金黄色葡萄球菌噬菌体裂解酶LysK的表达及其多克隆抗体的制备     

李跃  宫鹏娟  夏斐斐  宋军  顾敬敏  张蕾  杨梅  孙长江  冯新  韩文瑜 《中国兽医学报》2014,(1):45-49

将噬菌体与细菌孵育25min提取噬菌体感染细菌的总RNA,通过逆转录的方法获得cDNA,以此为模板进行PCR扩增得到目的片段,以pET-15b为载体构建重组质粒pET-15b-lysK并转入大肠杆菌BL21中,IPTG诱导表达金黄色葡萄球菌噬菌体K裂解酶基因lysK,表达产物蛋白经镍柱纯化后,测定LysK的裂解活性、裂解谱,并免疫家兔制备多克隆抗体。结果表明,成功诱导表达可溶性LysK并获得重组蛋白,酶谱试验证明LysK对金黄色葡萄球菌具有裂解活性,LysK比噬菌体K裂解谱广。制备的兔多克隆抗体能够与LysK发生特异性反应且具有较高效价,为后续进行LysK体内治疗研究打下了基础。  相似文献   

兔肺炎双球菌病的病原分离鉴定及治疗     

莫玲  王文秀  刘吉山  姚春阳  庄金秋  王艳  韩文瑜  沈志强 《动物医学进展》2014,(11)

2013年山东滨州市某兔场发生仔兔高病死率、母兔流产的疾病。为了诊断治疗该病,本试验采集病死兔肺脏进行病原的分离,通过病原分离、形态学观察、生理生化试验、溶血试验、药敏试验等试验,证实分离菌为肺炎双球菌。该菌具有α-溶血性,对青霉素、头孢吡肟、阿米卡星等药物敏感;动物回归试验成功复制出兔肺炎双球菌病,症状典型,病理剖检变化明显。根据临床症状和药敏试验结果,用青霉素等药物进行治疗,病情得到有效控制。  相似文献   

中草药对嗜水气单胞菌体外抑菌作用的研究     

王教玉  张亚斌  程福亮  刘丽晖  韩文瑜 《中国水产》2007,375(2)

嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)为革兰氏阴性杆菌,弧菌科,气单胞菌属.嗜水气单胞菌在自然界中广泛存在,冷血动物为其自然宿主,是鱼类、两栖类、爬行类、鸟类和哺乳类的重要致病菌,是一种重要的人、畜、水生动物共患病原菌.  相似文献   

空肠弯曲菌共同抗原单克隆抗体的研制及其在细菌检验中的应用   总被引：3，自引：0，他引：3  

韩文瑜  潘荆华 《兽医大学学报》1990,10(1):30-35

  相似文献   

大肠杆菌K_(88ac)与LT(A~-B~ )抗原基因质粒在猪霍乱沙门氏菌弱毒株中的表达     

韩文瑜  黎诚耀  梁焕春  王世若 《中国兽医学报》1992,(1)

应用细菌质粒转化技术,将大肠杆菌K_(?)与LT(A~-B~ )抗原基因重组质粒转入猪霍乱沙门氏菌弱毒菌苗株中.对获得的其中8个转化子进行鉴定的结果表明,转化的细菌仍保持沙门氏菌的形态、生化及抗原特性,同时可稳定地表达K(?)和LT-B两种抗原.用微量间接血凝试验、抗甘露糖豚鼠红细胞凝集试验(MRHA)、ELISA等对转化菌表达的K(?)抗原进行了测定,用间接免疫溶血试验对其表达的LT-B抗原进行了测定.结果,这两种抗原在转化的细菌中均可高效表达.电镜下观察,转化的细菌在其表面形成菌毛样结构.这种转化细菌表现出猪霍乱沙门氏菌与产肠毒素性大肠杆菌的两种抗原特性,为这种双价工程菌苗的研制提供了有价值的候选菌株.本研究结果还表明,猪霍乱沙门氏菌弱毒菌苗株可作为基因转化的有效受体菌.  相似文献   

