寨卡病毒SYBR GreenⅠreal-time PCR方法的建立及应用     

于宁  刘宇梦  李成辉  李卓昕  汪伟  孙文超  鲁会军  金宁一 《中国动物传染病学报》2021,(1)

为建立一种针对寨卡病毒的快速诊断方法,本研究根据寨卡病毒的3’端保守基因序列,设计合成1对引物,建立了检测寨卡病毒的荧光定量PCR方法。结果显示:所建立的检测方法的Ct值与标准品在1.41×10^1~1.41×10^10^ copies/μL具有良好的线性关系,相关性为1,斜率为-3.502;灵敏性结果显示,该方法的检测限度为1.41×10^1 copies/μL,是普通PCR的10000倍;特异性结果显示,对CHIKV、DENV和JEV无特异性扩增,特异性强;重复性试验结果显示,组内和组间变异系数均小于1%,重复性好。本研究建立的SYBR Green I real-time PCR检测方法,可用于寨卡病毒感染的快速诊断。  相似文献   

凤尾桑及其芽变品系间遗传变异的ISSR分析     

赵卫国  汪伟  潘一乐 《蚕桑通报》2006,37(3):27-29

利用ISSR引物,从分子水平分析了凤尾桑及其芽变株系的遗传变异。从8个ISSR引物扩增结果来看,3个引物的扩增产物在株系间无差异,从变异株系扩增条带来看,凤尾芽变变异最大。本结果从分子水平证明了芽变株系的遗传结构差异。  相似文献   

血清钙、磷和葡萄糖水平对奶牛胎衣不下的影响   总被引：9，自引：2，他引：9  

刘德义  江汪洋  方必春  黄旭  苏辉  汪伟 《中国奶牛》2005,(1):42-44

奶牛产后胎衣在12h内不能自然完全脱落者称为胎衣不下(Retention Fetal Membrane，简称RFM)，它是奶牛的常见病之一。对于此病国内外均有大量文献报道。我国有关资料显示，在一般的奶牛场中，此病的发病率为10％～25％，个别地区高达40％以上。  相似文献   

猪细小病毒6型SYBR Green I real-time PCR检测方法的建立     

孙文超  刘立明  赵翠青  汪伟  赵冠宇  曹亮  张赫  庄忻雨  韩继成  鲁会军  金宁一 《中国兽医学报》2018,(3)

采用PCR方法扩增PPV6保守区域基因252bp,将其克隆到pClon007载体,构建重组质粒作为标准阳性质粒。以质粒模板建立PPV6的SYBR GreenⅠreal-time PCR检测方法,并进行敏感性、特异性和重复性等验证。结果表明,重组质粒特异性好;建立的real-time PCR方法Ct值与标准品模板在8.80×109~8.80×101 copies/μL范围内呈良好的线性关系,相关系数为0.993,斜率为-4.320。该方法检测灵敏度可达8.80×101 copies/μL。该方法对JEV、PRV、PRRSV、PCV2、FMDV等猪常见病原检测均无特异性扩增;对临床样品的检测结果表明,所建立的荧光定量PCR阳性检测率为40.63%。本试验成功建立了PPV6SYBR Green I real-time PCR检测方法,可实现对PPV6快速灵敏的诊断。  相似文献   

“大粮仓”遭遇黑土地退化困局     

管建涛  汪伟  郭翔 《农村．农业．农民》2015,(1):38-39

"东北黑土地正面临日趋板结、可耕性变差的问题。东北黑土地原来有一米厚土层,现在只有40厘米~60厘米,松辽平原上一铁锹下去见黄土的‘破皮黄’地已经有很多。"中国工程院院士、沈阳农业大学教授陈温福说,"要知道形成一米厚的黑土层需要3亿年,而现在的退化速度是一年一厘米,如果再不注意提高耕地质量,农业可持续发展将受到严重威胁。"东北地区是我国最大的商品粮基地,粮食市场的"大粮仓"和  相似文献   

广西地区犬细小病毒检测及VP2基因序列分析     

吕荞  陈伟月  刘宇梦  汪伟  于子萍  兰添  闭璟珊  郑敏  孙文超 《黑龙江畜牧兽医》2023,(11):71-75

为了调查广西地区犬细小病毒(CPV)的优势毒株及其遗传变异情况,试验利用PCR方法对采自广西地区的423份犬血清样本进行CPV检测并扩增其VP2基因,利用MegAlign软件进行同源性比对并分析VP2蛋白主要突变的氨基酸位点,同时利用MEGA 7.0软件采用邻接法构建遗传进化树。结果表明：共获得55份CPV阳性血清样本,阳性率约为13.0%。PCR扩增得到大小约为1 755 bp的VP2基因。55株分离毒株之间的相似性为98.6%～100%;分离毒株与国内外参考毒株的相似性为97.4%～100%,与疫苗株Pfizer/vaccine/06的相似性为98.3%～98.9%。扩增序列的推导氨基酸主要在第5,297,370,426,440位发生变异。在55株分离毒株中,有32株为New CPV-2a亚型毒株,20株为CPV-2c亚型毒株,3株为New CPV-2b亚型毒株。55株分离毒株形成3个主要的流行分支,与国内参考毒株的亲缘关系较近,而与国外参考毒株、猫细小病毒的亲缘关系较远。说明New CPV-2a、CPV-2c、New CPV-2b亚型毒株在广西地区流行广泛,正逐步取代CPV-2a...  相似文献   

夏季猪繁殖障碍的防治及减少胚胎死亡的措施     

汪伟  赵刚  周星娅 《农技服务》2013,30(8):874-874,876

从投喂饲料质量、时间、次数及提高投喂日粮的脂肪水平等方面阐述了夏季猪繁殖障碍的防治方法,并从避免母猪发情后期授精、应激、妊娠期转移和配种不同时期满足维持需要的日粮等方面介绍了减少胚胎死亡的防治措施。  相似文献   

杂交玉米新品种——广玉9号     

和盛  芮体江  汪伟 《云南农业》2010,(7)

广玉9号是云南广大种业有限公司用自育系与自交系组配而成的一个优良玉米单交种,2009年12月30日经云南省丽江市农作物品种审定小组审定通过.审定编号:丽审(玉)(2009)002号.  相似文献   

猪IL-1β与IL-18SYBRGreenⅠ荧光定量PCR检测方法的建立     

何孔旺  俞正玉  倪艳秀  吕立新  周俊明  张雪寒  李彬  汪伟  温立斌  王小敏  范红结  茅爱华  郭容利 《江苏农业学报》2011,(6):1289-1294

IL-1β和IL-18是重要的促炎症细胞因子,在介导机体炎症反应中起重要作用.为了建立在体外定量检测猪细胞因子IL-1β和IL-18mRNA表达水平的SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR方法,依据GenBank中登录的猪细胞因子基因IL-1β、IL-18及管家基因β-actin核苷酸序列,设计特异性引物,经RT-PC...  相似文献   

番茄青枯病的综合防治技术     

季卫东  汪伟雄  江根华  余良军 《上海蔬菜》2007,(1):45-46

青枯病(Pseudomonas solanacearum Smith．)是浙江省番茄种植区域的主要病害之一,是典型的细菌性维管束病害。近年来随着蔬菜设施栽培的不断完善和高山蔬菜的迅速发展,番茄栽培由季节性向全年性发展,造成青枯病菌源累积,病害暴发流行趋重,危害逐年加大,导致产量下降,经济效益降低。为探索番茄青枯病的有效防治途径,笔者通过3年多的探索实践,提出了抗病品种的选择和利用,结合石  相似文献