新疆卡拉库尔羊Fas基因的克隆及核苷酸序列分析     

潘辉  贺艳艳  李莲瑞 《塔里木大学学报》2011,23(2):14-18

为了分析新疆卡拉库尔羊的Fas基因,根据普通绵羊的碱基序列和相关文献设计引物,用RT-PCR扩增并测定了卡拉库尔羊Fas基因的cDNA序列。结果表明,Fas基因cDNA序列包含了一个750 bp的开放阅读框,通过GenBank中的Blastn序列比较分析,卡拉库尔羊的Fas基因与普通绵羊的同源性高达99.69%。这为将来制备卡拉库尔羊Fas基因探针及卡拉库尔羊分子免疫学的发展提供了理论依据。  相似文献   

用血清酸滴定法对3个品种绵羊进行早期妊娠诊断的研究     

郑毛亮  李广  陶大勇  吐尔逊·库尔班  李莲瑞 《安徽农业科学》2011,(8):4708-4709

[目的]为了建立一种快速简易的绵羊早期妊娠诊断方法,提高母羊的繁殖效率,降低繁殖成本。[方法]选择1 317只母羊,为新疆地方品种多浪羊、策勒羊和卡拉库尔羊。于人工授精配种后16～30 d,采用血清酸滴定法进行了早期妊娠诊断。[结果]在试验绵羊中,共检出妊娠母羊1 128只,未妊娠羊189只。与实际妊娠结果相比,妊娠符合率为89.88%（1 013/1 128）,未孕符合率为96.83%（183/189）,总符合率为90.81%（1 196/1 317）。经卡方检验,这些指标在3个品种母羊或2个品种母羊间差异均不显著。[结论]血清酸滴定法诊断时间早、方法简便、结果准确,可以用于绵羊的早孕诊断,极具实用性和推广价值。  相似文献   

品质异常奶粉中芽孢杆菌的分离和鉴定     

孙鹏亮  潘姣姣  陈荟旭  张秋林  魏鑫豪  李莲瑞 《现代畜牧兽医》2021,(1)

南疆某乳品企业生产的奶粉偶尔会出现异味、凝固、微生物检验超标等问题。为研究品质异常奶粉是否存在芽孢杆菌污染,试验将品质异常奶粉通过水浴80℃处理20 min后,接种于锰盐培养基、LB固体培养基、嗜冷培养基,分别于高温(55℃)、中温(37℃)和低温(4℃)3种培养方式进行培养。分离培养后,通过革兰染色和芽孢染色后,对镜检有芽孢的单菌落进行菌体扩增、DNA提取、16S rDNA序列PCR扩增、克隆、鉴定后送测序。序列分析结果表明:从品质异常奶粉中分离鉴定出3株短小芽孢杆菌和7株地衣芽孢杆菌。对地衣芽孢杆菌进行进化树的构建结果显示,该菌与登录号为KU986668、CP025226、MK063874、MN493780、MG97702的地衣芽孢杆菌处于同一分支,且同源性为100%。对短小芽孢杆菌进行进化树的构建结果显示,该菌株与登录号为FJ641024、MT367713、FJ641028、KU662344、DQ275671、KR780437、KF463141的短小芽孢杆菌处于同一分支,且同源性为100%。该检测结果为企业建立科学、准确、高效的微生物污染防控体系,从源头分析和控制微生物的污染途径,提高产品质量奠定基础。  相似文献   

棉酚对多浪羊淋巴细胞凋亡及其对核酸降解的研究     

刘书东  左文斌  贺艳艳  潘辉  徐丽君  顾海洋  杨威华  李莲瑞 《云南农业大学学报(自然科学版)》2012,27(2):299-302

 主要通过使用RPMI 1640培养基培养淋巴细胞、瑞氏—吉姆萨染色、DNA和RNA电泳等方法来研究棉酚对多浪羊淋巴细胞的凋亡效应和对淋巴细胞核酸影响。研究结果表明,经瑞氏—吉姆萨染色4h淋巴细胞出现凋亡小体;DNA和RNA通过琼脂糖凝胶电泳检测在4h分别出现梯状条带和18S降解。可见,当细胞培养液中棉酚浓度为1.35μmol/L,培养淋巴细胞4h后,可抑制多浪羊淋巴细胞的增殖,并且促进凋亡及其核酸的降解。  相似文献   

新疆卡拉库尔羊Fas基因重组蛋白包涵体的纯化及抗原性分析     

潘伊微  贾山岭  潘辉  贺艳艳  李莲瑞 《塔里木大学学报》2012,24(4):48-52

目的:为了探明Fas基因重组蛋白是否保留天然蛋白的抗原性,为下一步大量制备基础诊断、预防、控制、治疗试剂奠定基础.本实验将Fas基因与原核表达载体pET-28a成功构建了重组融合表达质粒pET-28a-Fas然后转化至E.coliBL21(DE3)感受态当中,找到最佳表达条件,初步纯化了重组融合蛋白,通过对家兔免疫后的血清进行琼扩实验与蛋白质印迹实验分析其抗原性.结果表明,纯化后的包涵体有明显的条带,经测定融合蛋白分子量为39.7 KDa.结论:说明纯化效果好,优化融合蛋白表达量占菌体总蛋白的15.6％,并且证明Fas具有免疫原性和反应原性.  相似文献   

