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相似文献
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1.
从流产奶牛胎儿组织中分离到1株革兰氏阴性短杆菌,采用细菌分离纯化、生化试验、16S rRNA和16S~23S rRNA测序、药敏试验和小鼠致死性试验对其进行了鉴定。结果显示,该分离菌与GenBank中肺炎克雷伯氏菌16S rRNA和16S~23S rRNA基因序列一致性分别高达99%和96%,16S~23S rRNA基因被扩增出3条不同长度条带;该菌生化特性均符合肺炎克雷伯氏菌的生化反应特性;对头孢曲松、阿米卡星、多粘菌素等敏感,对多西环素、四环素、卡拉霉素等中度敏感,对青霉素、红霉素、米诺环素等耐药;对小鼠有很强的致病性。以上结果表明,该分离细菌为肺炎克雷伯氏菌。  相似文献   

2.
2018年5月份,青岛地区某规模化蛋鸡场蛋鸡发生产蛋量下降、死淘率增加的情况,鸡群主要出现消化道症状。为了确诊该病,笔者结合临床发病情况、病理剖检及触片镜检、细菌分离培养、16S rRNA测序、病毒检测等实验室诊断方法对该病进行诊断。结果表明:分离菌染色镜检可见大量革兰氏阴性杆菌、成链分布的革兰氏阳性大杆菌、革兰氏阳性球菌;对16S rRNA PCR扩增产物测序结果进行BLAST比对分析,确诊感染细菌分别是大肠杆菌、粪肠球菌、产气荚膜梭菌。病料中禽流感病毒、新城疫病毒、禽腺病毒均为阴性。通过调整鸡群的肠道菌群、改善饲养管理等措施,病情得到控制。  相似文献   

3.
为了确诊天津市某规模化猪场送检病猪是否为产气肠杆菌感染,试验采集濒死仔猪十二指肠内容物,对其进行细菌分离培养、革兰氏染色镜检、生化试验、药敏试验,并特异性扩增分离所得菌株16S rRNA基因片段,测序后与GenBank进行BLAST比对。结果表明:该菌株为革兰氏阴性短杆菌,生化反应与肠杆菌科的产气肠杆菌属最相似,对头孢类抗生素敏感而对部分氨基糖苷类和四环素类抗生素耐药,16S rRNA基因片段测序结果与GenBank中产气肠杆菌相似性达99.9%。说明该分离菌株为产气肠杆菌。  相似文献   

4.
从16S rRNA甲基化酶的发现、作用机制、基因环境、分布和起源等方面介绍了16S rRNA甲基化酶介导的氨基糖苷类耐药机制。阐明16S rRNA甲基化酶是在革兰氏阴性杆菌中新出现的介导对庆大霉素等氨基糖苷类高度耐药的酶;16S rRNA甲基化酶基因位于质粒和转座子上,具有易于传播和扩散的特点,成为临床抗感染的重要问题。  相似文献   

5.
试验收集2013年6月至2014年2月广西南宁、桂林、柳州、玉林、贵港、钦州等6个市送检的疑似猪丹毒发病的材料,用鲜血琼脂平板对病料进行细菌分离,37℃恒温箱培养24~48 h,观察分离细菌的菌落形态,并进行革兰氏染色观察,初步确定其为革兰氏阳性的细小杆菌。为进一步确定分离出的是否为猪丹毒杆菌,试验进一步纯化细菌,提取细菌DNA用16S rRNA随机引物进行扩增,将扩增出来的目的片段连接到p MD18-T载体上,进行克隆、酶切鉴定及序列测定;最终将测序获得16S rRNA序列在NCBI上进行BLAST,结果表明试验最终分离出5株猪丹毒杆菌,为进一步确定分离出来猪丹毒杆菌的生物学特性,试验做了进一步深入研究:药物敏感性试验、小白鼠攻毒试验、耐药基因的检测、免疫攻毒保护性试验。  相似文献   

