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1.
《福建农业学报》2019,(11)
【目的】凝集素是竹荪的一类生理活性物质,为进一步明确其药用功效,开展了长裙竹荪凝集素理化性质研究。【方法】长裙竹荪菌丝体通过生理盐水抽提、 20%～75%饱和度的硫酸铵沉淀、 DEAE-Sepharose和SephadexG-100柱层析纯化得到长裙竹荪菌丝体凝集素(DIL);并通过血细胞凝集活性、糖抑制试验、酸碱稳定性、热稳定性分析以及金属离子等因素来测定长裙竹荪菌丝体凝集素的理化性质。【结果】经PAGE显示单一条带,测得其亚基相对分子质量为43.6 kDa。该凝集素对供试的鸽、兔、鸭和鸡血红细胞具有凝集作用,对兔红细胞的凝集作用可被D-半乳糖和N-乙酰胺基-葡萄糖所抑制。长裙竹荪凝集素对热不稳定,经50℃处理10 min,活性明显降低;该凝集素在pH 4.0～8.0都保持着较高的凝集活性,其凝血活性依赖于Ca~(2+)和Mg~(2+)二价金属离子,Mn~(2+)和Zn~(2+)则无影响。【结论】长裙竹荪菌丝体凝集素对动物血红细胞具有较好的凝集活性,而且凝集活性需要在一定浓度的Ca~(2+)和Mg~(2+)才会起作用。 相似文献
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为探讨外源杀虫基因导入对棉花重要防御物质凝集素的影响,同时建立棉花凝集素的灵敏检测方法,采用血凝法检测转基因(Bt、CpTI和外源凝集素基因)棉花中凝集素的变化,并经胰蛋白酶处理鸡血红细胞、不同温度处理和比色法测定棉花的凝集素活性。结果表明,棉花叶片中凝集素水平随棉花生长而发生变化,不同外源基因的导入使棉花凝集活性升高或降低。采用经胰蛋白酶修饰后的鸡血红细胞检测,棉花凝集活性明显提高,最高是未经处理检测的64倍。棉花凝集素具有一定的抗热性,在45℃以下很稳定,但随温度的升高和处理时间的延长活性下降。血凝反应和比色法均能直观、定量地反映棉株中凝集素活性,但后者精度更高。以上研究结果表明,外源杀虫基因的导入引起棉花凝集素水平发生改变,比色法可以作为检测棉株中自身和外源凝集素基因表达后凝集活性的重要手段。 相似文献
3.
草菇子实体不同发育期四种同工酶的初步研究 总被引：3，自引：0，他引：3
采用聚丙稀酰胺凝胶电泳对草菇子实体的6个生育期和3个部位的4种同工酶进行测定。结果表明,过氧化物酶同工酶共有5～6条带,细胞色素氧化酶同工酶2～5条带,多酚氧化酶同工酶2～6条带,酯酶同工酶4～6条带。各类同工酶谱带的变化标志着草菇子实体不同发育期和不同部位生理活性的差异。 相似文献
4.
[目的]研究物理与化学因子对白芸豆凝集素生物学活性的影响,为白芸豆凝集素开发利用奠定理论基础和提供技术参考.[方法]白芸豆（Phaseolus vulgarisL）种子经硫酸铵分级沉淀、DEAE-Sepharose离子交换和Sephadex G-100凝胶柱层析得到凝集素（PVL）;然后以不同温度和pH梯度、不同金属离子、不同变性剂处理样品,通过倍比稀释法测定凝集素的生物学活性.[结果]白芸豆凝集素能使兔血红细胞发生凝集,在20～70℃红细胞凝集活性不受影响,当温度达到80℃时凝集素样品仅有25％凝血活性,85℃加热30 min凝血活性全部消失.用EDTA溶液处理后,白芸豆凝集素失去凝血活性,金属离子Mg2＋和K＋能恢复凝血活性,Mn2＋能完全恢复凝血活性,Ba2＋、Cu2＋、Fe3＋、Ca2＋不能使凝血活性恢复.白芸豆凝集素在缓冲液pH低于4.0时凝血活性逐步降低,在pH 3.0时,活性仅有45％;在缓冲液pH高于7.2时活性逐步降低,pH 9.0时凝血活性仅有44％.3种变性剂变性试验中,脲能使凝集素凝血活性降低70％,盐酸胍能降低30％,SDS能降低18％.[结论]白芸豆凝集素具很强的热稳定性和广谱酸碱度适应能力;凝血活性依赖Mn2＋等金属离子,且仅能被变性剂6 mol/L脲部分抑制.在实际应用中,可根据适宜条件控制其物理和化学因素,防止凝集素变性失活. 相似文献
5.
