共查询到20条相似文献,搜索用时 31 毫秒
1.
2.
玻璃化液作为一种比较理想的低温保护剂,对鼠胚胎和牛胚胎保存已获成功,但对适合于鱼类胚胎保存的至今未看到报道.为了研究玻璃化液对鱼类胚胎的低温保存效果,使鱼类胚胎低温冷冻保存获得成功,作者开展了利用不同的低温保护剂,采用不同浓度的组合,经超低温冷冻筛选后找出了能形成玻璃化的最低浓度,并利用这些能形成玻璃化的抗冻剂对泥鳅胚胎进行了毒性实验(1998),但还没有找出对胚胎保存效果好、毒性小、"高渗”损伤小的最佳玻璃化液.本文进一步利用这些玻璃化液对在不同条件下,对不同发育时期的泥鳅胚胎延长玻璃化对胚胎的作用时间,进行了系统的研究,现将结果总结如下. 1 材料和方法 相似文献
3.
4.
鲈鱼胚胎程序化冷冻保存的研究 总被引:4,自引:2,他引:4
对鲈鱼(Lateolabrax japonicus)胚胎的程序降温冷冻保存进行了研究。通过稀释液的筛选实验,选择了一种培养效果好的稀释液DSl液。研究了不同发育阶段胚胎对抗冻液的毒性耐受力,表明肌肉效应期胚胎的耐受力最强。测定了心跳期胚胎在抗冻液A1、A2、B1、B2中的平衡处理时间,为进行鲈鱼胚胎冻前平衡提供了参考时间。比较了植冰和不植冰对鲈鱼胚胎冷冻保存结果的影响及不同洗脱方法洗脱胚胎的效果。结果表明,在冷冻过程中诱导植冰的胚胎成活率高于未植冰组,两步法洗脱效果优于一步法和三步法。用不同降温速率进行了鲈鱼胚胎的超低温冷冻保存实验,结果表明,采用1.5℃/min的降温速率降温,在液氮中冷冻保存30min的72粒心跳期胚胎中有3粒成活,成活率为4.2%。 相似文献
5.
为实现藻类的自动计数,以小球藻为对象,提出一种基于荧光效应和调色板均衡化的小球藻自动计数方法。首先对小球藻荧光显微图像进行预处理,将真彩色小球藻荧光图像转换为256色图像,再采用调色板均衡化算法增强小球藻荧光图像对比度,并利用基于调色板的阈值分割算法将目标藻类与背景进行分割,同时进行计数。结果表明,该计数方法能够避免杂质影响,直接对藻类彩色图像进行图像增强和阈值分割,可以增强图像对比度,避免彩色图像灰度化过程中图像信息损失;采用连通区域标记方法结合连通区域的大小识别低重叠度藻类,可降低重叠藻类对计数结果的影响,从而提高小球藻的计算准确度。研究表明,该方法实现了针对藻类彩色图像的自动计数,且对小球藻的计数精度准确率达到95%以上,高于只使用灰度图像计数的方法。 相似文献
6.
7.
日本开发出牛受精卵分割技术日本东北农业试验场日前开发出牛受精卵分割技术 可有效地提高双胞胎牛的出生率。 该技术首先通过体外受精制造出受精卵 利用天的时间将其培育成胚胎 然后在覆盖受精卵的透明膜上打开直径为um 的小孔 受精卵产生细胞分裂 一半从小孔中冒出 形如葫芦 用细针在摵珨最细的部分扎一下 冒出的部分就会分离出来 形成受精卵 最后将受精卵分别置入两个代理母牛的子宫里 就可生出孪生牛。 以前制造孪生牛的方法是将受精卵培育成胚胎之后 用刀子将受精卵切成两半 由于包裹受精卵的透明膜 《畜禽业》2000,(5):9-10
日本开发出牛受精卵分割技术 日本东北农业试验场日前开发出牛受精卵分割技术,可有效地提高双胞胎牛的出生率。 该技术首先通过体外受精制造出受精卵,利用8天的时间将其培育成胚胎,然后在覆盖受精卵的透明膜上打开直径为30um,的小孔,受精卵产生细胞分裂,一半从小孔中冒出,形如葫芦,用细针在摵珨最细的部分扎一下,冒出的部分就会分离出来,形成受精卵,最后将受精卵分别置入两个代理母牛的子宫里,就可生出孪生牛。 以前制造孪生牛的方法是将受精卵培育成胚胎之后,用刀子将受精卵切成两半,由于包裹受精卵的透明膜富有弹性,受精卵容易受伤。新技术的特点是不损伤卵细胞,提高了孪生牛出生率。 日本东北农业试验场利用该技术已经将分成两半的8个受精卵移植到代理母牛的体内,其中一头母牛已经成功产下小牛。该试验场的研究员盐谷康先生说,如果在受精卵的培育条件方面再下些工夫,制造孪生牛的成功率可提高到40%~50%。 相似文献
8.