6.
氨基糖苷类药物高水平耐药16S rRNA甲基化酶的研究进展   总被引:3,自引:1,他引:2  
16S rRNA甲基化酶的出现可直接导致革兰氏阴性菌对氨基糖苷类药物高度耐药,已成为临床治疗中面临的重大难题。作者简要概述了细菌对氨基糖苷类药物高水平耐药的16S rRNA甲基化酶的发现过程、作用机制、医学和兽医临床分布、遗传背景及扩散机制,以期引起对该类药物耐药机制的关注。  相似文献   

7.
为确定湖北省恩施自治州某鹿场致患病鹿蹄腐烂的病原菌,本研究于患病梅花鹿的前蹄病健结合处采集病料并对其进行细菌分离培养,最终分离到一株厌氧菌。对该细菌进行了形态观察、生化试验、16S rRNA基因序列测定、细菌生化鉴定仪鉴定、药物敏感性试验以及小鼠致病力试验等。结果显示该细菌在显微镜下呈革兰氏阴性、丝状、长短不一的杆菌。16S rRNA基因序列测定结果显示该分离菌株与多株坏死梭杆菌参考株的同源性均为99%,将其命名为HNFnf;经Vitek细菌鉴定仪鉴定该细菌为坏死梭杆菌;药敏试验结果显示,该菌对青霉素、头孢类等中度敏感,对阿米卡星、链霉素、庆大霉素耐药。本研究为临床治疗由坏死梭杆菌引起的反刍动物"腐蹄病"与"肝脓肿"提供参考依据。  相似文献   

8.
为准确诊断贵州某蜂场发生的细菌性中蜂疾病,并提供防制方案,本试验进行了细菌分离纯化、形态学观察、生化试验,应用细菌16S rRNA基因通用引物进行基因扩增测序,测序结果在NCBI上进行比对分析,选取同源性较高的5个属的30株细菌的16S rRNA序列进行同源性分析并构建系统进化树,并对该分离菌进行动物回归试验和药敏试验。结果显示,分离菌为革兰氏阴性短杆菌,生化试验初步鉴定为蜂房哈夫尼菌;16S rRNA序列与哈夫尼杆菌属同源性最高,在97.0%~99.6%之间;遗传进化树表明,分离菌在哈夫尼菌菌属这一分支;动物回归试验显示,分离菌对中蜂有一定致病性,表明该蜂场受到蜂房哈夫尼菌感染,造成了蜜蜂的副伤寒;药敏试验结果表明,分离菌对青霉素、红霉素、克林霉素等耐药,对阿米卡星、复方新诺明、氧氟沙星等敏感。本试验结果为中蜂感染蜂房哈夫尼菌病的研究提供了一定参考,并能对蜂场提供合理用药意见。  相似文献   

9.
为探究南疆阿克苏地区养猪产业是否存在由巴氏杆菌引起的呼吸系统疾病,试验从该地区阿克苏宏盛牧业养殖场中以高热、腹泻、呼吸困难和皮肤发绀为临床症状的患病仔猪身上采集样品,进行细菌分离培养,通过菌落形态观察、16S rRNA基因测序对分离的菌株进行鉴定。序列结果显示,获得1株巴氏杆菌。  相似文献   

