三聚氰胺IgG型单克隆抗体醛制备及鉴定     

耿庆华  盛明巍  彭永刚  林颖  相文华 《预防兽医学进展》2011,(11):23-25

采用改进的重氮法合成三聚氰胺免疫抗原（三聚氰胺-BSA）和三聚氰胺包被抗原（三聚氰胺-OVA）,以三聚氰胺-BSA免疫BALB／c小鼠,选取间接ELISA测定效价达8000以上的BALB／C小鼠进行融合,用HAT和HA选择性培养基筛选后,得到一株稳定分泌抗三聚氰胺抗体的杂交瘤细胞株命名为3G4,经多次传代培养和反复冻存复苏后能够稳定分泌抗体,在BALB／C小鼠体内诱生腹水,用辛酸一硫酸铵沉淀法纯化腹水。用间接ELISA方法测定杂交瘤培养上清效价为1：1600,腹水效价为1：2．048×10^6,抗体亚类为IgG2b。  相似文献   

家畜传染病学分会第十三次学术研讨会学术报告之五中国马流感研究现状     

相文华 《兽医导刊》2009,(10)

一、概括及病原病理 马流行性感冒(简称马流感)是由正粘病毒科流感病毒属马A型流感病毒引起马属动物的一种急性暴发式流行的高度接触性、呼吸道传染病.该病发病率高,死亡率低,临诊特征为发烧、结膜潮红、咳嗽、流浆液性鼻液一脓性鼻漏、母马流产等.  相似文献   

山羊关节炎-脑炎核酸疫苗研究进展     

曲娟娟  刘慧敏  相文华  沈荣显 《中国兽医杂志》2006,42(7):46-47

山羊关节炎脑炎病毒（Caprine arthritis-encephalitis virus，CAEV）是反转录病毒科慢病毒属的成员之一，与其同属于一科的还有马传染性贫血、人免疫缺陷病、猴免疫缺陷病、牛免疫缺陷病、猫免疫缺陷病以及梅迪-维斯纳病毒，山羊关节炎脑炎病毒与梅迪-维斯纳病毒极为相似，二者在血清学上有多种交叉反应。山羊关节炎脑炎病毒主要侵染宿主的单核／巨噬细胞系的细胞，引起以成年山羊的关节炎以及羔羊的脑炎症状为主的慢性持续性感染。该病潜伏期长，可通过母羊哺乳及呼吸道和消化道广泛传播，又没有有效的药物和疫苗对其进行防制，使CAEV的感染呈世界性分布。  相似文献   

马流感病毒A/马/青海1/94株亚型鉴定及其HA基因序列特征     

王晓钧  贾斌  杨建德  田国斌  薛飞  唐秀英  相文华  沈荣显 《中国预防兽医学报》2003,25(3):164-167

本试验用AI标准阳性分型血清对我国马流感病毒A／马/青海/1／94进行了血凝素(H)和神经氨酸酶(N)的鉴定，并与马流感病毒吉林株、黑龙江株、北京株及国际标准株A／切ukx／Mgxd／2／63进行了对比，结果显示，1944年在我国青海省暴发的马流感病毒的亚型为H3N8；以反转录。聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增该株的血凝素基因，并克隆到pGEM-Teasy载体上，采用双脱氧末端终止法测定该cDNA片段共1738个核苷酸序列，并推导出其编码的565个氨基酸的序列。利用Genbank blast和基因进化树分析软件分析各毒株之间的亲缘关系，发现A／马/青海/1/94与1992年香港马流感分离株存在较近的亲缘关系。  相似文献   

马传贫琼扩阳性马病理形态学观察     

褚桂芳  相文华  尹训南  吴东来  王继科  刘洪  蔡虹 《中国预防兽医学报》1990,(3)

26例马传贫(EIA)琼扩阳性马,按其病理过程和表现,12例为慢性活动型,14例为慢性静止型。前者是在慢性病理过程中兼有亚急性型的病变,即可见粘膜和浆膜有新、旧出血点混在,实质器官不同程度变性、坏死,全身结缔组织增生以及铁代谢障碍等,此外,淋巴器官亦见有不同程度的病损变化。后者出血性素质不如前者明显,且实质器官病变轻微,仅有轻度铁反应和细胞反应,但结缔组织增生严重,淋巴器官接近于正常。  相似文献   

马流行性感冒病毒研究进展     

杨建德  相文华  李景鹏 《畜牧兽医科技信息》2001,3(4):28-30

马流行性感冒(简称马流感)病毒(Equine Influenza Virus,EIV)是引起马属动物呼吸系统症状的重要病原之一.EIV感染马后主要表现发热、咳嗽和流浆液性鼻汁等症状,该病毒一旦感染马群,极易大范围迅速传播.马流感广泛存在于世界各国,给养马各国造成程度不同的经济损失.近几年,随着赛马业的发展,该病越来越受到人们的重视.EIV属A型流感病毒,与同型的人流感病毒和禽流病毒具有一定的亲缘关系.自然界中流感病毒存在着抗原漂移和变异现象,就有可能导致人和动物感病毒之间发生重组现象.因此,马流感病毒的研究对整个流感病毒防制具有重要意义.本文将就马流感病毒概况、病毒特征、病毒变异及与其他流感病毒之间的关系进行阐述.  相似文献   