治疗性噬菌体制剂研究进展   总被引：9，自引：0，他引：9  

鲁会军  韩文瑜  雷连成 《中国兽药杂志》2002,36(6):39-41,19

细菌性疾病一直是困扰养殖业发展的主要问题之一,治疗的常用方法是使用抗生素,但随着耐药菌的大量出现,抗生素已无法达到理想的治疗效果,噬菌体制剂作为一种新的治疗手段已受到越来越广泛的关注。虽然噬菌体制剂的早期研究工作并不理想,而且一度被认为是没有前途的,但近期的研究表明,噬菌体制剂不但有许多抗生素无法比较的优势,而且只要对其进行正确的处理,是可以在治疗中发挥其应有的作用的。国外某些研究机构已开始研制噬菌体制剂,有些国家的噬菌体制剂已经应用于临床治疗并取得了比较理想的治疗效果。  相似文献   

利福平乙基纤维素微球在小鼠体内的组织分布   总被引：1，自引：0，他引：1  

雷连成  陈伟  韩文瑜  徐国秋 《中国兽医学报》2002,22(6):615-617

以有机相分散、溶媒扩散二步法制备了利福平乙基纤维素微球，粒径范围2.5-12.5μm，其中粒径2.5-5.0μm的约占63％。采用微生物测定法研究了利福平乙基纤维素微球静脉给药后，利福平在小鼠体内的组织分布，且与游离利福平在小鼠体内组织分布进行了比较，小鼠单剂量静脉注射游离利福平或利福平乙基纤维素微球（相当于利福平原药）10mg/kg，测定0.5、1、3、7、12、24、48、72、120、168h共10个时间点各组织中的药物浓度。结果表明，游离利福平给药组和利福平乙基纤维素微球给药组在12h内均以肝脏中药物浓度为最高，为9.96-22.41μg/g，在3h内微球给药组高于游离药物给药组，7、12h微球给药组的药物浓度迅速下降，低于游离药物给药组；肾脏的药物浓度在12h内微球给药组明显低于游离药物给药组，24－168h微球给药组的药物浓度下降迟缓，显著高于游离药物给药组直到168药物浓度始终是微球给药组高于游离药物给药组，12h游离药物给药组已不能检出药物含量，而微球给药组直到168h仍维持在5.44μg/g，接近游离药物给药组的最高峰值；血清中利福平浓度在48h已不能检出，而微球给药组在168h为1.33mg/L；心脏、用脏微球给药组和游离药物给药组的药物浓度变化无统计学意义，与游离药物相比，利福平微球明显提高了肺脏中的药物分布，降低了利福平对肝脏、肾脏的毒性，并显著延缓了药物代谢，说明利福平微球具有长效、靶向作用。  相似文献   

抗补体-ELISA及其在动物传染病诊断中的应用     

韩文瑜  郝崇  黎诚耀  王世若  刘玉斌 《中国兽医学报》1992,(3)

应用菊糖和酵母多糖试剂从豚鼠新鲜血清中提取补体C_3,制成菊糖—C_3和酵母多糖—C_3复合物后,以其分别免疫家兔,制备了抗C_3抗血清,经提纯并用HRP标记后,建立了抗补体—ELISA工作程序.通过对8种动物、18个类别的347份血清的检测表明,除抗空肠弯曲菌和獭兔军团菌阳性血清不发生阳性反应外,其余血清均与常规检测法有较好的符合率.  相似文献   

乳房链球菌对克林霉素耐药基因的定位   总被引：3，自引：0，他引：3  

冯现维  韩文瑜  雷连成  江文正  王世若 《中国预防兽医学报》2001,23(2):134-136

采用试管稀释法和纸片法测定9株乳房链球菌对克林霉素的耐药性，通过PCR反应检测克林霉素的耐药性基因，并进行测序比较。发现克林霉素对乳房链球菌的抗菌活力较强，克林霉素耐药基因同时存在于乳房链球菌的染色体和质粒上。  相似文献   

猪源肺炎克雷伯菌的分离与鉴定     

贾艳  雷连成  何礼洋  杨洋  韩俊友  韩文瑜 《吉林农业大学学报》2007,29(2):196-199,202

从9只病死猪肺、肝脏中分离到4株革兰氏阴性杆菌,并对分离菌株进行形态学、培养特性、生化特性和分子生物学的鉴定,确定分离的菌株为肺炎克雷伯菌肺炎亚种。根据GeneBank上肺炎克雷伯菌16S rRNA可变区序列设计1对引物,4株细菌基因组DNA均可扩增到1段大小为127 bp特异性片段,经测序与已知肺炎克雷伯菌相应序列的同源性为100%,鉴定4株细菌均为猪源肺炎克雷伯菌。动物毒性试验证明其对小鼠有较强的致病性。  相似文献