10.
为鉴定临床疑似鸭多杀性巴氏杆菌感染肉鸭的病原菌,本试验通过细菌分离培养、菌体形态观察、细菌生化鉴定、16S rRNA基因测序分析、细菌种特异性鉴定、荚膜分型鉴定和动物回归试验进行鉴定,并通过药敏试验和耐药基因检测进行耐药性分析。结果显示,从患病鸭肝脏组织分离到的细菌在鲜血琼脂培养基中呈现表面光滑凸起、灰白色菌落,为革兰氏阴性短小杆菌,瑞氏染色呈两极浓染;生化鉴定结果显示,分离菌能发酵葡萄糖、蔗糖和甘露醇,硫化氢、氧化酶和吲哚等试验阳性;16S rRNA基因序列系统进化树分析显示,该分离菌与多杀性巴氏杆菌聚为一支,同源性 > 99%;细菌种特异性鉴定结果与多杀性巴氏杆菌相符;荚膜分型鉴定结果仅扩增到约为1 050 bp的目的基因片段,与荚膜血清A型相符;动物回归试验显示,该分离菌有较强的致病性;药敏试验结果显示,该分离菌对羧苄西林、氨苄西林、复方新诺明和四环素等12种药物耐药;经耐药基因PCR检测显示,该分离菌携带Sul1、Sul3、tetX)和Intl1 4种耐药基因,与药敏表型相符。本试验成功分离到1株鸭源荚膜血清A型多杀性巴氏杆菌,为鸭多杀性巴氏杆菌病的防治提供参考依据。  相似文献   

11.
1株猪源病原菌的分离鉴定及部分生物学特性研究   总被引:4,自引:0,他引:4  
通过对一起病死猪的实验室诊断 ,从病猪心血、脏器中分离到了 1株对小白鼠和家兔都具有较强致病性的细菌。经显微镜观察、培养特性观察、生化特征鉴定 ,此菌为多杀性巴氏杆菌 ,但此菌与其他多杀性巴氏杆菌不同的是它能利用水杨素、鼠李糖、阿拉伯糖。 O抗原琼脂扩散试验鉴定此菌菌体抗原为 O1型 ;Carter间接血凝试验法检验荚膜抗原类型此菌为 A型。体外滤纸扩散法检验此巴氏杆菌对药物敏感性 ,试验表明该菌耐青霉素、土霉素、四环素、磺胺嘧啶、痢特灵、阿米卡星、头孢唑啉 ;但对庆大霉素、卡那霉素、盐酸环丙沙星、氟哌酸敏感 ,对氨苄西林 ,链霉素中度敏感。自制灭活苗进行免疫原性实验检测 ,本分离菌疫苗对小白鼠和家兔保护率约为 70 % ,而市售巴氏杆菌疫苗对小白鼠和家兔保护率约为 3 0 %~ 40 %。  相似文献   

12.
目的建立可以同时检测猪胸膜肺炎放线杆菌、多杀性巴氏杆菌和副猪嗜血杆菌的快速而可靠的PCR检测方法。方法和结果根据胸膜肺炎放线杆菌的Apx-VIA基因序列、多杀性巴氏杆菌和副猪嗜血杆菌的16SrRNA基因序列设计5条引物。猪胸膜肺炎放线杆菌、多杀性巴氏杆菌和副猪嗜血杆菌模板的PCR扩增产物大小分别为342bp,485bp和1258bp。复合PCR对1~12型猪胸膜肺炎放线杆菌标准株,6株多杀性巴氏杆菌标准株,1~15型副猪嗜血杆菌以及25株经生化鉴定确认为上述三种细菌的分离株的基因组DNA作为模板进行检测,均获得预期大小的扩增产物。以猪放线杆菌、吲哚放线杆菌等14种常见细菌作为阴性对照进行PCR检测,结果仅有支气管败血波氏杆菌产生了可以和上述三个特异性条带明显区分的PCR产物。复合PCR针对胸膜肺炎放线杆菌、多杀性巴氏杆菌和副猪嗜血杆菌的敏感性分别为14pg、34pg和37pg。结论本研究建立的复合PCR特异性好,敏感性高,可以用于猪胸膜肺炎放线杆菌、多杀性巴氏杆菌和副猪嗜血杆菌的快速检测。  相似文献   

