重组鸡β-防御素5 - β-防御素10双分子蛋白的构建及其理化特性分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

马得莹  刘胜旺  韩宗玺  单安山 《农业生物技术学报》2009,17(1):41-46

鸡抗菌肽属禽β-防御素（AvBD）类,是鸡先天性免疫的重要组成部分。研究将AvBD10基因定向插入到AvBD5-pGEX SalⅠ和NotⅠ双酶切位点上,构建了AvBD5-pGEX- AvBD10双基因共表达重组载体。将重组质粒转化大肠杆菌 (Escherichia coli ) BL21,于37 ℃不同时间进行诱导表达,SDS-PAGE检测外源基因的表达。结果表明,重组AvBD5-AvBD10双分子融合蛋白的分子量约为36 kD,重组双分子蛋白占菌体总蛋白的35%,重组菌表达产物以包涵体形式存在。重组双分子蛋白经纯化后,分别以对数生长中期的大肠杆菌[BL21(DE3-) 株]与致病性链球菌［Streptococcus（CAB株）］为检测菌,利用薄层平皿琼脂糖孔穴扩散法测定了重组双分子蛋白的抗菌活性,结果表明,重组双分子蛋白对这两种细菌都具有抗菌活性。并且对温度和pH有很高的稳定性,在-70～100 ℃或pH 3～12处理30 min仍具有抗菌活性。  相似文献   

中草药对正常和高温下蛋鸡生产性能和免疫功能的影响   总被引：11，自引：0，他引：11  

马得莹  单安山  刘玉芹  陈志辉  燕昌江  李焕江  李群道 《畜牧兽医学报》2005,36(3):235-239

研究了日粮中添加女贞子等4味中草药对正常和高温条件下蛋鸡的生产性能和免疫功能的影响。试验分2部分进行,第1期试验研究了日粮中分别添加女贞子等4味中草药对常温下蛋鸡的作用。试验选用51 周龄海兰褐蛋鸡144只,随机分为6个处理组,每处理4个重复,每重复 6 只鸡。试验 1~3 组分别添加 1%的女贞子、五味子和四君子汤,试验4组添加10 mg/kg的大豆异黄酮,试验 5 组添加 5 mg/kg黄霉素,基础日粮为对照组。设预试期1周,从52周龄开始正式试验,至57周龄结束,试验期6周。试验测定了蛋鸡的生产性能、免疫功能和2种血清激素水平。第2期试验研究了日粮中分别添加女贞子等4味中草药对高温条件下蛋鸡的作用。试验选用 58 周龄海兰褐蛋鸡96只,分组与测定指标同试验1,鸡舍内平均温度为(32±0 5)℃,相对湿度为50%~70%,试验期为4周。结果表明,4种添加剂对常温下蛋鸡的生产性能和血清激素水平没有明显影响(P>0 05),女贞子、五味子、四君子汤和大豆异黄酮能显著提高蛋鸡血清抗体水平与淋巴细胞转化率(P<0 05)。女贞子、五味子、四君子汤和大豆异黄酮能显著提高高温条件下蛋鸡的生产性能和免疫功能,降低血清中皮质醇含量,对雌二醇含量没有影响。  相似文献   

禽类实验动物发展的影响因素及对策(一)——国内外禽类实验动物的研究概况   总被引：1，自引：0，他引：1  

周琦  陈洪岩  马得莹 《畜牧兽医科技信息》2006,(12):21-23

从1789年Pasteur用鸡研究鸡霍乱开始,鸡作为实验动物已有几百年的历史,通过鸡验证了孟德尔的遗传定律,成功地研制出人类的第一个抗癌疫苗—鸡的马立克氏病疫苗。以鸡为代表的禽类实验动物具有繁殖快、卵生,体外孵化容易控制,试验成本低,一次可获得大量的鸡胚和胚胎细胞的特点,同时在胚胎期,鸡的免疫系统发育不全,鸡胚和鸡胚细胞适宜做多种病毒的培养基,用于禽病的病原学、流行病学、病理学和用于制备禽病诊断的检测试剂和疫苗生产等,用于疫苗的安全性及效力检验等,使禽类实验动物的应用十分普及。1国外禽类实验动物研究进展美国、日本、法…  相似文献   

铜对动物体内自由基防御系统酶活性及其基因表达的影响   总被引：7，自引：0，他引：7  

马得莹  单安山 《中国畜牧兽医》2003,30(5):27-29

作者简述了动物体内自由基的产生及其对动物体的损害，并较为详细地综述了高铜与低铜对动物体内铜锌超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶、过氧化氢酶、金属硫蛋白与铜蓝蛋白等自由基防御系统酶与蛋白酶的活性及其基因表达的影响。  相似文献   

湿热处理对全脂大豆抗营养因子的影响   总被引：1，自引：0，他引：1  

马得莹  谢幼梅  曲强 《山东农业大学学报(自然科学版)》2000,31(2):166-168

对全脂大豆通过湿热处理,研究了不同加热温度(压力)对脲酶活性(UA)和蛋白质氢氧化钾溶解度(PS)的影响。结果表明,在同一温度(压力)处理下,UA与PS随加热时间的延长而下降;在同一时间下,UA与PS随加热温度(压力)的升高而下降;在UA完全失活之前,UA与PS呈高度正相关,UA可作为大豆加热程度的检测指标,加热过度,UA完全失活,已经不再能作为大豆加热程度的检测指标。但在本实验条件下,即使加热严重过度。PS也不下降为零。仍然可作为检测大豆生熟度的指标。在不同处理条件下,以100℃(0MPa)加热30～60min,110℃(0．045MPa)加热15min,120℃(0．1MPa)、125℃(0．135MPa)加热5min为加热适当。  相似文献   