9.
10.
该方案通过超排和体外受精两种方式来生产牛胚胎,并采用非手术方法将胚胎植入本地黄牛、西杂牛子宫内,完成妊娠过程.同时结合胚胎保存、胚胎分割等技术手段,扩大资源和胚胎利用的时空局限.所有这些实施程序同样可以用于其他品种牛的胚胎生产和移植.其实施步骤包括以下内容.
1.超数排卵生产胚胎
1.1.供体、受体的选择
选择身体健康,无生殖道疾患,发情正常的纯血优良母牛作为供体.所选母牛最好为4-6岁的经产母牛,有三代系谱记录.体重在500kg以上.选择后的供体母牛最好转群饲养. 选择经产的、无生殖道疾患和无习惯性难产的本地黄牛和西杂母牛作为受体牛,选择的体型应适度.受体牛群同样要进行检疫,防疫和驱除体内外寄生虫,并进行生殖器官检查. 供体、受体牛均应有一个情期的发情记录,如果尚无,最好将供、受体母牛转群、作一个自然情期观察和记录. 相似文献
11.
玻璃化液对泥鳅胚胎成活率的影响 总被引:2,自引:0,他引:2
玻璃化液作为一种比较理想的低温保护剂 ,对鼠胚胎和牛胚胎保存已获成功 ,但对适合于鱼类胚胎保存的至今未看到报道。为了研究玻璃化液对鱼类胚胎的低温保存效果 ,使鱼类胚胎低温冷冻保存获得成功 ,作者开展了利用不同的低温保护剂 ,采用不同浓度的组合 ,经超低温冷冻筛选后找出了能形成玻璃化的最低浓度 ,并利用这些能形成玻璃化的抗冻剂对泥鳅胚胎进行了毒性实验 (1998) ,但还没有找出对胚胎保存效果好、毒性小、“高渗”损伤小的最佳玻璃化液。本文进一步利用这些玻璃化液对在不同条件下 ,对不同发育时期的泥鳅胚胎延长玻璃化对胚胎的作… 相似文献
12.
13.
研究了塔玛亚历山大藻(Alexandrium tamarense)ATHK株对海湾扇贝受精卵孵化的影响,并探讨了可能的影响机制。将海湾扇贝受精卵暴露于不同密度的塔玛亚历山大藻ATHK中,观察其对胚胎孵化各阶段的影响,并利用光镜和透射电镜对实验组和对照组胚胎的外部形态和内部结构进行连续观察。结果表明:该藻对海湾扇贝受精卵孵化有显著的抑制作用,其IC50约为800 mL-1;2000 mL-1的ATHK延缓或破坏了胚胎的正常发育,胚胎内部出现大量溶酶体,原肠胚腔不能形成,且部分细胞出现胞质肿胀、线粒体自溶的现象,细胞不能进行正常的功能性分化;观察发现实验组中有些担轮幼虫的外形畸变,鞭毛发育迟缓;至24 h(D型幼虫)时,ATHK组中的D型幼虫数量远远低于对照组(P<0.05),且死亡率明显高于对照组。观察还发现ATHK藻细胞和胚胎碰撞接触的现象,这种碰撞接触可能对有害物质的释放和转移有一定的刺激作用。 相似文献
14.
