共查询到20条相似文献，搜索用时 609 毫秒
1.
以醋酸纤维素膜作为固相载体，辣根过氧化物酶标记鸡抗传染性法氏囊病病毒抗体（ＩＢＤ—ＩｇＧ），饱和二氨基联苯胺为底物显色，建立了鸡传染性法氏囊病双抗体夹心Ｄｏｔ—ＥＬＩＳＡ诊断法。经方阵实验确定最佳反应条件为：ＩｇＧ的包被液为０．０５ｍｏｌ／Ｌ（ｐＨ９．６）碳酸盐缓冲液，包被浓度为１：５０；酶标抗体的工作浓度为１：１００；洗涤液为含０．０５％吐温—８０的０．０２ｍｏｌ／Ｌ（ｐＨ７．４）磷酸盐缓冲液；封闭液为含０．２％明胶的洗涤液；封闭时间、抗原及酶标抗体的作用时间均为３７℃３０ｍｉｎ。应用本方法和琼扩试验同步检测２０份已知阳性病料、１２０份待检病料和胚毒尿囊液、１０份正常鸡样品，结果表明，Ｄｏｔ—ＥＬＩＳＡ阳性率为９０％，而琼扩试验为４０％；凡琼扩试验阳性者，Ｄｏｔ—ＥＬＩＳＡ均呈强阳性，而在Ｄｏｔ—ＥＬＩＳＡ阳性样品中，只有４４％呈琼扩试验阳性，Ｄｏｔ—ＥＬＩＳＡ的敏感度为琼扩试验的１００倍。 相似文献
2.
ABC—Dot—ELISA检测鸡传染性支气管炎病毒 总被引：4，自引：0，他引：4
建立了ＡＢＣ－Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）的方法,其最佳反应条件是：包被液为０．０５ｍｏｌ／ＬｐＨ９．６的碳酸钠－碳酸氢钠缓冲液（ＣＢＳ）,免疫ＩＢＶ ＩｇＧ的最佳工作浓度为１：８０;抗原的最佳浓度为１：８００;封闭剂选用０．０１ｍｏｌ／Ｌ ｐＨ７．４含３０ｍＬ／Ｌ白明胶的ＰＢＳ,Ｂ－ＡｇＧ和ＡＢＣ－ＨＥＰ的最佳工作浓度为１：２００。用ＡＢＣ－ＨＥＰ的最佳工作浓度为１：２０ 相似文献
3.
从传染性法氏囊病流行的鸡场捕杀麻雀３０只，用鸡传染性法氏囊病病毒单克隆抗体类心阻断ＥＬ１ＳＡ检测抗体，阳性检出率高为１０％（３／３０）；以逆转录一聚合酶链反应检测病毒核酸，阳性检出率为１３．３％；ＲＴ－ＰＣＲ阳性样本病毒分离亦为阳性。 相似文献
4.
采用鸡传染性法氏囊病（ＩＢＤ）病毒（ＩＢＤＶ－２５１２）研制了检测ＩＢＯＶ抗体的ＥＬＩＳＡ试剂盒。抗原最佳包被浓度为５．１２μｇ／ｍｌ，被检血清最佳稀释度为１：２００，酶标结合物最佳工作浓度１：１０００．本试剂盒与美国ＫＰＩＩＢＤ－ＥＬＩＳＡ试剂盒比较，结果敏感性、特异性、重复性均达到美国同类产品水平，且易于操作．在４℃可稳定保存６个月、对北京地区４个非免疫鸡群的１０３只鸡测得其阳性率为５４％，对４５只ＳＰＦ鸡的阳性率为０％。 相似文献
5.
０．０５ＭｐＨ９．６碳酸盐缓冲液和０．０５ＭＰＨ１３ＮａＯＨ溶液作为包被液，分别用于间接ＥＬＩＳＡ检测乙型五号病病毒抗体。结果表明，用０．０５ＭＰＨ１３ＮａＯＨ溶泡包被可完全灭活五号病病毒抗原而用０．０５ＭＰＨ９．６碳酸盐缓冲液却有８７％的五号病病毒抗原未被杀灭；用于检测时，以０．０５ＭＰＨ１３ＮａＯＨ溶液为包被液在敏感性及检测结果的梯度方面都优于用０．０５ＭＰＨ９．６碳酸盐缓冲液。 相似文献
6.