牛传染性鼻气管炎病毒gE基因的截短克隆与表达   总被引：6，自引：0，他引：6  

王海燕  朱远茂  薛飞  童光志  赵立平  相文华  韩文瑜 《中国预防兽医学报》2006,28(3):289-293

以牛传染性鼻气管炎病毒Baaha Nu/67株的DNA作为模板，用PCR扩增gE基N并克隆至pGEM-T Easy裁体，再以此质粒作为模板将gE基因分成6个片段，分别插入原核表达载体pET32a并在大肠杆菌中进行了表达。蛋白电泳结果表明6个片段中有2个片段以可溶形式表达，1个片段以包涵体形式表达，另外3个片段没有表达。采用固定化金属离子亲和层析法在非变性条件下对两个可溶性片段进行了纯化。经免疫印迹试验，间接ELISA和交叉试验证明，两个纯化的重组蛋白均与牛传染性鼻气管炎阳性血清样品发生反应，而与牛传染性鼻气管炎阴性血清无任何反应，显示其具有良好的抗原性和特异性，可用于牛传染性鼻气管炎gE-ELISA诊断方法的建立。  相似文献   

山羊关节炎-脑炎病毒甘肃株env基因的克隆和序列分析     

曲娟娟  赵立平  沈荣显  相文华 《中国预防兽医学报》2006,28(4):478-481

本试验参考GenBank上发表的CAEV-63株的env基因核苷酸序列设计一对引物，以CAEV甘肃株前病毒DNA为模板，PCR扩增产物约2．9kb，与预期的目的片段大小一致。回收目的基因片段并将其克隆到pMD18-T载体上，经PCR及酶切鉴定阳性的重组质粒测序，结果表明所扩增2893个核苷酸片段含有CAEV囊膜基因的全序列，编码964个氨基酸。核苷酸和氨基酸序列分析显示，CAEV甘肃株env基因与CAEV-63美国株的env基固核苷酸和氨基酸的同源性分别为99．0％和98．1％。  相似文献   

猪戊型肝炎病毒大庆株DQ1全基因序列分析   总被引：5，自引：0，他引：5  

于敏  曲娟娟  郭巍  赵立平  相文华 《中国预防兽医学报》2006,28(5):507-510

本试验采用RT．-PCR的方法对戊型肝炎病毒大庆株（DQ1HEV株）的全基因进行分片段扩增，并对其两个末端采用末端快速扩增法（RACE）进行扩增、克隆，测序。与已报道的人的14株HEV的4个基因型的核苷酸和氨基酸进行比较，与IV型HEV的同源性最高。ORF1区与IV型HEV核苷酸的同源性为82．6％～83．6％．氨基酸同源性为93．5％，ORF2区与IV型HEV核苷酸的同源性为87．0％～88.4％，氨基酸同源性为95．8％～97．4％。ORF3区与IV型HEV核苷酸的同源性为94．4％～96．5％，氨基酸同源性为90.3％～96．5％。其结果表明DQ1 HEV株为IV型HEv。  相似文献   

马传染性贫血弱毒疫苗免疫马与自然感染马酶联免疫吸附试验血清抗体耐热性比较研究     

朱远茂  薛飞  赵立平  杨建德  王晓钧  吕晓玲  相文华  沈荣显 《中国预防兽医学报》2005,27(1):46-49

本试验对马传贫血清抗体酶联免疫吸附试验(ELISA)的耐热性进行了比较研究.对2匹弱毒疫苗免疫马跟踪检测17个月,在接种3周后ELISA检测均呈阳性,其中一匹马ELISA抗体阳性持续到接种后10个月,另一匹马ELISA抗体阳性可持续到接种后一年.对两匹马的所有不同时期采集的血清样品经75℃加热5 min处理后,用ELISA检测均为阴性.另选6匹马传贫弱毒疫苗免疫马血清且ELISA检测抗体呈阳性的30个样品,经75℃加热5min处理后,均由阳性转变成阴性.4匹经马传贫病毒辽毒株(LN-EIAV)实验感染马且ELISA检测抗体呈阳性的血清样品,经75℃加热5 min处理后,结果仍为阳性.23匹ELISA检测抗体呈阳性的自然感染马血清样品,经加热处理后,19匹马血清样品仍为阳性,4匹马血清样品由阳性转变成阴性.结果表明弱毒疫苗免疫马较自然感染马血清抗体耐热性稍差.  相似文献