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101.
102.
为了构建GTPV P32基因缺失的通用GTPV转移栽体,试验根据山羊痘病毒疫苗株(GTPV-TY)的P32基因结构设计了2对引物,分别扩增得到与P32基因部分相邻的长度约为11kb的同源重组臂序列并插入到pGEM-T easy载体上,通过Smal位点重新连接,并在此位点插入CMV启动子、多克隆位点、BGH polyaA信号以及LacZ基因.结果表明,试验成功构建了通用山羊痘病毒P32基因缺失转移载体pdP32,此转移载体为改造GTPV-TY株以及开发二价或多价基因工程疫苗提供了有力工具. 相似文献
103.
新疆地区一株马流感病毒的分离及鉴定 总被引：7，自引：3，他引：4
2007年10月,我国新疆维吾尔自治区阿勒泰地区富蕴县发现马匹出现呼吸道疾病,发病马表现出典型的流行性感冒症状。经过临床诊断、病原分离、电镜观察以及病毒基因序列分析,确定病原为马流行性感冒病毒,属于H3N8亚型,该株病毒与近年来马流行性感冒病毒北美洲流行株的同源性较高,命名为A／equine／xinjiangFuyun／3／2007（H3N8）。 相似文献
104.
马传染性贫血病毒(Equine infectious anemia virus,EIAV)引起马属动物以贫血,持续感染,反复发热为特征的一种急性烈性传染病.与人免疫缺陷病毒(HIV-1)同属反转录病毒科慢病毒属的重要成员,二者在基因组结构,复制方式和相似的蛋白种类及功能,传播方式和致病机理方面具有极高的相似性.近年来,随着HIV研究的展开带动了EIAV分子生物研究的发展,EIAV是慢病毒系统中结构最为精确的病毒,为研究人艾滋病提供了绝好的试验模型. 相似文献
105.
根据GenBank马疱疹病毒1型(EHV-1)和4型(EHV-4)gD基因进行分析,选取同源性较高且抗原性强的C端序列设计一对引物进行扩增。将扩增的基因插入pET-30a的BamHⅠ和SalⅠ之间构建原核表达载体pET-gD。然后将pET-gD质粒转化至BL21(DE3)宿主菌,对培养和表达条件进行优化,实现EHV gD蛋白主要抗原区域的高效表达。将重组pET-gD蛋白进行纯化并接种长白兔制备高免血清。经免疫印迹试验鉴定,证实所得纯化表达产物具有良好的抗原性。 相似文献
106.
H3N8亚型马流感病毒间接ELISA抗体检测方法建立及应用 总被引：5，自引：0，他引：5
为建立马流感血清学ELISA诊断方法,本研究以马流感病毒中国分离株A/马/新疆/07(H3N8)通过SPF鸡胚培养和增殖,收取含病毒尿囊液经蔗糖密度梯度离心纯化后作为ELISA包被抗原,首次在我国建立了检测H3N8亚型马流感抗体的间接ELISA诊断方法。试验的最佳反应条件为:最佳抗原稀释度7μg/mL,封闭液5%脱脂乳,血清稀释度1∶100,二抗稀释度1∶10000,稀释液PBS(pH7.4),血清反应时间1.5h,二抗反应时间1h。通过本方法对555份临床样品进行检测并与血凝抑制(HI)试验检测结果比较,证明本方法特异、敏感,具有良好的稳定性和可重复性,适于马流感的流行病学调查和监测工作。 相似文献
107.
马流感诊断方法研究进展与应用概况 总被引：2，自引：0，他引：2
<正>马流行性感冒(简称马流感),是由正粘病毒科A型流感病毒中的马流感病毒(Equine influenza virus,EIV)H7N7亚型和H3N8所引起马属动物的一种急性高度接触传染性疾病。该病的临诊特征为发烧,结膜潮红,咳嗽,流浆液性鼻液、脓性鼻漏及母马流产等。马群一旦感染EIV,极易大范围迅速传播,常呈暴发流行,感染率高而死亡率低,是严重危害马属动物的重要呼吸系统疾病之 相似文献
108.
2008年从湖北省分离到1株H3N8亚型马流感病毒A/equine/Hubei/6/08。以2002年美国KENTUKY株为模板设计HA基因测序引物,进行RT-PCR,然后测定该分离株的HA基因核苷酸序列。经NCBI上Blast同源性比较发现,与A/equine/Newmarket/5/2003(H3N8)同源性较高为98.7%。HA蛋白遗传进化分析表明该毒株隶属于H3N8亚型马流感病毒中的美洲系福罗里达亚系。该株与OIE现在推荐的疫苗候选株A/equine/Kentuck-y/5/2002(H3N8)HA1蛋白氨基酸序列比对发现有3处氨基酸替换位点;与OIE以往推荐的疫苗候选株A/e-quine/Kentucky/1/1994(H3N8)比对发现有11处氨基酸替换位点。研究结果表明该分离株可作为中国研制马流感疫苗的候选株。 相似文献
109.
采用热酚水法提取灵杆菌素并对提取物粗品进行纯化,用MTT法检测其对LS-174t细胞生长增殖的抑制作用,透射电镜观察细胞凋亡的形态学变化;RT-PCR法检测Bcl-2和Bax mRNA的表达及琼脂糖凝胶电泳法检测DNA纯度;流式细胞仪分析检测细胞周期的改变.实验结果发现,灵杆菌素可能通过诱导凋亡抑制LS-174t细胞生长,其机制可能与抑制抗凋亡因子Bcl-2、增强凋亡因子Bax的表达量有关. 相似文献
110.
本实验用琼脂凝胶免疫扩散试验（ＡＧＩＤＴ）和免疫印迹试验（ＩＢＡ）对实验感染绵羊进行性肺炎病毒（ＯＰＰＶ）的山羊血清与山羊关节炎—脑炎病毒（ＣＡＥＶ）抗原以及实验感染ＣＡＥＶ的绵羊血清与ＯＰＰＶ抗原的交叉反应进行了研究。４只接种ＯＰＰＶ的山羊中有一只山羊的血清可与ＣＡＥＶ琼扩抗原发生交叉反应,并在免疫印迹试验中可识别ＣＡＥＶ的ｇｐ４４、ｐ３５和ｐ２８。２只接种ＣＡＥＶ的绵羊中有一只绵羊的血清可与ＯＰＰＶ琼扩抗原发生交叉反应,并在免疫印迹试验中可识别ＯＰＰＶ的ｇｐ４４和ｐ２８。以上的交叉反应结果表明ＯＰＰＶ与ＣＡＥＶ的抗原之间具有密切的相关性,这对于ＯＰＰＶ通过山羊和ＣＡＥＶ通过绵羊的传代研究是非常重要的,并对将来的免疫预防策略具有重要的指导意义。 相似文献