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相似文献
 共查询到20条相似文献,搜索用时 453 毫秒
1.
以重组痘苗病毒作载体,探讨了关于Vpu ORF对人免疫缺陷病毒1型(HIV-1)Env蛋白合成和免疫原性的影响。结果表明,如果存在Vp ORF,Env蛋白的合成降低,并且降低其产生抗Env抗体的水平。去掉Vpu ORF,不但提高Env蛋白的合成,而且提高其产生的抗Env抗体的水平。  相似文献   

2.
HIV—2env基因在大肠杆菌和重组痘苗病毒中的表达   总被引:1,自引:0,他引:1  
将编码人Ⅱ型免疫缺陷病毒(HIV-2)envgp120(E1)和gp36(E2)分别克隆到原核高效表达载体pET17b、pBV220和真核表达载体p10、p16中,构建成8个重组质粒。经SDS-PAGE和Westernblot分析证明,在原核表达系统成功地表达了HIV-2env融合蛋白,表达的蛋白分子量分别为35000、70000和50000,而原核表达质粒pETE1在SDS-PAGE凝胶的35000处可见明显的额外蛋白带。经薄层扫描测定,原核系统表达的Env蛋白(gp120)相对含量为5.8%。在真核细胞中表达的Env蛋白经Westernblot检测分析,分子量分别为60000、57000和42000。上述表达的Env蛋白均能与HIV-2阳性血清发生特异性反应。重组痘苗病毒可诱导小鼠产生抗HIV-2Env抗体  相似文献   

3.
刘楠  田梅 《中国兽医学报》1997,17(2):131-134
将编码人1型免疫缺陷病毒(HIV-1)蛋白U的vpu基因片段,克隆到原核表达载体pET-17b2(pET-17b去掉了一含起始密码子ATG的60bp小片段)的T7噬菌体启动子下游,构建成重组表达质粒pET-17b2,并使vpu基因片段在大肠杆菌BL21(DE3)中高效表达,产物为16000的Vpu重组蛋白,表达量占菌体总蛋白的11.2%。蛋白质印迹试验表明,重组Vpu蛋白与抗Vpu抗体发生特异性反应  相似文献   

4.
Gag蛋白是人Ⅰ型免疫缺陷病毒(HIV-1)重要的结构蛋白,可诱导机体产生体液和细胞免疫应答。本试验将HIV-1不同长度的长末端重复序列(LTR)和全长的gagORF置于痘病毒启动子控制下,经过同源重组、红细胞吸附试验筛选和间接免疫荧光试验鉴定,分离了6株重组痘苗病毒。免疫印迹(Westernblot)和免疫酶试验检测表明,6株病毒均能表达gag基因,其中以v16LG△2的Gag蛋白表达量最高,占细胞裂解物上清的5.19%,相当于14.7μg/106细胞,接近杆状病毒的表达产量。重组蛋白主要为p55gag蛋白前体,但也有一部分被加工,生成成熟蛋白p24gag、p17gag及其中间蛋白。表达的重组蛋白可形成病毒样粒子(VLP),并可诱导小鼠产生抗Gag蛋白抗体  相似文献   

5.
采用腹腔的接种1次脾内注射禽呼肠孤病毒(ARV)蛋白免疫小鼠,经3次融合后,共筛选8株分泌抗禽呼肠孤病毒(单克隆抗体杂交瘤细胞株,这8株McAb均可与ARVS1133株,FDO株发生反应,而与IBDV,MDV,EDS-76病毒不发生反应,经亚类鉴定,AE7,AF8,BD1,DH10,EE5为IgG1;AD6,CG4为IgC2a,AG7为IgG2b。腹水效价在10^3~10^5之间。  相似文献   