鸡传染性法氏囊病蜂胶灭活苗的研究：疫苗制造安全性与免疫效力试验 总被引：1，自引：1，他引：0
用分离自甘肃兰州和天水的鸡传染性法氏囊病病毒Ｌ２株和Ｔｓ株，以对倍的蜂胶水乳剂为佐剂，制备鸡传染性法氏囊病蜂胶灭活疫苗。用该苗０．５ｍｌ接种５日龄或７日龄雏鸡，免疫后２１天ＡＧＰ抗体阳性率可达５０％－６０％；免疫后２８天，ＡＧＰ抗体阳性率可达１００％。用该苗１ｍｌ免疫产蛋鸡，免疫后２１天ＡＧＰ卵黄抗体效价可达１：６４以上。 相似文献
7.
应用间接酶联免疫吸附试验检测鸡传染性支气管炎抗体的研究 总被引：1，自引：0，他引：1
建立了辣根过氧化物酶标记兔抗鸡ＩｇＧ检测鸡传染性支气管炎抗体的间接ＥＩＳＡ法，其抗原包被浓度为４ｍｇ／Ｌ，待检血清与酶结合物的最佳稀释度各为１：８０，酶结合物，抗原抗体的作用时间分别为６０ｍｉｎ，３０ｍｉｎ，封闭液的浓度和作用时间分别为１％和６０ｍｉｎ，ＯＤ值大于０．２８７的判为阳性。用此法检测经ＩＢＶ灭活苗免疫鸡所产蛋孵出的雏鸡的母原抗体，ＯＤ值的Ｐ／Ｎ值为６．０，１５ｄ后降至２．０以下。检测１ 相似文献
8.
牛体外受精胚冷冻保存的研究 总被引：9，自引：0，他引：9
对牛卵泡卵母细胞体外受精（ＩＶＦ）１６８ｈ的致密桑椹胚、囊胚用常规快速冷冻法、预冷和不预冷的超快速冷冻法进行了冷冻保存试验。结果表明：ＩＶＦ囊胚采用含１０％甘油的常规快速冷冻法、含２．１ｍｏｌ／Ｌ甘油和０．２５ｍｏｌ／Ｌ蔗糖预冷５ｍｉｎ的一步冷冻法及含２５％甘油和２５％乙二醇预冷５ｍｉｎ的玻璃化冷冻法等３种方法进行冷冻保存，解冻后的继续发育率（６８．０％，５９．０％，６５．７％）均无显著差异（Ｐ＞０．０５），可用快速、简便、预冷的一步冷冻法或玻璃化冷冻法替代常规快速冷冻法；ＩＶＦ致密桑椹胚可用一步冷冻法（２．１ｍｏｌ／Ｌ甘油＋０．２５ｍｏｌ／Ｌ蔗糖）和玻璃化冷冻法（２５％甘油＋２５％乙二醇或２５％甘油＋２５％１，２－丙二醇）进行预冷的超快速冷冻保存；冻前预冷（５ｍｉｎ）能显著提高ＩＶＦ囊胚的冻后形态正常率和继续发育率（Ｐ＜０．０５）；ＩＶＦ囊胚冷冻—解冻后的继续发育率高于ＩＶＦ致密桑椹胚。 相似文献
9.
１日龄雏鸡感染鸡传染性贫血病毒后，胸腺和脾脏Ｔ淋巴细胞增殖反应分别于１４ｄ和７－２１ｄ明显减弱（Ｐ＜０．０１，Ｐ＜０．０５）；法氏囊和脾脏Ｂ淋巴细胞增殖反应分别于７－２１ｄ和２１ｄ显著减弱（Ｐ＜０．０１，Ｐ＜０．０５）；由此说明雏鸡感染ＣＩＡＶ后，胸腺，法氏囊和脾脏的细胞免疫功能和／或体液免疫功能均明显降低，此外，雏鸡感染ＣＩＡＶ后１４－４２ｄ，体重明显降低（Ｐ＜０．０１，Ｐ＜０．０５），胸腺和法 相似文献
10.
彩鸡传染性法氏囊病（ＩＢＤ）病毒（ＩＢＤＶ－２５１２）研制了检测ＩＢＤＶ抗体的ＥＬＩＳＡ试剂盒。抗原最佳包被浓度为５．１２μｇ／ｍｌ，被检血清最佳稀释度为１：２００，酶标结合物最佳工作浓度１：１０００。本试剂盒与美国ＫＰＩＩＢＤ－ＥＬＩＳＡ试剂盒比较，结果敏感性、特异性、重复性均达到美国同类产品水平，且易于操作，在４℃可稳定保存６个月。对北京地区４个非免疫鸡群的１０３只鸡测得其阳性率为５４％，对４ 相似文献
11.