13.
Four outbreaks of hemorrhagic septicemia caused by Pasteurella multocida multocida occurred in a population of 1,800 fallow deer (Dama dama) during 1992-1996. A total of 340 fallow deer were submitted for postmortem examination. Pasteurellosis was diagnosed in 273 of 312 deer suspected of having septicemia. Pasteurella multocida was isolated from 257 animals, and the diagnosis was based on typical pathologic changes alone in the other 16 animals. Pasteurella multocida was isolated in pure culture from 219 of 248 samples of cerebrospinal fluid. Eighteen animals were observed moribund with severe depression, foamy nasal discharge, and respiratory distress, and 257 were found dead. Major clinical signs and pathologic changes included extensive swelling of the head and the neck and peracute or acute septic pneumonia, petechial and ecchymotic hemorrhages on serous membranes, and severely hemorrhagic adrenal glands and abomasum. Rhinitis and necrotic pharyngeal mucosae were common. Histologically, the most advanced lesions were in the nasal mucosa and pharynx. The swelling of the head and the neck arose from a diffuse cellulitis in the subcutaneous and intermuscular tissues. The earliest lesions in the lungs included large numbers of bacteria in the pulmonary capillaries, but various degrees of fibrinous exudation to the alveoli and infiltration with heterophils usually were observed.  相似文献   

14.
鹅巴氏杆菌病病原分离鉴定及中西药联用抑菌试验   总被引:1,自引:0,他引:1  
应用常规分离鉴定技术,对湛江市某养鹅场的病鹅进行病原分离与鉴定,采用水提法制备中药药液,通过试管二倍稀释法测定各中药药液和抗菌药对病原菌的最小抑菌浓度(MIC)及最小杀菌浓度(MBC),同时测定中药与西药联用对病原菌的体外抑菌效果。结果表明,分离的病原菌符合巴氏杆菌的生化特性;中药与西药联用抑菌和杀菌能力均大于或等于单药,恩诺沙星与五倍子联用,恩诺沙星用量为单药的1/4、五倍子用量为单药的1/8即可抑制巴氏杆菌;酒石酸泰乐菌素与夏枯草联用,酒石酸泰乐菌素用量为单药的1/16、夏枯草用量为单药的1/4即可抑菌;酒石酸泰乐菌素与五倍子联合,酒石酸泰乐菌素用量为单药的1/4即能杀菌。  相似文献   

15.
Pasteurella are an important cause of fatal infections in free-ranging bats, but the genetic diversity of bat-derived strains is unclear. In the current study, 81 Pasteurella strains associated with pneumonia, severe organ necroses and systemic infection in free-ranging European vespertilionid bats were characterized by biochemical and molecular typing methods. Genetic relationships and subspecies status of Pasteurella multocida strains were determined by comparative 16S rDNA and rpoB gene sequence analysis. In addition, 30 representatives of the bat-derived P. multocida strains were selected based on phenotypic and genotypic tests to be compared by pulsed-field gel electrophoresis using SmaI. Most (85%) of the Pasteurella strains obtained from free-ranging bats in this study represented P. multocida ssp. septica. P. multocida ssp. multocida and Pasteurella species B were also identified in a small number of isolates. PFGE analysis correlated well with the sequencing results and revealed a high genetic diversity among bat-derived strains of P. multocida ssp. septica. Strains sharing identical or closely related SmaI fragment patterns were cultured from bats of different species, geographic origins, and years of isolation. The presence of numerous different P. multocida strains allows the assumption that Pasteurella infections in vespertilionid bats are not solely based on intra- but also on inter-species transmission. And indeed, our results present evidence of P. multocida infections in bats following cat predation.  相似文献   