6.
以血凝素(HA)基因为侧翼,将狂犬病病毒糖蛋白基因cDNA置于不同类型的痘苗病毒复合启动子下游,构建了4种表达质粒。重组表达质粒转染已感染WR株痘苗病毒的BHK21细胞,并通过鸡红细胞吸附试验,筛选、纯化出与表达质粒对应的4组HA-重组痘苗病毒:vSFJ1-10RVgp,vSFJ2-16RVgp,vRJ1-10RVgp,vRJ2-10RVgp。经间接免疫荧光试验(IFA)鉴定,从4组重组病毒中每组各鉴定出1株阳性重组病毒。Westernblot检测显示,重组病毒感染的BHK21细胞裂解物上清中有1种蛋白与抗RVGP的McAb发生特异反应,分子量为69000。在重组病毒感染早期,RVGP的表达量以vSFJ1-10RVgp最高;而在感染晚期,则以vSFJ2-16RVgp最高。4株重组病毒免疫小鼠,均能够不同程度地诱导小鼠产生抗RVGP特异性抗体。  相似文献   

7.
对猪生殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)核衣壳蛋白(N)作为ELISA抗原进行了研究,将编码PRRSVN蛋白的基因0RF7cDNA插入杆状病毒表达载体pBlueBacHis2A,通过同源重组获得了重组杆状病毒ORF7-AcMNPV,感染昆虫细胞SF9表达了N蛋白,占细胞总蛋白的7.07%,纯化后作为抗原建立了间接ELISA,与IDEXX公司的ELISA诊断试剂盒有96%的符合率,与IFA有100%的符合率。试验证实:PRRSVN蛋白在昆虫细胞中得到高效表达且是检测PRRSV抗体的良好抗原。  相似文献   

8.
1日龄SPF来航鸡经口双重感染鸡贫血病病毒(CAV)Cux-1株及鸡呼肠病毒(REOV)S1133或Uchida株。于接种后第14天,检查血细胞压积(PCV)、称体重、观察骨髓、胸腺及法氏囊病变。结果,双重感染CAV及S1133株REOV的雏鸡与感染其中之一病毒的雏鸡相比,其体重增重少,病变重,而且比仅感染CAV的雏鸡在平均PCV上也明显低。双重感染CAV及Uchida株REOV的雏鸡,不加重发病  相似文献   

9.
HIV—1gag基因重组痘苗病毒的构建的高效表达   总被引:4,自引:1,他引:3  
Gag蛋白是2 I型免疫缺陷病毒(HIV-1)重要的结构蛋白,可诱导机体产生体液和细胞免疫应答。本试验将HIV-1不同长度的长末端重复序列(LTR)和全长的gagORF置于痘病毒启动子控制下,经过同源重组、红细胞吸附试验筛选和间接免疫荧光试验鉴定,分离了6株重组痘苗病毒。免疫印迹(Western blot)和免疫酶试验检测表明,6株病毒有表达gag基因,其中以v161.G△2的Gag蛋白表达量最高  相似文献   

10.
减蛋综合征病毒pVⅢ基因和E3区序列测定及结构分析   总被引:9,自引:1,他引:8  
克隆了减蛋综合征病毒(EDSV)中国分离株基因组HindⅢ-E片段,并分析了其核苷酸序列。该片段位于基因组中央58.7~68.9物理图谱单位(mu),片段全长共3194bp。其中含有1个完整的和2个不完整的开放性读码框架(ORF),分别编码pVⅢ蛋白、100K蛋白基因C端和纤维蛋白N末端部分。pVⅢ蛋白基因由753个碱基(nt)组成,编码250个氨基酸(aa),编码产物的分子量为28500。氨基酸水平的同源性比较表明,EDSV的pVⅢ蛋白与禽腺病毒1型(FAV1)及人和其他动物腺病毒pVⅢ蛋白的同源性为28%~36%,而与羊腺病毒(OAV)的同源性高达52%,提示EDSV与OAV间的亲缘关系更近。按照人腺病毒基因组结构的特征,在pVⅢ和纤维蛋白基因之间,应为E3区,但该序列只有245个nt组成,序列中保留了TATABox和polyA信号。但除了2个仅编码49aa和32aa多肽的ORFs外,不编码任何产物,且核苷酸序列与其他腺病毒的E3区无同源性,证实此区无明显E3区样结构。  相似文献   