和田黑鸡与普通商品鸡淋巴细胞转化形态差异分析     

王娟娟  尹云云  潘伊薇  刘书东  陈根元  李莲瑞 《畜牧与饲料科学》2012,33(9):1-5

根据普通商品鸡与未注射疫苗的和田黑鸡淋巴细胞转化率的对比,分析和田黑鸡机体与普通商品鸡免疫力的强弱。用密度梯度离心法分离出鸡外周血淋巴细胞,于37℃、5%的CO2培养箱中体外培养,如果其受到某种诱导剂,如有丝分裂原植物凝集素(PHA)、刀豆蛋白A(ConA)的诱导后,就会表现为细胞体积增大、代谢旺盛、蛋白质和核酸合成增加,即向淋巴母细胞转化和增殖,淋巴细胞转化率的高低则可以反映机体的免疫水平。试验发现,随着时间的递增,当用植物凝集素(PHA)、刀豆蛋白A(ConA)诱导和田黑鸡和普通商品鸡时转化率也呈现上升趋势,普通商品鸡淋巴细胞的转化率要大于和田黑鸡,且在72h后普通商品鸡与和田黑鸡的淋巴细胞LPS诱导后转化率都呈现递减趋势。该试验为动物疫苗免疫效果检测和细胞因子制剂的研究奠定了基础。  相似文献   

嗜水气单胞菌Aer毒素的研究进展   总被引：6，自引：0，他引：6  

李莲瑞  罗红斌  卢强  刘明远 《塔里木大学学报》2004,16(3):46-51

嗜水气单胞菌是革兰氏阴性杆菌，弧菌科气单胞菌属，可引起软体动物、淡水鱼类、两栖类、爬行类、鸟类及哺乳动物等多种动物全身性败血症或局部感染，并常致动物死亡。嗜水气单胞菌对人也有致病性，可引起人的急性胃肠炎、败血症及伤口感染、中耳炎、腹膜炎等。近年来，该病原菌对水产养殖动物的危害尤为严重，已成为养殖甲鱼、鲤鱼、鳗鱼、罗非鱼、河蟹、鲶鱼、牛蛙等的常见病，又因为是  相似文献   

嗜水气单胞菌重组Aer毒素的纯化和抗原性分析     

李莲瑞 卢强刘明远  付宝权孙树民郭恒  崔国祯 《云南农业大学学报(自然科学版)》2005,20(5):710-713,719

对原核表达的重组嗜水气单胞菌Aer毒素进行初步纯化,比较了它与天然Aer毒素的抗原性,为建立检测该毒素的免疫学方法奠定了基础。将原核表达的重组Aer毒素经SDS-PAGE后,切下目的蛋白,利用电洗脱法将蛋白洗脱出来,后经透析、PEG8000浓缩、定量,对獭兔进行免疫,采集血清,提纯IgG,在W estern b lotting试验中可与天然Aer毒素起反应,说明,体外表达的重组Aer毒素保留了天然Aer毒素所具有的抗原性。同时,将嗜水气单胞菌AHCS02菌接种于兔鲜血平板,30℃、培养15 h后,将具有β-溶血的单菌落于LB液体培养基中培养后,用饱和硫酸铵法提取上清液中的天然Aer毒素,用甲醛脱毒后,以同样免疫方法免疫獭兔,免疫结束后,采集血清提取IgG,在W estern b lotting试验中,可以检测到重组Aer毒素。试验说明:原核表达的重组Aer毒素和天然Aer毒素诱导獭兔产生的血清IgG抗体可以互相识别重组Aer毒素和天然Aer毒素,重组Aer毒素和天然Aer毒素有相似的抗原性。  相似文献   

棉酚对多浪羊淋巴细胞凋亡的影响     

刘书东  左文斌  贺艳艳  潘辉  徐丽君  顾海洋  杨威华  李莲瑞 《西南大学学报(自然科学版)》2011,33(12)

通过棉酚对多浪羊淋巴细胞的研究,探索棉酚体积分数对淋巴细胞的影响.主要用细胞培养、瑞氏-吉姆萨染色、DNA电泳等方法观察棉酚对多浪羊淋巴细胞的凋亡效应.结果表明:当细胞培养液中棉酚体积分数为0.071mol/L,培养淋巴细胞8h后,可抑制多浪羊淋巴细胞的增殖,并且促进其凋亡.  相似文献   

鲤鱼外周血白细胞的分离和体外培养   总被引：6，自引：0，他引：6  

丰培金  卢强  李莲瑞  张俊辉 《中国兽医学报》2004,24(4):369-371

通过调整淋巴细胞分离液中泛影葡胺 (Urografin)的用量 ,发现采用比重为 1.0 85的分离液可将鲤鱼外周血中的白细胞有效地分离出来 ,每毫升外周血可分离到的白细胞的数量平均为 1.71× 10 6 个。经优化培养条件 ,分离得到的鲤外周血白细胞体外分别培养 4、12和 2 4 h,成活率分别为 92 .6 %、90 .2 %和 87.6 % ,加入终质量浓度 5 0 m g/ L的刀豆球蛋白 (Con A)同外周血白细胞共同孵育 4 h和 2 4 h,结果白细胞的成活率为 99.1%和 89.6 % ;将 5 0 mg/ L 脂多糖 (L PS)和 5 0 mg/ L 植物血凝素 (PHA)与白细胞共同孵育 4 h和 12 h,白细胞成活率为 98.1%和 97.7%。本试验成功地建立了鲤外周血白细胞的分离技术和鲤白细胞体外短期培养体系  相似文献