16.
2018年9月广西某羊场部分山羊发生流涕、咳嗽、呼吸困难和体温升高等临床症状的疾病,为确诊发病原因并提供治疗方案,采用病原分离培养、PCR扩增鉴定的方法进行诊断,并对分离菌进行生化鉴定、致病性试验和药敏试验。结果显示,病料在血平板有圆形的小菌落生长,革兰阴性小球短杆菌,而在PPLO培养基上不生长;病料的PCR扩增结果显示绵羊肺炎支原体和多杀性巴氏杆菌均为阳性;所分离到的病原菌经生化鉴定,该菌符合多杀性巴氏杆菌的特性;用多杀性巴氏杆菌种属和D型多杀性巴氏杆菌特异性引物扩增为阳性;致病性试验显示该菌对小鼠有很强的致病性;药敏试验显示该菌对头孢他啶、头孢噻肟、氧氟沙星高度敏感,对复方新诺明、强力霉素、红霉素、青霉素为耐药。结果表明该病是由绵羊肺炎支原体和D型多杀性巴氏杆菌混合感染引起。  相似文献   

17.
湖北省某鸡场疑似巴氏杆菌(Pasteurella)感染,从送检病鸡的肺脏和肝脏中分离到1株细菌,通过菌落形态、培养特性、生化试验、16S rRNA序列比对鉴定为禽多杀性巴氏杆菌,并命名为Pm-HB株。动物回归试验表明,10 CFU细菌即可100%致死30日龄SPF鸡,可确诊为巴氏杆菌病。  相似文献   

18.
为建立一种快速准确检测兔多杀性巴氏杆菌(P.multocida)的PCR方法,本研究以P.multocida的高度保守的16S rRNA为靶基因,参考已公布的P.multocida的16S rRNA基因设计1对特异性引物,优化PCR反应条件,建立了P.multocida PCR快速检测方法。该PCR方法的敏感性达到60 cfu/mL,采用该PCR方法扩增P.multocida标准株和分离株均能扩增出643 bp的目的片段,扩增兔大肠杆菌、支气管败血波氏杆菌结果为阴性,证明本实验所建立的P.multocida PCR检测方法快速、敏感、特异、可靠,可用于P.multocida的快速鉴定与诊断。同时用建立的PCR方法对临床疑似病兔的脏器分离菌进行扩增,可扩增出目的条带,与细菌的分离结果相一致。  相似文献   

19.
为研制便于检测猪瘟猪丹毒猪肺疫三联活疫苗抗原含量的选择性显色计数琼脂(以下简称猪三联显色培养基)以代替传统的马丁琼脂,对比研究了干粉马丁琼脂、新鲜马丁琼脂和猪三联显色培养基的理化特性和生长特性,并通过活菌计数方法平行对比了猪丹毒单价苗、猪肺疫单价苗和猪瘟猪丹毒猪肺疫三联活疫苗的抗原含量.结果显示,猪三联显色培养基在活菌...  相似文献   

20.
为明确鸭源多杀性巴氏杆菌对磺胺类药物的耐药性及耐药基因的分布特征,试验采用琼脂二倍稀释法对分离自福建、广东和江西等地的89株鸭源多杀性巴氏杆菌进行甲氧苄啶/磺胺甲噁唑的耐受性检测,用PCR法检测各耐药菌株的磺胺类耐药基因(sul1、sul2和sul3),并利用多位点序列分型(MLST)分析耐药菌株间的亲缘关系。结果显示,33株鸭源多杀性巴氏杆菌对甲氧苄啶/磺胺甲噁唑耐受,耐药率为37.1%(33/89);在耐药菌株中,sul1、sul2和sul3基因检出率分别为100%(33/33)、97.0%(32/33)和21.2%(7/33),其中sul1和sul2基因同时检出率为97.0%(32/33),sul1、sul2和sul3基因同时检出率为21.2%(7/33);所有耐药菌株均属于ST129型。以上结果表明,鸭源多杀性巴氏杆菌对磺胺类药物具有一定的耐药性,其中的耐药菌株都属于同一序列型ST129,均携带有sul1耐药基因,且绝大多数耐药菌株同时携带sul1与sul2两种耐药基因,提示在福建、广东和江西等地需慎用磺胺类药物来防治该细菌的感染。  相似文献   

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