全文获取类型
| 收费全文 | 119篇 |
| 免费 | 4篇 |
| 国内免费 | 4篇 |
专业分类
| 林业 | 5篇 |
| 农学 | 5篇 |
| 基础科学 | 14篇 |
| 4篇 | |
| 综合类 | 49篇 |
| 农作物 | 3篇 |
| 水产渔业 | 1篇 |
| 畜牧兽医 | 43篇 |
| 园艺 | 3篇 |
出版年
| 2023年 | 6篇 |
| 2021年 | 4篇 |
| 2020年 | 4篇 |
| 2019年 | 6篇 |
| 2018年 | 14篇 |
| 2017年 | 4篇 |
| 2016年 | 5篇 |
| 2015年 | 11篇 |
| 2014年 | 8篇 |
| 2013年 | 9篇 |
| 2012年 | 5篇 |
| 2011年 | 3篇 |
| 2010年 | 6篇 |
| 2009年 | 8篇 |
| 2008年 | 6篇 |
| 2007年 | 10篇 |
| 2006年 | 5篇 |
| 2005年 | 3篇 |
| 2004年 | 2篇 |
| 2000年 | 2篇 |
| 1993年 | 1篇 |
| 1992年 | 2篇 |
| 1990年 | 1篇 |
| 1989年 | 1篇 |
| 1986年 | 1篇 |
排序方式： 共有127条查询结果，搜索用时 203 毫秒
71.
桑树幼叶cDNA文库的构建及部分表达序列标签分析 总被引：2，自引：2，他引：0
基于为鉴定和克隆桑树功能基因提供基础信息的目的,采用RNA转录5′末端转换(SMART)法构建了桑树幼叶全长cDNA文库。该文库容量为1.02×106pfu/mL,重组率95%,符合构建基因文库的质量要求。从构建的桑树幼叶cDNA文库中随机挑取48个克隆进行表达序列标签(EST)测序,有效序列为32条,经UniGene数据库归并后为32条,UniGene比率为100%;与NCBI核酸数据库进行比对、查询和注释,在32条序列中有29条序列具有同源性,其中16条为全长序列,完整性比率为55.2%;初步发现具有已知功能基因的ESTs 6个,具有推测功能基因的ESTs 5个,未命名或未知功能基因的ESTs 21个。 相似文献
72.
犬圆环病毒(CanineCV)是一种新发现的圆环病毒。制备针对CaineCV Rep的抗体,为建立CaineCV ELISA检测方法及研究Rep蛋白的功能奠定基础。以CaineCV基因组作为模板,扩增出Rep基因序列。PCR产物克隆至pET-28a原核表达载体上,获得了重组质粒pET(28a)-Rep。将重组质粒转入大肠埃希菌BL21感受态细胞后进行诱导表达,SDS-PAGE分析表明重组Rep蛋白在大肠埃希菌BL21中获得表达。Western blot分析表明,重组蛋白能与Anti-His标签抗体发生特异性反应。该研究构建了pET(28a)-Rep重组原核表达质粒,并在大肠埃希菌中获得表达,为进一步制备Rep的抗体奠定了基础。 相似文献
73.
为建立同时检测PCV3和PCV2的二重PCR方法,分别以PCV3和PCV2基因组的保守区域设计2对特异性引物,片段大小分别为649,295 bp。将反应条件进行优化,构建PCV3和PCV2的二重PCR检测方法。检测结果表明该方法能特异性扩增PCV3和PCV2,且无法扩增其他猪常见病毒;PCV3和PCV2的最低检出限分别为508,412 copies/μL。临床样品检测结果显示,PCV3和PCV2阳性率分别为2.1%(3/145),62.1%(90/145),PCR产物经测序证实为PCV3。本研究建立的二重PCR方法具有速度快、特异性强和灵敏度等优点,可以用于PCV3和PCV2的检测和流行病学调查。 相似文献
74.
猪圆环病毒3型PCR检测方法的建立及其应用 总被引：1，自引：0，他引：1
根据Gen Bank登录的猪圆环病毒3型(porcine circovirus type 3,PCV3)全基因组序列设计并合成了一对特异性引物,经条件优化,建立了检测PCV3的PCR方法,扩增片段大小为932 bp;最低的质粒检测浓度为10 copy/μL;对猪圆环病毒1型、猪圆环病毒2型、猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪伪狂犬病病毒、猪细小病毒的核酸进行扩增,均无PCV3目的条带出现;随机抽取扩增的16份临床病猪样品目的条带进行TA克隆后测序,结果显示均为PCV3特异性目的片段,16株PCV3江苏毒株扩增序列与已报道的PCV3/US/SD2016和PCV3/CN/Hubei-618基因序列同源性分别为98.4%~99.6%、99.0%~99.8%,而16个毒株之间的同源性为98.3%~100%。利用所建立的PCR方法检测了2014~2017年间收集的江苏省临床病猪样品938份、健康猪样品500份,PCV3的阳性检出率分别为6.93%和0.6%;其中,2014年病猪样品中的阳性率为1.92%,后呈逐渐上升的趋势,2017年达到12.67%。本研究表明,建立的PCR方法特异、敏感,可以用于临床PCV3的检测;PCV3在江苏省猪群2014年已有感染,并呈逐年升高的趋势,应予以重视。 相似文献
75.