为深入研究棉铃虫幼虫血淋巴免疫因子溶血素的分子结构和生理功能,明确其分离、纯化的理化条件,采用分光光度法分别研究了温度、浓度、作用时间、pH、EDTA和金属离子对该溶血素的溶血活性影响及其糖结合特性。结果表明,棉铃虫幼虫血淋巴溶血素属热不稳定型。溶血素反应浓度与溶血活性并不成正比,8倍稀释液的溶血活性反高于4倍稀释液。反应2 h后,血淋巴溶血素对鸡血红细胞溶解速度急剧加快,6 h溶血效能达最大。血淋巴溶血活性的最适pH 7.0～8.0。62.5～500 mmol·L~(-1)EDTA对血淋巴溶血活性具有促进作用,而Ca~(2+)却具有极显著的抑制作用。糖抑制试验结果表明,供试的8种糖(糖苷)和唾液酸均未对血淋巴溶血活性产生抑制作用。 相似文献
6.
一、动物来源SOD的制法从动物血红细胞制备SOD自1969年McCond和Fridovich首次从牛血红细胞中发现SOD以来,已建立了从动物血红细胞中提取纯化SOD的多种方法。其基本工艺流程为:血液预处理,洗涤红细胞和溶血;去除大部分杂蛋白得SOD粗品;再经柱层析分离得到精品。根据去除杂蛋白所采用的方法不同,可以将现有工艺基本分为以下几种。 相似文献
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体外筛选对鸡具有免疫刺激活性的CpG寡脱氧核苷酸 总被引：6，自引：1，他引：6
分别用有丝分裂原和CpG寡脱氧核苷酸(CpG ODN)对SPF鸡全血，经低速离心分离的外周血单个核细胞(PBMC)和脾脏细胞，用淋巴细胞分离液分离的PBMC和脾脏细胞进行刺激，用^3H-TdR掺入法测定并比较上述鸡免疫细胞在不同培养温度和细胞浓度下的转化效果，从而建立了适用于大批量筛选对鸡具有免疫刺激活性CpG ODN的淋巴细胞转化方法。进一步用该方法筛选自行设计合成的38条ODN.结果表明，用低速离心法分离的鸡PBMC，在细胞含量为10^7mL^-1、37℃、5％CO2条件下，经CpG ODN刺激64～66h后，可以得到稳定的高效转化；不含CpG模体的ODN不具有免疫刺激活性；CpG ODN 10、11和14具有最佳的免疫刺激活性，刺激指数大于10。 相似文献
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[目的]调查阿勒泰大型真菌中的凝集素.[方法]使用Tris-HC1缓冲液和Na2 HPO4-NaH2 PO4缓冲液对15科26种阿勒泰大型真菌的子实体进行凝集素的粗提取.采用2;兔红细胞悬液对这些大型真菌的凝集素提取液进行凝血活性的评价.[结果]绝大多数阿勒泰大型真菌的提取液显示出了凝血活性,其中碱竹杯伞(Clitocybe alkaliviolascens)、乳菇(Lactarius deceptivus)、皱皮疣柄牛肝菌(Leccinum duriusculum)和非白红菇(Russula exalbicans)4种大型真菌的凝血活性最高,这些大型真菌的凝血活性与其科属分类无直接相关性.它们的糖特异性和热稳定性也差异显著.[结论]26种阿勒泰大型真菌的凝集类提取液的绝大多数具有凝血活性,因此阿勒泰大型真菌是极具潜力的凝集素来源. 相似文献
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24个优质蛋白玉米自交系与中国温带玉米四大优势群代表自交系的配合力和杂种优势群研究 总被引：2，自引：0，他引：2
【目的】研究QPM种质与中国温带种质之间的杂种优势关系并划分杂种优势群。【方法】采用NCⅡ设计对24个热带、亚热带优质蛋白玉米（QPM）自交系和4个温带普通玉米优良自交系配制96个杂交组合，在云南省3种不同生态环境下对这些杂交组合进行农艺性状和产量配合力分析，评价群体的应用价值和利用潜力，再根据产量特殊配合力效应和系谱追踪划分杂种优势群。【结果】自交系YML761、CML171、CML172、中系096/o2、YML411、YML024和YML042产量一般配合力较高。产量SCA效应较高的组合有YML401×黄早四、CML172×Mo17、YML761×掖478、长709/o2×Mo17、H152×丹340、中系096/o2×掖478和YML872×Mo17。【结论】自交系YML761、CML171、CML172、中系096/o2、YML411、YML024和YML042在生产中有较大的利用价值。YML411、YML042、CA307、YML065和YML401归入Lancaster群；CML165、CML166、YML761、中系096/o2、长631/o2、YML011、YML872归入旅大红骨群；CML171、CML161、CML172、齐205、CA10139、YML330、8129归入四平头群，CML163、CML170、H152、长709/o2和YML024归入Reid群。本研究结果与系谱分析及前人的研究基本一致。 相似文献
