感影像,建立多元逐步回归、偏最小二乘回归和径向基函数神经网络模型,开展碳储量的估测方法比较。结果表明:三种方法中,径向基函数神经网络模型估测森林碳储量效果最好,决定系数达到0.645,相对均方根误差为15.582 t·hm~(-2);其次为偏最小二乘回归模型,决定系数和相对均方根误差分别为0.511和17.135 t·hm~(-2);多元逐步回归模型精度最低,决定系数和相对均方根误差分别为0.431和18.105 t·hm~(-2)。径向基函数神经网络模型反演的研究区森林碳储量分布图表明,海拔高的地方碳储量较大,城区碳储量较小,与实际植被分布情况一致。 相似文献
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本试验旨在研究饲料酸化剂和防霉剂对浓缩料中油脂的保护作用,为抗氧化剂在浓缩料中的应用提供理论依据。试验以25%的猪浓缩料为研究对象,随机分为6个处理组,分别为对照组K组(只添加抗氧化剂)、KM组(添加抗氧化剂和防霉剂)、KS1组(添加抗氧化剂和酸化剂1号)、KS2组(添加抗氧化剂和酸化剂2号)、KMS1组(添加抗氧化剂、防霉剂和酸化剂1号)、KMS2组(添加抗氧化剂、防霉剂和酸化剂2号),每个处理3个重复,试验期90 d。结果表明:在2 ~ 12周时,KMS2组过氧化值(POV)显著低于K组、KM组、KS1组和KS2组(P < 0.01),且在数值上低于KMS1组,在第12周时,KMS2组POV值较其他各组分别显著降低18.89%、19.83%、13.08%、7.80%、9.93%(P < 0.01)|在整个试验期内KS1组、KS2组、KMS1组、KMS2组油脂酸价(AV)显著低于K组和KM组(P < 0.01),在第12周时,KMS2组较K组和KM组分别显著降低2.75%和5.24%(P < 0.01)。综上,将抗氧化剂、酸化剂和防霉剂进行配合使用对饲料油脂的保护效果最好|且抗氧化剂、防霉剂与有机酸化剂的组合对油脂含量为8%的猪浓缩料的保护效果最佳。
[关键词] 抗氧化剂|防霉剂|酸化剂|浓缩料|酸价|过氧化值 相似文献
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为探究玉米苗期耐盐性状的遗传调控机理,以耐盐的热带自交系CML298与盐敏感的温带自交系Zong31构建得到200份F2:3家系的初定位群体为试验材料,结合Illumina Maize 6K芯片获取相应的基因型数据,通过调查苗期盐胁迫处理前后的株高比率(SHR)、株高差值(SHD)、鲜重比率(SFWR)、鲜重差值(SFWD)4个耐盐指标,对玉米苗期的耐盐性进行评价。结果表明,共检测到2个与SHR相关的QTL位点q SHR4、q SHR8,分别解释7.08%和9.40%的表型变异;2个与SHD相关的QTL位点q SHD4、q SHD8,分别解释7.87%、9.21%的表型变异;3个与SFWR相关的QTL位点q SFWR3-1、q SFWR3-2和q SFWR9,分别解释6.15%、11.14%和6.27%的表型变异;2个与SFWD相关的QTL位点q SFWD4与q SFWD7,分别解释6.89%和6.04%的表型变异。其中,在第4号染色体129 c M位置与第8号染色体8c M位置都定位到了与SHR、SHD相关的QTL位点。本研究结果为玉米苗期耐盐相关基因的挖掘奠定了理论基础。 相似文献
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从古至今江西的茶文化发展都是处在比较拔尖的地位,一谈到茶叶必然会想到的地方就是江西,而在茶文化当中茶歌又是极为重要的一部分。茶歌是一种特别贴近采茶者日常生活的歌曲,它从最初的平凡小调变成一门艺术,历经朝代的更迭而经久不衰,成为中国艺术史上一颗熠熠生辉的明珠,是我国极为宝贵的非物质文化遗产。 相似文献