利用显微注射技术冷冻保存牙鲆胚胎 总被引:1,自引:0,他引:1
在鱼类胚胎的冷冻保存中,需要抗冻剂有效地渗入胚胎,才能对胚胎起到保护作用.本研究采用显微注射技术将抗冻剂直接注射到牙鲆(Paralichthys olivaceus)胚胎内,以实现牙鲆胚胎的玻璃化低温冷冻保存.研究中,首先对抗冻剂种类进行了选择,将抗冻剂的毒性由大到小依次排列为:乙二醇(EG)、甘油(Gly)、二甲基亚砜(DMSO)、甲醇(MeOH)、1,2丙二醇(PG)、PM21(PG:MeOH=2:1);对胚胎发育时期和注射剂量进行了筛选.实验结果显示,注射600pL(1 pL=10-6mL)抗冻剂PM21后,牙鲆的心跳期胚胎成活率显著高于尾芽期胚胎(P<0.05),成活率为(64.04 2.05)%;对卵黄囊、卵膜与卵黄膜间隙作为注射部位进行了选择,发现采用卵黄囊内注射的胚胎成活率高于"五步平衡法",并显著高于通过卵黄膜间隙注射(P<0.05),其成活率为(44.24±7.88)%.结果表明,注射600pL 35%PM21至牙鲆心跳期胚胎卵黄囊内,平衡10min,然后进行玻璃化冷冻保存,取得了68.2y.4%透明胚胎,能够对牙鲆胚胎提供很好的保护.说明显微注射方法可以成功地将抗冻剂注射入牙鲆胚胎,并在牙鲆胚胎的冷冻及胚胎的完整性方面发挥有效的保护作用. 相似文献
15.
干细胞(Stem Cell)是一类具有分化潜能和自我复制的早期未分化细胞。胚胎干细胞(Embryonic stem cells,ES细胞)是一种早期胚胎内细胞团(inner cell mass,ICM)或原始生殖细胞(primordial germ cell,PGC)经体外分化抑制培养,分离和克隆得到的具有发育全能性的高度未分化细胞。本文综述了胚胎干细胞的形态学、生长特性、免疫学鉴定方法,ES细胞抑制分化和诱导分化的机理以及饲养层、血清和细胞因子等影响胚胎干细胞分离克隆的因素,并进一步阐述了胚胎干细胞的应用前景以及存在的问题。 相似文献
16.
17.
不同抗冻剂对牙鲆胚胎毒性研究以及玻璃化颗粒冷冻保存方法的应用 总被引:4,自引:0,他引:4
以牙鲆(Paralichthys olivaceus)不同发育期胚胎为实验材料,研究了7种渗透性和5种非渗透性抗冻剂对牙鲆尾芽期和心跳期胚胎的毒性,同时对玻璃化液在不同胚胎发育期的毒性作用,以及玻璃化颗粒冷冻过程中,冷冻颗粒降温和解冻的时间进行了研究。结果表明,单一渗透性抗冻剂对牙鲆胚胎的毒性随着抗冻剂浓度的升高、平衡时间的延长而提高,其毒性由大到小依次为乙二醇(EG)、酒精(EtOH)、甘油(Gly)、二甲基甲酰胺(DMF)、二甲基亚砜(DMSO)、甲醇(MeOH)、1,2-丙二醇(PG)。非渗透性抗冻剂中聚乙烯吡咯酮(PVP)对牙鲆尾芽期胚胎的毒性最强,其次是蔗糖和D果糖,葡聚糖和葡萄糖毒性最弱。在总体积分数一定的情况下,PG、MeOH与DMSO体积比为9∶6∶5的混合抗冻剂对牙鲆尾芽期胚胎毒性最低;各发育期胚胎经过玻璃化液平衡后,尾芽期以前胚胎的成活率随胚胎发育期逐渐升高,心跳期以后逐渐降低,尾芽期和心跳期成活率最高。含胚胎的玻璃化颗粒冷冻降温时间最短为15.09 s,解冻时间最短为6.22 s;而不含胚胎的玻璃化颗粒冷冻降温和解冻时间分别为(13.83±1.86)s和(7.20±0.90)s。将PG、MeOH与DMSO按体积比9∶6∶5配成总体积分数为35%的混合溶液,再添加5%的蔗糖配制成玻璃化液,采用此玻璃化颗粒冷冻方法对173粒牙鲆尾芽期至心跳期胚胎进行超低温冷冻保存,解冻后共获得4粒成活胚胎。 相似文献
18.