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【目的】从国家级畜禽资源保护品种茶花鸡中分离乳酸菌,研究其益生特性,以期为禽用益生菌制剂研发奠定基础。【方法】采集散养茶花鸡新鲜粪便,使用MRS培养基分离乳酸菌,采用生理生化试验和16S r DNA基因序列分析法鉴定,并研究其胃肠道耐受性、抑菌活性、抗生素敏感性和肠上皮细胞黏附能力等益生特性。【结果】分离得到CHF4-1、CHF6-2、CHF7-2和CHF10-2共4株菌株。生理生化鉴定和16S rDNA序列分析结果表明:CHF4-1、CHF6-2、CHF7-2和CHF10-2分别为唾液乳杆菌、加氏乳杆菌、罗伊氏乳杆菌和约氏乳杆菌;与参考菌株鼠李糖乳杆菌GG相比,CHF6-2和CHF10-2具有较强的胃肠道耐受性和抗菌活性;加氏乳杆菌CHF6-2除对头孢噻肟中度敏感之外,对其余9种抗生素均敏感,且其细胞黏附水平为(13.07±0.22)个/细胞,黏附能力最强。【结论】从散养茶花鸡粪便中分离得到唾液乳杆菌、加氏乳杆菌、罗伊氏乳杆菌和约氏乳杆菌4株乳酸菌,其中加氏乳杆菌CHF6-2具有显著胃肠道耐受性、抑菌活性、抗生素敏感性和肠上皮细胞黏附能力等益生特性,可作为微生态制剂候选菌株进一步开展深层次研究。 相似文献
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小麦纹枯病生防菌株S 024的诱变育种研究 总被引：1，自引：0，他引：1
采用5种诱变方法(紫外线、微波、LiCl,LiCl 紫外线、LiCl 紫外线 微波)对出发菌株S 024进行了诱变处理.结果表明,几种诱变方法对S 024的诱变效果差异较大,紫外线(UV)照射和LiCl处理均未能筛选到正突变菌株;微波(MV)处理(50,100 s)可选育出高效菌株,LiCl和UV复合诱变处理的效果最好,共筛选到3个高效菌株(LiU-024-1,LiU-024-4,LiU-024-9),其中LiU-024-4菌株抑菌率比出发菌株S 024提高了34.44%;连续3代转代培养,其产生抗生素的能力基本稳定.用MV对3株高效菌株再进行诱变处理,其抑菌活性基本没有提高. 相似文献
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《云南农业大学学报(自然科学版)》2021,(4)
【目的】研究博落回提取物(Macleaya cordata extract,MCE)的体外抗菌活性,为其在动物生产中的使用和添加提供试验依据。【方法】以金黄色葡萄球菌、猪霍乱沙门氏菌、大肠杆菌和铜绿假单胞菌为受试菌,采用抑菌圈法测定MCE对4种受试菌的抑制效果;运用微量稀释法测定MCE对4种受试菌的最小抑制质量浓度(MIC)和最小杀菌质量浓度(MBC);通过时间—杀菌曲线法,测定MCE对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的杀菌效果。【结果】MCE对4种革兰氏阳性和阴性受试菌均有一定的抑制作用,抑制能力由强到弱依次为金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、猪霍乱沙门氏菌和铜绿假单胞菌,MIC分别为64、64、128和512μg/mL,MBC分别为128、128、256和1 024μg/mL;MCE对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的体外杀菌速率随质量浓度升高而增快,其中8、4、2倍于MIC的MCE分别在2、12、24 h可将2种受试菌完全清除,而1倍MIC的MCE在24 h后仍有少量细菌存活。【结论】MCE对受试菌均有一定的抑制效果,对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的体外杀菌速率呈现质量浓度依赖性。 相似文献
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植物凝集素的部分生物学作用分析 总被引：6，自引：2，他引：6
通过血凝反应、凝集效价测定以及凝集素对淋巴细胞的凝集作用,探讨部分植物凝集素凝集作用及活性强弱.结果表明:其中RCA、PHA、PSL、VFL对血红细胞及淋巴细胞均有凝集作用,且凝集活性强弱顺序依此为RCA>PHA>VFL>PSL.6种凝集素中RCA与正常人血红细胞主要唾液酸糖蛋白的作用最强 ,而SBA和PNA与正常人血红细胞主要唾液酸糖蛋白可能无相互作用.小鼠胸腺和脾脏淋巴细胞有和RCA、PHA、PSL、VFL作用的对应受体,而无SBA受体和PNA受体,因此,RCA、PHA、PS L、VFL对淋巴细胞均产生凝集作用. 相似文献