检测鸡传染性鼻气管炎病毒抗体的间接ELISA方法的研究 总被引：1，自引：1，他引：0
分别用绿猴肾细胞和鸡胚成纤维细胞殖鸡传染性鼻气管炎病毒NL7784株，提纯抗原建立了检测鸡传染性鼻气管炎病毒抗体的间接酶联免疫吸附试验（ELISA），试验的最佳反应条件为：抗原最佳稀释度为1：160，酶标抗体为1：1000稀释，待检血清为1：160稀释，包被液为pH9．0的碳酸盐缓冲兴，6％犊牛血清（CS）作封闭液，稀释液用含10％CS的Tween－20磷酸盐缓冲液，洗涤液用含0．5％Tween－20的磷酸盐缓冲液，抗原与抗体的最佳反应时间为30分钟，底物的反应时间为15分钟。与中和试验进行了比较，证明所产方法具有很好的特异性、稳定性、可重复性和较高的敏感性。 相似文献
12.
用三种不同鸡传染性法氏囊病强毒株,对ＢＷＥＬ－ＳＰＦ鸡群１－１０个家系３周龄鸡进行敏感性试验,观察比较鸡群各家系对不同敏感性,测定不同毒株的毒价。广西强毒株（ＩＢＤＶ－ＧＸ株）〈ＬＤ５０为１０＾５．０／０．２ｍｌ;湖南强毒株,ＬＤ５０为１０＾５．２／０．２ｍｌ;吉林强毒株（ＩＢＤＶ－ＪＬ株）,ＬＤ５０为１０＾５．５／０．２ｍｍｌ,以１００ＬＤ５０攻毒剂量,对ＢＷＥＬ－ＳＰＦ鸡１￣１０家系的致死率为 相似文献
13.
以包涵体形式表达的猪带绦虫六钩蚴重组原的复性与纯化 总被引：3，自引：1，他引：2
应用比浊法,可溶必蛋白百分比,夹心ＥＬＩＳＡ及变性与非变性ＳＤＳ－ＰＡＧＥ等方法来评价猪带绦虫六钩蚴重组抗原的不同复性条件。透析法复性,透析液为含２ｍｏｌ／Ｌ尿素,１６０℃ｍｏｌ／ＬＰＥＧ４０００,１．０ｍｍｏｌ／Ｌ－０．１ｍｍｏｌ／ＬＧＳＨ－ＧＳＳＧ的ＰＨ９．０的Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ缓冲液,蛋白浓度为２－５ｍｇ＝ｍＬ,以静置缓慢透年为佳,上述条件任意缺一或快速透析,则免疫活性下降,二聚体,多聚体明显 相似文献
14.
高效液相法测定盐酸沙拉沙星制剂的含量 总被引：8，自引：0，他引：8
采用高效液相色法测定盐酸沙拉沙星制剂的含量,用Ｎａｖａ－ＰａｋＣ１８１５０＊３．９ｍｍ色谱柱,以０．５ｍｏｌ／Ｌ柠檬酸－０．５ｍｏｌ／Ｌ醋酸铵－乙腈（８０：１０：１８）为流动相,用高氯酸调ＰＨ至２．４;流速１．２ｍｌ／ｍｉｎ,检波波长２７４ｎｍ;线性范围０．２－１．２μｇ（ｒ＝０．９９９９）,平均回收率９９．７％,ＲＳＤ＝０．３％（ｎ＝７）。本方法简便,准确,适用该产品质量控制。 相似文献
15.
四株鸡传染性法氏囊病病毒毒力的研究 总被引：5，自引：0，他引：5
对从黑龙江省分离的４株鸡传染性法氏囊病病毒通过易感鸡接种，用病理学技术进行了致病力的研究。结果表明，各毒株毒力有一定差异，基保Ｈ３，Ｈ４株毒力高于Ｈ１，Ｈ２株，且有迅速致法氏囊萎缩的特性；Ｈ３，Ｈ４株引起试验鸡法氏囊指数显著下降（Ｐ〈０．０５），脾脏指数明显增加（Ｐ〈０．０５），Ｈ３，Ｈ４株接种５０日龄Ｄ７８疫苗免疫病，免疫保护指数分别为５０％，６０％，传统疫苗不能提供以分保护。 相似文献
16.
采用增殖的鸡传染性鼻气管炎病毒（ARTV）NL7784株，经PEG－20000浓缩液提纯抗原和纯化羊抗鸡IgG抗体，建立了检测ARTV抗体的间接酶联免疫吸附试验。该试验的最佳反应条件为：包被液为pH9.6的0.05mol/L碳酸盐缓冲液，抗原最佳稀释度为1：160，以含6％犊牛血清（CS）的磷酸盐缓冲液作为封闭液，稀释液用含10％CS、0.5% Tween-20的磷酸盐缓冲液，抗原与血清结合的最佳反应时间为30min；酶标抗体的最佳稀释倍数为1：1000，酶联反应的最佳时间为30min，底物的最佳反应时间为15min。本方法具有良好的特异性、稳定性、可重复性和较高的敏感性。 相似文献
17.