研究了高渗与低渗胁迫对离体培养的中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)不同发育期胚胎中生化成分含量及消化酶活性的影响。结果显示:从原肠期发育到出膜前期,对照组(盐度15)胚胎中蛋白含量降低(P<0.05)、胰蛋白酶与胃蛋白酶活性升高(P<0.05),脂类含量(P>0.05)和脂肪酶活性(P<0.05)降低,碳水化合物含量和淀粉酶活性均在眼点期升高(P<0.05)而在出膜前又降低(P<0.05);低渗胁迫引起胚胎蛋白含量降低(P<0.05),而高渗胁迫导致胚胎蛋白含量升高(P<0.05);高渗胁迫对胚胎脂类含量无显著影响(P>0.05),而低渗胁迫引起出膜前期胚胎中脂类含量显著降低(P<0.05);高、低渗胁迫对胚胎碳水化合物含量均无显著影响(P>0.05);除高、低渗胁迫均显著降低眼点期胚胎淀粉酶活性(P<0.05)而引起出膜前期胚胎胰蛋白酶活性略降低(P>0.05)外,低渗胁迫导致不同发育时期胚胎消化酶活性升高,而高渗胁迫导致酶活性降低;除脂肪酶外,渗透胁迫对原肠期胚胎消化酶活性的影响均具有显著性(P<0.05)。研究结果说明,蛋白质和脂类是中华绒螯蟹胚胎发育过程中重要的能源物质与结构物质,渗透胁迫通过改变中华绒螯蟹胚胎消化酶的活性进而影响胚胎对卵黄物质的分解与利用,最终影响胚胎的发育。本实验结果提示,河口盐度过高或过低均可能对中华绒螯蟹早期胚胎的发育及后期幼体的质量产生潜在的不利影响。 相似文献
19.
进行了百草枯(paraquat)对尖膀胱螺(Physa acuta)成体及其胚胎各发育期(囊胚期、担轮幼虫期、面盘幼虫期和仔螺孵化期)的急性毒性实验.结果表明,百草枯对尖膀胱螺成体72 h和96 h LC50分别为2.53 mg/L和1.41 mg/L;对其胚胎各个时期72 h LC50分别为2.63、2.45、2.07、1.53 mg/L;96 h LC50分别为1.63、1.41、1.25、0.60 mg/L.百草枯对尖膀胱螺成体及其胚胎各发育期均有一定的毒性效应,胚胎比成体敏感,对胚胎各发育期的毒性也不同;随着染毒时间的延长,胚胎敏感性逐渐增强.研究表明,当百草枯进入水生态系统时,有可能对尖膀胱螺及其种群稳定造成影响. 相似文献
20.
鱼类胚胎冷冻保存前几个因子对其成活率影响的研究 总被引:6,自引:0,他引:6
1.稀释液渗透压升高是影响胚胎成活的主要因素,在达到480mOsm/L时胚胎全部死亡。2.在室温和0℃条件下几种抗冻剂对胚胎的极限浓度分别为二甲亚砜16%和20%,甘油4%和5%,乙二醇12%和12%,甲醇0℃下为20%。3.原肠期以前的胚胎为敏感期胚胎,不宜进行低温冷冻保存。4.冻前处理超过180分钟后胚胎出现畸形变化。 相似文献