11.
本文概述了猪的毛色类型、猪的毛色遗传模式,着重综述了猪毛色基因分子基础的研究进展,指出存在问题并就未来发展方向做了思考。  相似文献   

12.
以国际标准强毒R株人工感染非免疫产蛋鸡,定时扑杀,分别从鼻窦、眶下孔、气管、肺、气囊、卵巢和输卵管分离MG,并收集感染鸡所产蛋分离MG。结果表明,人工感染48小时后上、下呼吸道及肺已被全面感染,96小时气囊已被感染,120小时输卵管已能分离到MG,卵巢始终分离不到MG。人工感染鸡自144小时便能在其所产蛋中分离出MG。药物治疗能在72小时内消除感染,油乳剂苗则需24天后逐渐降低蛋内MG分离率,药物卵内注射、种蛋药浴、高温处理均能杀死卵内MG,但以研制的种蛋浸泡剂药浴效果为最好。  相似文献   

13.
用硝酸和高氯酸消化蜂蜜,使硒游离出来,在微酸性环境下,硒和2,3-二氨基萘(DAN)生成有较强荧光的物质,用环己烷萃取,在激发波长378nm,荧光波长518nm处测定其荧光强度。蜂蜜中硒含量范围:0.10~0.82μg/g。表明:蜂蜜应视为天然富硒营养品。  相似文献   

14.
本试验旨在研究两种绿头鸭(白羽绿头鸭和绿头鸭)肌肉营养组成和价值,为绿头鸭肉产品的开发利用提供基础数据和理论依据。选择白羽绿头鸭和绿头鸭60只(每个品种各30只,公母各半),依照国家标准测定胸肌粗蛋白质、粗脂肪、胆固醇含量及氨基酸、脂肪酸、微量元素和维生素的组成和含量,并对胸肌进行氨基酸评价及脂肪酸营养价值评价。结果显示,白羽绿头鸭肌肉粗蛋白质含量显著低于绿头鸭(P<0.05);两种绿头鸭肌肉中均检测到17种含量大于0.01%的氨基酸,其中白羽绿头鸭肌肉苏氨酸、组氨酸、丝氨酸和脯氨酸含量显著高于绿头鸭(P<0.05),赖氨酸、谷氨酸和精氨酸含量显著低于绿头鸭(P<0.05);检测到13种含量均大于0.01%的脂肪酸,其中白羽绿头鸭硬脂酸和油酸含量显著低于绿头鸭(P<0.05);检测到9种矿物质元素(钠、镁、钾、钙、锰、铁、铜、锌和硒),两种绿头鸭差异不显著(P>0.05);检测到8种维生素,白羽绿头鸭肌肉维生素B1含量显著高于绿头鸭(P<0.05),维生素D和维生素E含量显著低于绿头鸭(P<0.05)。两种绿头鸭肌肉氨基酸比例接近世卫组织推荐的理想模式,富含人体所需的矿物质元素和维生素,具有广阔的开发利用前景。  相似文献   

15.
乳酸杆菌益生作用机制的研究进展   总被引:2,自引:0,他引:2  
乳酸杆菌作为益生菌广泛用于人和动物。本文综述了乳酸杆菌改善宿主健康的机制。乳酸杆菌可通过产生抗菌物质如乳酸、过氧化氢、细菌素,或者通过竞争营养或肠道黏附位点来抑制致病菌;通过诱导黏附素的分泌或阻止细胞凋亡而增强肠道的屏障功能,从而保护肠道。文章重点讨论了乳酸杆菌表面成分(表面蛋白、脂磷壁酸和肽聚糖)与肠道受体(C型凝集素受体、Toll样受体和 Nod样受体),阐述了他们结合后启动免疫调节信号,调控肠道免疫功能以发挥改善健康作用的机制。  相似文献   

16.
在现代法律秩序中,商会自治规范是制定法的基础和必要的补充,甚至在某些方面替代了制定法;商会自治规范主要包括商会组织规范、行为规范、惩罚规范以及争端解决规范等;其效力仅及于其内部成员;商会自治规范和制定法之间存在冲突,但也存在整合的基础。  相似文献   