鸡尿酸盐沉积临床病理学实验研究 总被引：15，自引：2，他引：13
将２５６只３５日龄迪卡鸡随机分为对照、高蛋白Ⅰ、高蛋白Ⅱ、高钙和肾衰组，通过人工复制尿酸盐沉积病例，对禽痛风进行临床病理学研究。结果：（１）正常鸡血浆中约有０．１０７ｍｍｏｌ／Ｌ的尿酸与大分子（蛋白质）结合，当血浆尿酸浓度升高时，结合尿酸的浓度不变，游离尿酸水平升高；（２）高蛋白饲料使饮水增多，血浆尿酸、ＮＰＮ升高（Ｐ＜０．０１或Ｐ＜０．０５），而肾脏菊糖清除率与对照组（３．２７２μｇ／ｋｇ．ｍｉｎ－１）差异不显著（Ｐ＞０．０５），剖检未见痛风病变；（３）日粮高钙使采食量下降，增重降低，血浆钙、尿酸、ＮＰＮ升高（Ｐ＜０．０１或Ｐ＜０．０５），肾菊糖清除率（２．７０９μｇ／ｋｇ．ｍｉｎ－１）与对照组差异不显著（Ｐ＞０．０５），但死亡鸡中３／１１见肾和输尿管内有较多尿酸盐沉积；（４）肾脏损害使血浆尿酸、ＮＰＮ升高（Ｐ＜０．０１或Ｐ＜０．０５），Ｎａ＋、总蛋白降低（Ｐ＜０．０５），肾菊糖清除率显著低于对照组（Ｐ＜０．０５），死亡鸡中１９／２７有明显肾脏肿大、肾和输尿管内沉积大量尿酸盐。 相似文献
18.
硒增强雏鸡对IBD抵抗力机制的细胞免疫研究 总被引：5，自引：0，他引：5
为了解硒对雏鸡传染性法氏囊病（ＩＢＤ）抵抗大的影响及其细胞免疫机制，自１日龄起给雏鸡分别饲喂基础（含硒０．０８６ｍｇ／ｋｇ）、补硒０．３ｍｇ／ｋｇ和０．６ｍｇ／ｋｇ的不同日粮，于４９日龄采用微量全血培养￣３Ｈ－ＴｄＲ掺入法测定其中自然发生ＩＢＤ后第１０天和正常对照雏鸡的Ｔ淋巴细胞转化率，并计算ＩＢＤ鸡死亡率。结果，两补硒组ＩＢＤ雏鸡死亡率显著低于基础日粮组ＩＢＤ雏鸡（Ｐ＜０．０１）；ＩＢＤ明显抑制雏鸡Ｔ淋巴细胞转化率（Ｐ＜０．０５；Ｐ＜０．０１）；补硒的正常对照雏鸡和ＩＢＤ雏鸡Ｔ淋巴细胞转化率分别高于各自基础日粮雏鸡（Ｐ＜０．０５；Ｐ＜０．０１）。结果显示补硒可提高雏鸡细胞免疫功能，从而增强雏鸡对ＩＢＤ抵抗力，降低雏鸡死亡率。 相似文献
19.
麻雀自然感染鸡传染性法氏病病毒的调查 总被引：2，自引：0，他引：2
从鸡传染性法氏囊病流行的鸡场捕杀麻雀５４只，用鸡传染性法氏囊病病毒单克隆抗体夹心阻断ＥＬＩＳＡ检测抗体，阳性检出率为７．４％；以逆转录－聚合酶链反应检测病毒核酸，阳性检出率为１１．１％；ＲＴ－ＰＣＲ阳性样本病毒分离亦为阳性。结果表明；ＩＢＤ流行的鸡场里的麻雀能够发生ＩＢＤＶ自然感染，麻雀可能是ＩＢＤＶ的贮存宿主或二次传染源之一。 相似文献
20.
用反相高效流体相色谱法（ＨＰＬＣ）测定了中西复方制剂中环丙沙星的含量,流动相为甲醇－０．００８ｍｏｌ／Ｌ西丁基溴化铵溶液（２０：８０,用８５％磷酸调节到ｐＨ３）,检测波长２８０ｎｍ,中西复方制剂中加入０．１ｍｏｌ／Ｌ ＨａＯＨ溶液对环丙沙星进行提取,平均回收率在９９．９５％～１００．０５％之间,批内变异系数小于０．７０％（ｎ＝６）,批间变异系数小于１．５５％（ｎ＝５）。 相似文献