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间接ELISA检测猪伪狂犬病血清抗体 总被引：9，自引：0，他引：9
用猪肾传代细胞IBRS－2增殖猪伪狂犬病病毒（PRV）鄂A株，病毒培养上清液经硫酸铵沉淀、聚乙二醇（Mr20000）浓缩后作为包被抗原。用纯化的猪血清IgG免疫家兔，HRP村记撮的兔抗猪IgG，制备出高效价的酶标抗体，酶标抗体工作浓度为1：50000；经各种条件的选择，建立了检测猪伪狂犬病血清抗体的间接ELISA。所建立的间接ELISA抗原包被浓度为39.2mg/L，血清最佳稀释度为1：20，与猪细小病毒、猪、O型口蹄疫、猪衣原体标准阳性血清呈阴性反应，与标准阴性血清和临床未感染PRV的猪血清呈阴性反应；与猪伪狂犬病标准阳性血清、免疫猪血清和临床发病猪血清呈明显的阳性反应；与美国进口的PRV抗体检测ELISA诊断试剂盒检测结果比较，45份猪血清的阴、阳性检出符合率均为100％。表明建立的间接ELISA具有敏感性高、特异性强、重复性好的优点，可用于猪伪狂犬病血清抗体的定性和定量检测。 相似文献
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抗独特型抗体对猪繁殖与呼吸综合征病毒感染的免疫作用 总被引：1，自引：0，他引：1
用PRRSV感染SPF猪，血清检测结果显示，机体不仅产生抗PRRSV抗原的各种抗体(Ab1)，而且产生针对这些抗体的抗独特型抗体(Ab2)。根据各种蛋白质的等电点不同，应用IEF技术分离纯化出PRRSV感染猪血清中的不同IgG。分别以纯化的抗PRRSV—GP5蛋白、抗PRRSV-M蛋白的Ab2免疫SPF猪各5头，7d后经鼻腔感染PRRSV，定期采集血样进行病毒分离或鉴定试验。抗PRRSV-GP5蛋白的Ab2免疫的猪，其血样自感染后3～7d均检出PRRSV；3头猪在感染后14～63d未检出PRRSV；2头猪在感染后14～35d检出PRRSV，从42～56d转为阴性，其中1头猪在63d时检出PRRSV。抗PRRSV—M蛋白的Ab2免疫的猪，其血样自感染后3～7d均检出PRRSV；2头猪在感染后14～63d未检出PRRSV；3头猪在感染后14～35d检出PRRSV，从42～56d转为阴性，其中1头猪在63d时检出PRRSV。抗PRRSV—GP5和抗PRRSV—M蛋白的Ab2免疫作用显著，可作为PRRSV-GP5和PRRSV—M蛋白的替代抗原产生具有中和效应的抗体，保护机体免受PRRSV的感染。 相似文献
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胶体金法检测猪旋毛虫病的敏感性研究 总被引：2，自引：0，他引：2
将3组试验仔猪分别人工感染旋毛虫幼虫1000条／头、5000条／头和25000条／头,感染后每7d抽血1次,采集全血和血清;感染后46d,将试验猪全部剖杀,取全血、血清和膈肌肉待检。所有样品均用胶体金试纸检测猪旋毛虫抗体和抗原,膈肌肉样品并需用显微镜检查有无旋毛虫包囊。结果表明,最早可于感染后21d,在低感染量试验组的1头仔猪的血清中检出阳性抗体;血清样品的抗体检出率高于全血样品;在血液和血清中未检出虫体抗原;抗体试纸条的检测结果较为准确可靠,而且敏感性明显强于抗原试纸条。建议在检疫检验工作中使用抗体试纸条检测血清或肌肉样品。 相似文献
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为了筛选出特异性好和敏感性高的ELISA用猪肺炎支原体抗原蛋白,作者分别将猪肺炎支原体灭活疫苗和168株菌活疫苗分别经肌肉和肺内注射途径免疫猪,免疫后7、15、30和56d采集分离血清。以P97R1、P36、P46、DnaK单个蛋白和混合蛋白为猪支原体肺炎血清抗体ELISA用特异性蛋白抗原,与猪肺炎支原体IDEXX抗体检测试剂盒比较检测免疫后抗体的发生规律,并对检测结果进行对比。结果表明,P36和P97R1能够检测出比较高的母源抗体水平;DnaK和P46检测的抗体滴度变化趋势相一致,且检测的抗体高滴度维持时间较长;与其它抗原相比,混和蛋白在56d时检测到较高的抗体水平。混合抗原的检测结果与IDEXX具有较高的符合率,但检测敏感性比IDEXX高,且较IDEXX符合抗体变化规律。结果表明混合蛋白具有较高的检测敏感性,可以更加准确地监测该病的感染或免疫状态。 相似文献
5.