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为建立禽腺病毒4型的禽源细胞感染模型,并考察细胞培养毒株对动物的致病性,将实验室2014-2017年间分离的5株血清4型禽腺病毒接种鸡肝癌细胞(leghorn male hepatocellular cells,LMH)并盲传,选取各病毒的LMH细胞培养物,按一定剂量经腿部肌肉注射接种4周龄SPF鸡;记录试验动物的发病情况,剖检采集发病或死亡鸡的脏器并制作病理切片,观察并分析病毒细胞培养物感染SPF鸡的组织病理变化。结果发现:5株血清4型禽腺病毒在LMH细胞上盲传至第4代时开始出现I群禽腺病毒所致的特异性细胞病变,提取培养物中病毒核酸并进行PCR鉴定,均能扩增出大小约564bp的特异性扩增片段,表明病毒能在LMH细胞上稳定增殖。选取各病毒第10代细胞培养物进行SPF鸡回归试验,发现细胞培养上清接种4周龄SPF鸡后第3天开始,有部分鸡开始精神沉郁,食欲消退、卧地不起瘫痪并迅速死亡,病理剖检及病理组织切片结果显示HB-1、HB-2、HB-3和SD-1毒株保持对4周龄SPF鸡的致病性,病死鸡中能观察到典型的组织病理学变化,而对照组不出现任何临床症状及病理变化。以上结果表明,LMH细胞可用于禽腺病毒增殖传代,是开展禽腺病毒分子致病机制研究的理想细胞模型。 相似文献
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泰山赤鳞鱼肌肉中凝集素的研究(英文) 总被引：1，自引：0，他引：1
[目的]研究泰山赤鳞鱼肌肉中的凝集素,旨在为赤鳞鱼对环境的适应机制和免疫反应提供科学依据,从而有利于对泰山赤鳞鱼的保护与繁殖。[方法]以泰山赤鳞鱼为试验材料,运用双醛固定的血细胞凝集试验证实在泰山赤鳞鱼肌肉提取液中的存在凝集素并对其部分理化性质进行研究。[结果]赤鳞鱼肌肉提取液凝集素对6种动物血细胞都有凝集作用,其中对兔血红细胞的凝血活性效价最高;该凝集素属于巯基依赖型凝集素,其最适pH为4～8,最适温度是60℃;糖抑制试验显示只有蔗糖对其凝集有抑制作用,说明蔗糖在该凝集素的识别和凝集过程起重要作用。[结论]推测在不同种类的水生生物中存在的凝集素对热敏感性及发生凝集活性的适宜pH范围是相似的。 相似文献
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为分析不同包装材料对草菇保鲜效果的影响,分别采用普通塑料袋、纳米保鲜袋、微孔保鲜袋、物理活性保鲜袋4种包装袋进行处理,在温度(15±1)℃、贮藏环境相对湿度约85%的恒温柜内进行贮藏。以失重率、感官品质、硬度、维生素C含量等为考察指标,探讨不同包装材料对草菇贮藏过程中保鲜效果的影响。结果表明,采用微孔保鲜袋有效降低了草菇贮藏期间的失重率,4 d后失重率仅2.86%,新鲜度0.56,硬度0.64 kg,可溶性固形物及V_C含量均高于其他包装袋,能够维持较高的营养价值,提高贮藏品质,延长贮藏时间,其保鲜效果最佳。 相似文献
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用5种不同剂量的三氯杀螨醇(d icofo l,DCF)分别对48只中华蟾蜍(B uf o g arg arizans)成体进行体腔注射法染毒1~4次,观察并统计中华蟾蜍成体外周血红细胞产生微核、核异常及细胞异常的细胞数。结果表明,注射DCF后所有剂量组均能引起中华蟾蜍红细胞微核细胞率显著升高;除5,10 m g/kg剂量组在第1次注射后较对照组低外,其他注射剂量和次数均引起核异常细胞率升高,DCF对细胞膜与细胞质的影响小于其对细胞核的影响,在4次注射中以第2次注射后对红细胞的毒性效应最大。说明DCF是一种强诱变剂,对中华蟾蜍成体外周血红细胞具有较强的遗传毒性。 相似文献
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目的从鹿血红细胞分离铜锌超氧化物歧化酶(Cu，Zn-SOD)，并对其部分性质进行研究。方法用氯仿-乙醇除杂蛋白、丙酮沉淀、热变性、DEAE-32柱色谱等方法，对鹿血红细胞Cu，Zn-SOD进行分离纯化。结果得Cu，Zn-SOD干粉2．2mg；比活13707．27u／mg蛋白；活力回收64．81％；纯化倍数为169．73。理化性质分析表明：该酶的最大紫外吸收波长为265nm，相对分子量约为32000D。相对亚基分子量约为17000D；pH在5～9范围内稳定性很好，在40～60℃内保温30min酶活基本不变，2mmol／LSDS对此酶没有明显的抑制，该酶对H2O2和KCN敏感。结论鹿血红细胞含有丰富的Cu，Zn-SOD。 相似文献