禽安卡拉病毒Hexon蛋白多克隆抗体的制备     

刘兰  卢渊录  梁雄燕  蔡宇威  顾玉芳 《畜牧与兽医》2018,(2):83-85

为进一步建立Ⅰ群血清4型禽腺病毒(FADV-4)的特异性检测方法,根据本实验室分离鉴定的安卡拉病毒的基因组序列,设计针对六邻体蛋白(Hexon)基因的特异性引物,经PCR扩增,连接至p ET-28a中,构建原核表达载体p ET-28a-Hexon。将其转化感受态BL21中,经异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导,SDS-PAGE分析,获得重组蛋白大小为49 ku。Western blot分析纯化后重组蛋白能与FAd V-4阳性血清发生特异性反应。将纯化后的重组蛋白免BALB/c小鼠,制备了六邻体蛋白多克隆抗体,采用间接ELISA方法测定效价表明制备的血清效价大于1∶64 000。  相似文献   

牛传染性胸膜肺炎     

赵振华 《内蒙古畜牧业》1989,(10):15-15

  相似文献   

几种“两菇一菜”高效种植模式     

赵振华 《油气储运》2005,(12):46-46

为提高土地利用率和农业生产效益．近年来．我们利用日光温室、塑料大棚、半地下式简易棚等没施进行“两菇一莱”种植模式试验、示范、开发，组装了以下几种模式，对推动我市食用菌产业发展、增加农民收入发挥了积极作用。  相似文献   

鸡贫血病病毒VP2基因在大肠杆菌中的表达及其特性   总被引：2，自引：0，他引：2  

刘岳龙  秦爱建  金文杰  叶建强  吉荣  崔治中  段玉友 《中国兽医学报》2003,23(1):30-32

将鸡贫血病病毒（chicken anaemia virus,CAV)VP2基因克隆入表达性载体PGEX-5X-3，在大肠杆菌以谷胱甘肽转移酶（GST）融合蛋白的形式获得了表达。以此表达产物免疫小鼠，制备抗CAV VP2的多克隆抗体。通过对CAV感染的MSB1细胞作间接免疫荧光试验（IFA）检测，结果为阳性，这表明表达产物保留了CAV相关的抗原特性，本研究为进一步探索CAV VP2的生物学特性奠定了基础。  相似文献   

禽白血病病毒J亚群(ALV-J)的攻毒试验   总被引：2，自引：1，他引：1  

成子强  赵振华  张利  高娃 《中国兽医学报》2004,24(3):219-222

将禽白血病病毒 J亚群 (AL V- J)内蒙株 NM876 1和 NM9996人工接种于 1日龄爱维茵肉种鸡 ,通过眼观、病理组织学检查观察了攻毒鸡的病理学特征 ;通过 PCR和 EL ISA技术检测了病毒感染率、抗体变化规律以及病毒和抗体的相关性。结果显示 ,攻毒鸡从第 3周开始即可检出病毒 ,NM876 1株和 NM9996株病毒感染率分别为 71.4 %和6 4 .3% ;从第 5周开始 ,出现较明显的病理学变化 ,病变特征以骨髓、肝脏、心脏、脾、卵巢等组织内髓细胞增生为主 ,而法氏囊、脑、坐骨神经无变化 ;攻毒鸡抗体消长变化有一定的规律 ,一般在 7～ 8周龄和 18～ 2 0周龄时分别出现 1次高峰 ,而在 4～ 6周龄、10周龄和 2 3周龄分别出现 1次低谷 ,提示鸡场进行 EL ISA检测时要避开这一时期 ;攻毒鸡产生耐受性病毒血症 ,即病毒阳性而抗体阴性 (V A- )的比例较高 (7/14 ,9/14 )。通过以上的研究证明 ,AL V- J内蒙株疾病模型复制成功 ,NM876 1、NM9996可作为原型株进行相关研究  相似文献   

牛传染性胸膜肺炎     

赵振华 《当代畜禽养殖业》1989,(10):15-15

  相似文献   

J亚群禽白血病病毒膜表面糖蛋白基因gp85的克隆与表达   总被引：3，自引：0，他引：3  

杨玉莹秦爱建  赵振华叶建强顾玉芳  王金铃 《中国兽医科技》2003,33(7):3-6

以pGEM-IMC2.2重组质粒为模板扩增禽白血病病毒内蒙株IMC10200gp85基因，构建了转移栽体pFast Bacl-IM gp85，并利用Bac-to-Bac表达系统获得了重组杆状病毒rBac-IMC gp85。转染Sf9细胞后的表达研究表明，重组杆状病毒可高效表达IMC10200的gp85基因，表达产物具有病毒的抗原特异性，与ALV-J单抗JE9有强的间接免疫荧光反应。蛋白质印迹法分析表明，表达产物的分子质量约54ku。  相似文献   

IMC10200株ALV-J实验诱发禽骨髓性白血病的研究   总被引：2，自引：0，他引：2  

顾玉芳  杨玉莹  赵振华  王金铃 《中国预防兽医学报》2004,26(4):278-281

对分离自肉种鸡群亚临床感染的J亚群禽白血病病毒IMC1o200株进行了实验感染诱发禽骨髓性白血病的病理学研究.IMC10200株J亚群禽白血病病毒尿囊腔接种11日龄肉鸡胚和SPF蛋鸡胚,孵出后跟踪观察.9周龄时随机抽检感染鸡,感染肉鸡特异引物PCR检测全部为阳性;组织病理学观察感染鸡无明显病变.至21周龄时感染肉鸡出现第一例典型骨髓性白血病病例;感染SPF蛋鸡未见明显J亚群禽白血病相关病变.  相似文献   

鸡毒霉形体TM-1基因原核表达载体的构建及表达     

郝永清王秀青  周艳君童光志高金亮  赵振华乌尼 《中国兽医科技》2004,34(4):18-20

对从含有鸡毒霉形体H3株TM-1基因的大肠埃希氏菌DH5α中提取的质粒，进行EcoR Ⅰ和Sα／Ⅰ双酶切，获得了大约为786bp的目的片段。将此片段与经EcoRⅠ和Sαl Ⅰ双酶切的线性原核表达载体pET-30a-1连接。转化宿主菌BL21(DE3)，筛选阳性克隆。提取质粒，经酶切、PCR扩增和测序分析确证其插入正确，从而构建成了重组表达载体。阳性克隆用IPTG诱导表达，表达产物经SDS-PAGE电泳分析，证明其分子质量约为29ku；Western-blotting分析表明，该蛋白可被鸡毒霉形体阳性血清识别，具有生物学活性。  相似文献   

新型环形病毒AGV7 VP3基因克隆、表达及其多抗制备     

申秋平  田晓彦  邹海涛  邵红霞  秦爱建  叶建强 《中国家禽》2018,(1)

研究对新型环形病毒AGV7 VP3基因进行了克隆、表达以及多克隆抗体的制备。利用原核表达系统获得了可溶性重组GST-VP3蛋白,纯化后免疫小鼠制备了抗GST-VP3多克隆抗体。同时构建pcDNA3.1+EGFP-VP3真核表达载体。通过共聚焦显微镜观察发现,AGV7 VP3与EGFP融合蛋白在HCT116肿瘤细胞中集中表达于细胞核,且呈散在点状分布,类似凋亡小体。研究为进一步研制AGV7血清学诊断方法提供了材料,同时为探究AGV7VP3的生物学功能打下了基础。  相似文献