全文获取类型
收费全文 | 8155篇 |
免费 | 393篇 |
国内免费 | 928篇 |
专业分类
林业 | 332篇 |
农学 | 671篇 |
基础科学 | 109篇 |
559篇 | |
综合类 | 3609篇 |
农作物 | 461篇 |
水产渔业 | 371篇 |
畜牧兽医 | 2456篇 |
园艺 | 487篇 |
植物保护 | 421篇 |
出版年
2024年 | 98篇 |
2023年 | 344篇 |
2022年 | 339篇 |
2021年 | 410篇 |
2020年 | 408篇 |
2019年 | 508篇 |
2018年 | 254篇 |
2017年 | 430篇 |
2016年 | 554篇 |
2015年 | 467篇 |
2014年 | 539篇 |
2013年 | 543篇 |
2012年 | 713篇 |
2011年 | 657篇 |
2010年 | 586篇 |
2009年 | 515篇 |
2008年 | 445篇 |
2007年 | 388篇 |
2006年 | 270篇 |
2005年 | 176篇 |
2004年 | 148篇 |
2003年 | 115篇 |
2002年 | 106篇 |
2001年 | 45篇 |
2000年 | 47篇 |
1999年 | 64篇 |
1998年 | 51篇 |
1997年 | 39篇 |
1996年 | 28篇 |
1995年 | 27篇 |
1994年 | 34篇 |
1993年 | 22篇 |
1992年 | 22篇 |
1991年 | 16篇 |
1990年 | 23篇 |
1989年 | 21篇 |
1988年 | 8篇 |
1987年 | 8篇 |
1986年 | 2篇 |
1981年 | 2篇 |
1963年 | 1篇 |
1955年 | 3篇 |
排序方式: 共有9476条查询结果,搜索用时 31 毫秒
31.
32.
将EGFPE0融合基因插入哺乳动物细胞表达载体pCI-dhfr中,构建重组质粒pCI-EGFPE0。将重组质粒转染CHO(dhfr-),在荧光显微镜下观察到少数细胞呈现绿色荧光,表明转染成功。通过MTX加压筛选后,在荧光显微镜下观察到多数细胞呈现强绿色荧光,表明重组融合蛋白EGFPE0在CHO细胞中得到大量表达。高效表达重组融合蛋白细胞克隆的获得为进一步大量制备可溶性的猪瘟病毒E0糖蛋白、制备其单抗筛选抗原表位及研究E0蛋白的生物学功能奠定基础。 相似文献
33.
2005年1月底.广东省某规模养殖场的鸡出现了张口喘气、呼吸困难,有呼噜声、咳嗽,排黄绿色粪便等症状.部分鸡还有神经症状。发病约450只.发病率为1.2%。三天后鸡只陆续出现死亡.两天内死亡50只左右。解剖病死鸡,可见:喉头、气管粘膜明显出血,小肠轻度炎症。回肠、直肠、泄殖腔粘膜出血。临床无法确诊。经实验室快速诊断.为新城疫感染。 相似文献
34.
PRRSV间接免疫荧光检测法的建立和应用 总被引:9,自引:0,他引:9
以猪生殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)ATCC VR-2332株人工单独感染3头3周龄仔猪,并用PRRSV ATCC VR-2332株和猪圆环病毒2型(PCV2)联合感染2头3周龄仔猪,每日检查试验猪体温、采食情况及临床表现,并用HerdChek IDExx试剂盒测其血清抗体。PRRSV PCV2联合感染猪分别在感染后1、3周剖杀,PRRSV单独感染猪和健康对照猪分别在感染后1、2和3周剖杀,对全部试验猪的肺组织进行灌洗处理以获得肺泡巨噬细胞(PAM).用PAM进行抹片,同时用肺组织直接进行触片做间接免疫荧光(IIF)检测。结果表明,用所获得的3株单克隆抗体均检测到人工感染猪肺组织中的PRRSV抗原。另外,用IIF检测7头临床疑似PRRS病猪的PAM抹片。其中沭阳县的2头猪呈现阳性反应;对这2头猪的肺组织进行病毒分离。在盲传到第4代时Marc-145细胞上产生明显的细胞病变,进一步证实用所获得的3株单克隆抗体检测临床样品的结果准确而可靠,且获得的3株单克隆抗体均可通过IIF用于检测猪肺组织中的PRRSV抗原。 相似文献
35.
36.
37.
38.
梨火疫细菌实时荧光PCR和诱捕PCR-ELISA检测方法的建立 总被引:8,自引:1,他引:8
根据梨火疫细菌中独特而保守存在的质粒pEA29,设计了1对引物和3条探针,建立了实时荧光PCR检测方法和诱捕PCR-ELISA检测方法。实时荧光PCR采用带荧光标记的核酸杂交探针,边扩增边检测,步骤简单,不需PCR后处理,可避免假阳性和交叉污染;诱捕PCR-ELISA检测方法只需简单处理的样品就能检测,减少了核酸不纯出现的漏检,由于增加了核酸杂交探针,可不需凝胶电泳EB染色检测,不会出现假阳性问题。 相似文献
39.
饲料中谷氨酰胺及丙氨酰谷氨酰胺的测定 总被引:3,自引:0,他引:3
高效液相色谱荧光检测法测定饲料中的谷氨酰胺和丙氨酰谷氨酰胺 ,采用Spherisorb ,C1 8色谱柱 ,OPA衍生 ,荧光检测器检测。实验证实 ,这是一种快速、简单、准确、灵敏度和精密度较好的测定方法 ,可用于饲料中游离谷氨酰胺和丙氨酰谷氨酰胺二肽的分析。 相似文献
40.
农杆菌介导的蝴蝶兰基因转化系统的建立 总被引:9,自引:1,他引:9
针刺后的蝴蝶兰‘White Hikaru’的类原球茎(PLB),与含绿色荧光蛋白基因( )和潮霉素磷酸转移酶基因(^p£)的pCAMBIA 1300一SmGFP的根瘤农杆菌LBA4404 共培养,培育出了转基因的蝴蝶兰。经绿色荧光蛋白检测和Southern印迹,证实了再生植株中含cop基因和hpt基因。 相似文献