鹅β-防御素基因克隆与生物学特性的初步分析   总被引：2，自引：1，他引：1  

周财源  蔺利娟  韩宗玺  邵昱昊  刘胜旺  马得莹 《畜牧兽医学报》2011,42(8):1193-1200

本试验采用RT-PCR方法,从鹅的骨髓细胞中扩增到禽p-防御素(AvBD)基因.测序结果表明,该基因的cDNA大小为201 bp,编码66个氨基酸.经遗传进化分析发现,该基因推导的氨基酸序列与鸡AvBD5的同源性最高,达84.8％.因此,将其命名为鹅AvBD5.进一步将该基因定向插入到pGEX-6p-1的EcoR Ⅰ和...  相似文献   

鹌鹑β-防御素10基因的克隆与表达及其体内分布的检测   总被引：1，自引：0，他引：1  

蔺利娟  王瑞琴  韩宗玺  邵昱昊  刘胜旺  程宝晶  孙黎  李子瑞  马得莹 《中国预防兽医学报》2011,33(7)

为测定鹌鹑β-防御素10 (AvBD10)体外抗菌活性及检测其在鹌鹑脏器组织的分布,本研究应用RT-PCR方法从鹌鹑肺脏组织中扩增到鹌鹑AvBD10,经序列同源性分析,鹌鹑AvBD10与鸡AvBD10的氨基酸序列同源性最高(83.8％).将该基因亚克隆到表达载体pGEX-6p-1中进行原核表达,SDS-PAGE电泳表明,鹌鹑AvBD10重组蛋白分子量约为31ku.该重组蛋白经纯化后测定其体外抗菌活性,结果显示,鹌鹑AvBD10重组蛋白具有广谱的抗菌活性.采用定量RT-PCR法检测到AvBD10在鹌鹑脏器组织中广泛表达.  相似文献   

鸡β-防御素基因的克隆、序列分析及其在组织中的分布   总被引：8，自引：1，他引：7  

马得莹  刘胜旺  李一经  单安山 《畜牧兽医学报》2008,39(8)

本研究采用RT-PCR法，分别从鸡肝脏和舌组织中扩增到鸡β-防御素（Gallinacin，Gal）Gal-6、Gal-8与Gal-9基因，经序列测定表明，Gal-6、Gal-8和Gal-9大小分别为201、204和201bp，其成熟肽分别由67、68和67个氨基酸残基组成。组织表达分析表明，Gal-6基因在鸡体内各组织器官中广泛地表达，在鸡皮肤、舌、心脏、小肠、胸肌、肝脏、肾脏、法氏囊、脾脏和胰腺中表达量较高；在肺脏、睾丸和骨髓中也有一定量表达。相比之下，Gal-8在鸡体内的表达较为局限，Gal-8基因仅在舌、小肠、肺脏和肝脏中大量表达。Gal-9基因在鸡体内组织中分布也较广泛，在舌和小肠中大量表达，在气管、肺脏、肝脏、肾脏、骨髓和胸腺有少量表达。  相似文献   

中草药对动物生长、内分泌和免疫功能的影响   总被引：24，自引：3，他引：21  

马得莹  单安山 《中国畜牧兽医》2004,31(1):16-19

作者综述了中草药添加剂对动物生长性能、内分泌、免疫功能、细胞因子活性和基因表达的影响.  相似文献   

重组鹅β-防御素7蛋白的原核表达及其生物学特性分析     

高梦莹  徐倩倩  张婷婷  陈玉秋  赵文钧  齐甜铭  马得莹 《动物营养学报》2016,(4):1114-1121

为探讨鹅β-防御素7(Av BD7)的生物学特性,将鹅Av BD7基因亚克隆到大肠杆菌原核表达载体p Pro EX HTa的EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切位点上,构建重组表达质粒p Pro EX-Av BD7,将重组质粒转化到大肠杆菌Rosetta感受态细胞中,用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)对其菌液进行诱导表达。经N-三(羟甲基)甲基甘氨酸十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(Tricine-SDS-PAGE)分析,该重组蛋白大小为10~15 ku,与预期大小结果一致。重组鹅Av BD7蛋白纯化后,通过菌落计数的方法测定其体外抗大肠杆菌、鸡白痢沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、四联球菌、枯草芽孢杆菌等抑菌活性,盐离子浓度对其抗菌活性的影响及其对鸡红细胞的溶血活性。结果显示,重组鹅Av BD7蛋白对所测定的5种细菌均有显著抗菌活性(P0.05),且其抑菌活性随蛋白浓度的增加而增强。高浓度盐离子(150 mmol/L)显著抑制重组鹅Av BD7蛋白的抗菌活性(P0.05)。重组鹅Av BD7蛋白对鸡红细胞没有溶血活性(P0.05)。由此可见,重组鹅Av BD7蛋白具有广谱抗菌活性,高浓度盐离子显著降低其抗菌活性,且该重组蛋白不具有溶血活性。  相似文献