采集自江苏某猪场临床表现为疑似断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)的猪组织病料,经PCR检测为猪圆环病毒2型(PCV2)阳性,阳性病料经无菌处理后接种PK-15细胞进行PCV2分离并进行测序。采用间接免疫荧光(IFA)和相关基因序列分析软件进行鉴定、分析。用分离的毒株人工感染BALB/c小鼠,观察其对小鼠的致病性。结果显示,成功分离到2株PCV2毒株,分别命名为X46和5123,两毒株基因全长均为1 767 bp,遗传进化和同源性分析显示两毒株分别为PCV2d和PCV2b亚型,分离株P20代毒在PK15细胞上的TCID_(50)分别为10~(5.5)TCID_(50)/0.1 mL和10~(4.5)TCID_(50)/0.1 mL。小鼠感染试验结果显示PCV2对小鼠增重有抑制作用,对肝、脾和肾有较强的侵袭能力。研究结果为深入研究PCV2的致病机理及开发新型疫苗奠定了一定的基础。 相似文献
76.
在文献评述的基础上,进行了236份样本的抽样问卷调查。结果显示,云南省水稻种子生产标准化进程整体处于刚起步和较为落后的人数占调查总人数的24.58%和15%。水稻生产对种子标准化技术的需求十分迫切,98.73%的受访者认为必须加快水稻种子生产标准化的实施进程。分析认为,云南省水稻种子生产标准化进程较为缓慢,水稻产量长期低于全国平均水平,种子机械加工设备数量不足,部分专用设备和装备尚属空白,影响了商品种子质量的进一步提高。提出了云南省水稻种子生产标准化技术推广应用的关键措施和发展对策即建立种子市场监管和推广应用系统、加速水稻种子生产标准化关键技术研究和推动生物多样性保护3个方面。 相似文献
77.
随着保护地园艺的快速发展，保护土壤免受次生盐渍化威胁的问题日益突出，其中施肥不当是造成土壤盐渍化的重要原因。在保护地园艺的生产过程中，多叶蔬菜是施氮量最大的种类之一，但与氮素对盐胁迫下多叶蔬菜的调控相关的研究目前较少。本研究以生菜(Lactuca sativa L.)为试验材料，采用水培试验，重点研究了盐胁迫下不同氮素水平对生菜生理生化特性的影响。采用双因素水平设计，在霍格兰营养液中，分别设计了4个不同浓度的氮素水平(0、110、220、330 mg/L)处理生菜，然后用0、100、200 mmol/L NaCl溶液分别进行盐胁迫处理。盐胁迫第10天分别测定生理生化指标。结果表明，110～220 mg/L氮素水平对生菜的抗盐性具有明显的影响，能促进植株生长；能显著降低丙二醛(MDA)含量，显著提高可溶性蛋白含量，显著增强细胞保护酶超氧化物歧化酶(SOD)与过氧化物酶(POD)活性。在氮素及盐胁迫效应比较中，氮素和盐胁迫对SOD和POD活性的效应非常接近；而在MDA含量与盐害指数上，盐浓度为主效应；在可溶性蛋白含量中，氮素水平为主效应。氮素效应和盐胁迫效应均高于氮素-盐胁迫间的互作效应。 相似文献
78.
为了原核表达猪源马链球菌兽疫亚种去除信号肽的类M蛋白质,并分析该蛋白质对小鼠的免疫保护力,克隆了马链球菌兽疫亚种CY菌株去除信号肽的类M蛋白质基因Szp,并将Szp基因插入p ET28a表达载体,IPTG诱导,获得重组类M蛋白质,弗氏佐剂乳化重组类M蛋白质后,3次免疫小鼠,用同源菌株CY攻击。诱导获得分子量约5.8×104的重组蛋白质,免疫印迹结果表明该重组类M蛋白质能够被马链球菌兽疫亚种猪多抗识别。类M蛋白质免疫小鼠的存活率为60%,弗氏佐剂乳化灭活CY免疫小鼠的存活率为70%,PBS对照组小鼠攻毒后6 d内全部死亡。表达的类M蛋白质可以给予ICR小鼠部分的免疫保护力,保护效果略低于CY全菌灭活苗,提示可以对马链球菌兽疫亚种多种免疫保护性抗原进行联合,从而进一步提高对动物的免疫保护力。 相似文献
79.