目的观察猪带绦虫六钩蚴45W-4B抗原对仔猪的免疫保护作用。方法用IPTG诱导表达融合蛋白GST-45W-4B。用GST柱进行纯化，以Montanide ISA 206为佐剂制成疫苗免疫仔猪。间接ELISA检测仔猪血清抗45W-4B IgG抗体水平，MTT法进行外周血淋巴细胞殖试验。免疫1个月后全部实验组经口攻击感染25000彬头猪带绦虫虫卵，攻虫3个月后剖检，计算减虫率及保护率。结果免疫组注射疫苗的第2周起，抗体为阳性，45W-4B组持续升高至第8周，淋巴细胞增殖明显高于未免疫感染组。用该抗原制备的疫苗获得了95％的减虫率和33％的保护率。结论该抗原对猪囊尾蚴病具有很好的免疫保护作用。 相似文献
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采用猪繁殖与呼吸综合征(蓝耳病)ELISA试剂盒和金标试纸检测高致病性猪蓝耳病免疫抗体,在首免后14d两试验组用金标试纸法检测血清样品均为阳性,并一直持续到首免后112d;用ELISA法检测同份血清,在首免后28～35d出现阳性,两试验组阳性率分别为20%、30%,首免后49d阳性率为80%,此后阳性率逐渐下降,至98d时两组分别为0和20%.结果表明:猪繁殖与呼吸综合征(蓝耳病)疫苗免疫后抗体监测使用的方法不同,结果差异很大. 相似文献
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猪旋毛虫McAb快速ELISA法的应用研究 总被引：2，自引：0，他引：2
本研究用保存在小鼠中的猪旋毛虫、旋毛形线虫（Trichinella spiralis)、犬旋毛虫、本地毛形线虫（Trichinella nativa)四种不同来源的旋毛虫隔离种接种断乳仔猪，定期用ELISA法检查抗体出现情况，剖杀后用鲜肉及冷冻不同时间的肉制成肉汁，进行ELISA抗体检测。结果表明：用ELISA法检出阳性的时间为：猪旋毛虫和T.spiralis在16天以后，犬旋毛虫和T.nativa在24天以后；鲜肉肉汁ELISA检测结果与其血清结果基本相同；冷肉肉汁检疫中，短期内冷冻对ELISA检测结果影响也不大。 相似文献
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利用猪圆环病毒病(PCVD)和猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)二联灭活疫苗免疫4周龄仔猪,免疫后7、14、21、28d采血,测定免疫后血清中抗PRRSV、PCV中和抗体和ELISA抗体较价,并于免疫后28d分别用PRRSV和PCV2攻毒,攻毒后每日检测猪体温和观察临床症状,于攻毒后21d所有存活猪全部扑杀,分别对每头猪肺、肝、脾、淋巴结、心和血进行剖解病理和组织病理学观察及PRRSV和PCV2核酸检测,以确定该疫苗免疫保护率。结果表明,所有试验猪于免疫后7d血清抗体开始检出,28d达到峰值,免疫后28dPRRSV和PCV2攻毒保护率均为100%(5/5)。 相似文献
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用多头绦虫原头节，囊壁，囊液层析纯化抗原及原头节排泄分泌（ＥＳ）抗原对绵羊免疫及攻击感染多头涤虫虫卵后的血清进行ＥＬＩＳＡ检测，观察了血清抗体的消长规律，结果表明，绵羊在感染虫卵后第１周即可检测出血清抗体，感染后３～５周抗体效价达峰值，一直持续到试验结束，免疫组绵羊在免疫３次后，血清抗体效价迅速升高，第３次免疫后１～２周达到峰值，且抗体水平明显高于虫卵感染组，在攻击虫卵后抗体效价开始下降，但直到试 相似文献
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猪蓝耳病免疫抗体监测问题探讨 总被引：6，自引：0，他引：6