17.
Reasons for performing study: Clinical experiences indicate that centesis of the lateral compartment of the femorotibial joint is often unsuccessful. Objective: To determine the accuracy of 2 published and 2 unpublished techniques of centesis of the lateral compartment of the femorotibial joint. Hypothesis: It was hypothesised that a drug can be administered into the lateral compartment of the femorotibial joint via a diverticulum of this joint that surrounds the medial aspect of the long digital extensor tendon and that this technique is more accurate than described techniques of centesis of this compartment. Methods: Twenty‐four stifles of 12 horses were divided equally into 4 groups and a radiocontrast medium injected into the lateral compartment of the femorotibial joint of each group using a hypodermic needle inserted: 1) caudal to the lateral patellar ligament and proximal to the tibial plateau, 2) caudal to the long digital extensor tendon and proximal to the tibial plateau, 3) between the long digital extensor tendon and bone of the extensor groove of the tibia or 4) directly through the long digital extensor tendon until it contacted bone. Twelve veterinary students who had no experience using any of these techniques performed the injections. Accuracy of each technique was determined by examining radiographs obtained after injecting the contrast medium. Results: The most successful technique for arthrocentesis was by inserting a needle through the long digital extensor tendon. This approach was successful in all attempted cases, whilst other techniques had lower rates of success. Conclusions: The lateral compartment of the femorotibial joint can be accessed accurately by inserting a needle through the long digital extensor tendon as it lies within the extensor groove. Other techniques may not be as accurate for clinicians inexperienced in arthrocentesis of the lateral compartment of the femorotibial joint.  相似文献   

18.
A retrospective review of records of 205 cats with histologically confirmed disease of the spinal cord was performed to identify the prevalence of disease in this nonrandomly selected population of cats. Clinical records were reviewed, and age, duration of neurologic illness, and clinical and histopathologic findings in cats with spinal cord disease were abstracted. Disease processes were classified into 7 categories and 23 groups. The most common diseases affecting the spinal cord of cats were feline infectious peritonitis (FIP), lymphosarcoma (LSA), and neoplasia of the vertebral column secondarily affecting the spinal cord. Information on age, onset and duration of clinical signs, and lesion localization at the postmortem examination in cats belonging to the 7 categories of disease were analyzed to create a practical list of differential diagnoses. Cats were also subcategorized into 3 groups based on their age at death. FIP was the most common disease of cats younger than 2 years of age. LSA and vertebral column neoplasia were the most common diseases affecting cats between 2 and 8 years of age. Vertebral column neoplasia was the most common disease affecting cats older than 8 years of age. Results of this histopathologic study showed that FIP and LSA were the most common disease processes affecting the spinal cord of cats. However, at least 21 other groups of diseases and their relative prevalence were identified.  相似文献   

19.
应用光镜和透射电镜技术,观察了3~6月龄比格犬甲状腺的显微和超微结构。结果表明,比格犬甲状腺实质由滤泡和滤泡旁细胞构成。滤泡呈圆形或椭圆形,直径20.22~220.00μm,平均90.80μm;由单层立方上皮细胞围成,细胞高度3.04~7.11μm,平均5.18μm,电镜下可见功能状态不同的两型滤泡上皮细胞;滤泡旁细胞很多,直径4.40~8.82μm,平均6.23μm,位于滤泡之间或镶嵌于滤泡上皮细胞之间,也可聚集在一起形成滤泡样结构,胞质内含有大量的分泌颗粒,电镜下也可见两种类型的滤泡旁细胞。  相似文献   

20.
根据JJF1059-1999《测量不确定度评定与表示》建立了高效液相色谱法测定鸡肉中土霉素残留测量的不确定度评定方法,评定过程包括建立测量程序、分析不确定度来源、对不确定度分量进行量化。将不确定度归类为两大类。随机效应导致的不确定度可以通过一系列具有统计意义的重复观测值进行A类评定;系统效应导致的不确定度通过各测量器具、设备的说明书、校准证书提供的参数进行B类评定。本方法鸡肉中土霉素残留量的相对合成标准不确定度约为3.9%。  相似文献   

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