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101.
102.
主动免疫血管活性肠肽对泰和鸡繁殖性能的影响   总被引:7,自引:1,他引:7  
56周龄的母泰和鸡分为3组,第1组(n=35)用血管活性肠肽(VIP)类似物与牛血清白蛋白(BSA)的偶联物进行免疫,第2组(n=33)用矿油佐剂与水的乳化物进行注射,第3组(n=36)作空白对照。试验结果显示:与对照组相比,免疫组日抱窝率明显减少,产蛋高峰后的产蛋率明显高于对照组,且各组间蛋的受精率和孵化率无明显差异。第1、2组血浆VIP类似物抗体及催乳素(PRL)水平的酶联免疫吸附试验(ELISA)检测结果显示:第1组二免后VIP类似物抗体水平最高,P/N达493±116,而第2组的检测结果为阴性;第1组免疫后的血浆PRL水平明显低于同期的第2组。以上结果表明,在泰和鸡中主动免疫VIP可以降低血浆的PRL水平,减少抱窝率,提高产蛋率。  相似文献   
103.
采用分光光度法测呈了25℃和10℃驯养的草鱼、鲮鱼、二代混精鲮鱼及对照组混精鲮鱼的肌肉和肝脏组织中乳酸脱氨酶(LDH)、6-磷酸葡糖脱氨酶(G6PDH)和异柠檬酸脱氢酶(IDH)活性的变化;采用电泳法对LDH、酯酶(EST)和超氧化物歧化酶(SOD)的同工酶酶谱进行了比较研究。实验结果表明,草鱼肝脏组织在低温下发生了代谢途径的转换和重组,而鲮鱼的肌肉组织和肝脏组织都只采取了增加酶浓度的方式。鲮鱼代谢转换机制的不完善,可能是鲮鱼不耐低温的重要原因之一。三组鲮鱼肝脏组织的酯酶(EST)同工酶谱在不同适应温度下的变化表明,鲮鱼肝脏组织的酯代谢在低温下发生了变化。最后,作者对混精授精法提高鲮鱼耐寒能力的作用进行了评价。  相似文献   
104.
根据鸡缩胆囊素(choleystokinin,cck)-33基因的碱基序列及大肠杆菌高频密码子,设计了大肠杆菌表达系统偏爱的cck基因序列.将cck-33基因克隆至pRSETA质粒上,利用载体上的同尾酶构建cck基因四串联体并在大肠杆菌EcoliBL21中成功表达.将所表达的融合蛋白进行纯化后,以纯化的蛋白为免疫原制备油佐剂疫苗主动免疫胡须肉鸡.结果表明,CCK蛋白主动免疫肉鸡后,抗血清水平显著升高,P/N值远远大于2.  相似文献   
105.
过氧化氢酶同工酶KMnO4染色法的初步研究   总被引:8,自引:0,他引:8  
将电泳凝胶在H2 O2 溶液中浸泡一段时间。在凝胶上有过氧化氢酶的地方 ,由于H2 O2 被该酶催化生成了H2 O和O2 ,也就无H2 O2 与KMnO4反应 ;而在无过氧化氢酶的地方 ,H2 O2 能在中性条件下与KMnO4反应生成棕色的MnO2 沉淀。利用KMnO4可在凝胶的棕色背景上观察到透明的过氧化氢酶同工酶带  相似文献   
106.
本研究采用昆虫杆状病毒表达系统制备了H1N1亚型猪流感病毒的HA蛋白、类病毒脂质体、病毒样颗粒,分别作为抗原进行包被,采用间接酶联免疫吸附实验(ELISA)检测H1N1猪流感病毒抗体.特异性实验结果表明,单独表达的HA蛋白和类病毒脂质体特异性良好,但是病毒样颗粒不能区分不同亚型的流感病毒;敏感性实验结果表明,类病毒脂质体作为抗原的敏感性最好;重复性实验结果表明,三种抗原的重复性好,ELISA实验的批间和批内变异系数均小于10%;稳定性实验结果表明,在4℃可至少稳定保存1年.综上所述,类病毒脂质体有较高的免疫反应性,与灭活全病毒相比有更好的安全性,在抗体水平测定方面有较好的应用前景.  相似文献   
107.
用RT—PCR方法扩增了新城疫病毒(NDV)的完整HN基因序列;设计了1对带有EcoR Ⅰ限制位点的引物,用PCR扩增出了HN基因片段。将该片段克隆至pSOC质粒SOC基因3’端,成功构建了重组质粒pSOC—HN。用该重组质粒转化E.coli BL-21(DE3)感受态细胞,以终浓度1mmol/mL的IPTG诱导表达。在SDS-PAGE凝胶上可检测到分子质量约67ku的特异条带,蛋白质印迹法证实,表达产物与NDV抗血清具有良好的反应性。  相似文献   
108.
将猪源O型口蹄疫病毒(Foot-and-mouth disease virus, FMDV)VP1基因克隆到原核表达载体pMBX上,成功地构建重组表达质粒pMBX-VP1。将其转化大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)感受态细胞中,经SDS-PAGE分析,融合蛋白分子量约为58 kD,表达产物占菌体总蛋白的35.5%。 经蛋白可溶性分析,目的蛋白在裂解沉淀中占6.8%,在裂解上清中占31.2%,融合蛋白绝大部分是以可溶形式表达的。经Western blot证实,可溶表达的融合蛋白与FMDV阳性血清具有良好的免疫反应性。将可溶表达的融合蛋白用50%Ni-NTA树脂纯化,用融合蛋白作包被抗原,通过ELISA方法,能特异性地检测出口蹄疫阳性血清。  相似文献   
109.
新城疫病毒广东分离株HN基因的克隆与序列分析   总被引:3,自引:0,他引:3  
用RT-PCR方法从6个新城疫病毒(NDV)广东分离株中扩增HN基因cDNA片段。并将其克隆至pGEM-T Easy载体进行核苷酸序列测定。结果表明,6个NDV分离株HN基因片段长度均为1704bp,编码568个氨基酸;彼此间核苷酸和氨基酸同源性分别为96.0%~99.8%和98.6%~100%,与其他基因Ⅶ型毒株的氨基酸序列同源性为96.8%~98.4%;但与其他基因型毒株如D26、Ulster/67、B1、LaSota以及GB Texas的氨基酸同源性较低,为88.2%~91.0%。  相似文献   
110.
通过PCR技术获得口蹄疫病毒非结构蛋白3B基因,将其克隆至质粒pET-32a(+)和高效可溶性表达质粒pEM中,经PCR筛选,获得阳性重组子pET-3B和pEM-3B,将它们转化大肠杆菌BL21中进行诱导表达,SDS-PAGE及Western-blot检测结果证明,表达的3B融合蛋白能与FMDV感染动物血清发生特异性反应。蛋白可溶性分析表明,EM-3B融合蛋白绝大部分以可溶形式表达。以此可溶性融合蛋白EM-3B为抗原建立了可区分FMD免疫动物和感染动物的EM-3B-DIVA-ELISA方法,经检测,其特异性为95.0%,敏感性为97.5%,与2个国产试剂盒的符合率分别为96.25%和98.75%。  相似文献   
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