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41.
猪戊型肝炎病毒抗体间接ELISA诊断方法的建立 总被引：1，自引：0，他引：1
本实验建立了应用高效融合表达的重组抗原PET32a-p214检测猪戊型肝炎病毒血清抗体的间接ELISA诊断方法。确定了抗原最适包被浓度为6μg/mL;血清最适稀释度为1∶100,作用时间为60 min;酶标抗体最适稀释度为1∶4 000,作用时间为60 min;判定标准为OD值≥0.339为阳性,OD值<0.339为阴性。实验结果表明该法特异性、敏感性和重复性均较好,与万泰公司戊型肝炎病毒抗体诊断试剂盒检测猪血清的符合率为98.6%。该方法的建立为猪戊型肝炎病毒抗体检测和进行猪戊型肝炎流行病学调查提供了一种简便快速的血清学诊断方法。 相似文献
42.
马传染性贫血病毒(Equine infectious anemia vi- rus,EIAV)与人类免疫缺陷病毒(HIV)同属反转录病毒科、慢病毒属的重要成员,具有高度的传染性,传播迅速、广泛,直接危及动物或人类健康的特点。至今,只有我国研制成功了马传贫驴白细胞(EIAV DL)弱毒疫苗,此疫苗是经过在驴白细胞体外培养继代、培育驯化,致使对马、驴毒力明显减弱而制成的一种减毒活疫苗。通过对该疫苗的使用已有效地控制了马传贫在我国的猖獗流行。这一创新成果轰动了兽医界,并引起医学界的高度关注。 相似文献
43.
44.
采用改进的重氮法合成三聚氰胺免疫抗原(三聚氰胺-BSA)和三聚氰胺包被抗原(三聚氰胺-OVA),以三聚氰胺-BSA免疫BALB/c小鼠,选取间接ELISA测定效价达8000以上的BALB/C小鼠进行融合,用HAT和HA选择性培养基筛选后,得到一株稳定分泌抗三聚氰胺抗体的杂交瘤细胞株命名为3G4,经多次传代培养和反复冻存复苏后能够稳定分泌抗体,在BALB/C小鼠体内诱生腹水,用辛酸-硫酸铵沉淀法纯化腹水。用间接ELISA方法测定杂交瘤培养上清效价为1:1600,腹水效价为1:2.048×10~6,抗体亚类为IgG2b。 相似文献
45.
46.
猪戊型肝炎病毒结构蛋白片段的表达及其在ELISA中的初步应用 总被引：6，自引：0，他引：6
为建立一种快速的猪戊型肝炎病毒抗体检测方法，根据已克隆的戊型肝炎病毒株DQ1结构蛋白基因（ORF2）的抗原性及水溶性分析，在其序列上设计一对引物，上游引物和下游引物分别带有BamHⅠ、HindⅢ酶切位点，用PCR方法扩增，获得369bp大小的相应片段，位于ORF2128—497bp处。将扩增片段克隆到pET-32a构建了原核表达载体pET32a—D001，经测序证明该片段正确插入。将pET32a—D001转化BL21并诱导表达，SDS-PAGE结果显示表达蛋白大小为33ku，Western-blot结果表明表达的蛋白质具有生物活性，将表达蛋白作为诊断抗原，对反应条件进行优化，初步建立了ELISA诊断方法。 相似文献
47.
用琼脂扩散法检测，山羊关节炎－脑炎病毒（ＣＡＥＶ）抗原与马传染性贫血（ＥＩＡ）阳性血清不发生反应，ＥＩＡＶ抗原与ＣＡＥ阳性血清亦不发生反应．ＣＡＥＶ抗原与绵羊进行性肺炎（ＯＰＰ）阳性血清不发生反应．但ＯＰＰＶ抗原与ＣＡＥ阳性血清发生反应． 相似文献
48.
戊型肝炎病毒分子生物学及疫苗研究进展 总被引：1，自引：0，他引：1
戊型肝炎是由戊型肝炎病毒感染会引起一种急性、自限性疾病。病毒采取粪-口途径进行传播。在发展中国家是主要的病毒性肝炎的病原体。与其他病毒性肝炎相比戊型肝炎的奇怪特征是感染的怀孕妇女的病死率很高。由于缺乏体外可行的繁育系统,有些地方分离的戊型肝炎病毒在灵长类人猿中保存。其后病毒的基因组被克隆出来,其核酸序列也已经测出。戊型肝炎病毒现在临时归入类戊型肝炎病毒类家族。病毒核酸基因组:正链RNA,7.5kb大小。编码至少三种蛋白质,ORF1编码病毒的非结构多聚蛋白,这些蛋白具有与其他正链RNA病毒的复制酶和加工酶同源的活性… 相似文献
49.
甲病毒(Alphavirus)是披膜病毒科(Togavirus family)的成员,是单股、正链的RNA病毒,包括塞姆利基森林病毒(Semliki forest virus,SFV)、辛德毕斯病毒(Sindbis virus,SIN)和委内瑞拉马脑炎病毒(Venezuelan equineencephalitis virus,VEE)等30个成员.20世纪80年代末,随着这些病毒的cDNA感染性克隆的建立,相继开展了以甲病毒复制子为基础载体的研究,利用复制子特有的RNA复制酶提高翻译模板mRNA的量来实现高水平表达的目的,以改造出相应的甲病毒载体,已被广泛地应用于基因治疗和分子生物学的研究,并在疫苗领域中受到关注. 相似文献
50.