一组实验猪场应用PRRS灭活疫苗免疫猪场生猪,采集同一份猪血清ELISA试剂盒检测,测不出免疫抗体(0∕14),金标检出阳性率(9∕14)64.28%;另一组用进口减毒活苗免疫的同一份猪血清ELISA检出阳性数百分百(16∕16),金标检不出(0∕16)。另一实验猪场灭活苗两次免疫,金标检出阳性率(16∕21)76.19%,ELISA检不出;活疫苗两次免疫,ELISA检出阳性率(16∕21)76.19%,金标检不出。结论不同疫苗免疫效果,用不同检测方法,结果差异很大。 相似文献
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旋毛虫感染小鼠对p46 000重组抗原的抗体应答 总被引：1，自引：0，他引：1
分别以旋毛虫肌幼虫ES抗原和p46000重组蛋白作为抗原，对小鼠人工感染旋毛虫后的抗体应答进行了ELISA检测。结果表明，以肌幼虫200条／只经口感染小鼠后，肌幼虫ES抗原在感染后9d可检出抗体，并于感染后35～42d达到最高水平；应用重组抗原检测时，感染后10d可检出抗体，抗体水平略低于用ES抗原，但是其消长规律基本一致．而且与阴性血清相比差异明显；抗体在117d后仍维持于较高水平。 相似文献
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作者使用 ELISA 方法对22头试验感染猪血清、全血及干燥血液中猪水泡病(SVD)抗体进行了检测。通过测试比较了3种样品中抗体检出的相关程度,以期探讨用滤纸或吸水纸上的干血代替血清样品来检测 SVD 病毒抗体。采用3种方法制作供 相似文献
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《广东畜牧兽医科技》2012,37(3)
对广东省2011年政府招标的4个厂家生产的高致病性猪蓝耳病活疫苗（JXAl-R株）进行免疫效果比较试验。随机选取115头32天龄，猪蓝耳病病毒核酸阴性的健康仔猪，随机分成4组，于免疫前0d，免疫后28d、48d、66d、86d、106d和126d分别进行采血，采用法国LSI公司猪蓝耳病抗体ELISA试剂盒进行抗体检测，比较4个厂家生产疫苗的免疫效果。检测结果表明，4个厂家生产的高致病性猪蓝耳病活疫苗（JXAl－R株）免疫效果都比较好，无明显不良反应，免疫持续期长，一次免疫后126d抗体阳性率仍在75％以上。 相似文献
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为给人感染伪狂犬病病毒(PRV)来源分析及其感染机理研究提供相关信息，对一例疑似感染PRV患者的血清、脑脊液、拭子及其工作猪场的病猪血清、组织等样品进行病原学、血清学检测及病毒分离，对其工作猪场开展流行病学调查，并采集患者同事血清样品进行PRV抗体检测。结果显示：病人样品经数字PCR检测均为PRV核酸阳性；病人发病后5～90 d内的血清样品均为PRV gB抗体阳性，gE抗体发病后18 d转为阳性并一直持续到发病后90 d；病人同事均未表现临床症状，其血清样品PRV gB抗体阳性率为22.2%,gE抗体均为阴性；从病人工作猪场的病猪样品中分离到PRV，且样品经荧光定量PCR核酸检测及ELISA抗体检测均检出阳性；病人工作猪场为PRV阳性场，病人及PRV gB抗体阳性同事均有直接接触病猪史。结果表明，患者感染的PRV来自其工作猪场猪群的可能性较大，人感染后表现出和动物感染相似的抗体消长规律。PRV对公共卫生的影响及其感染机制需进一步关注和研究。 相似文献
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采用RT—PCR方法扩增猪囊尾蚴T24免疫原基因，将扩增产物与pGEM—Teasy载体连接，重组质粒经PCR、酶切鉴定后进行测序；构建T24基因的pGEX-4T-1原核表达载体，经IPTG诱导表达后，进行SDS-PAGE、Western—blotting；用所表达的蛋白免疫小鼠，经ELISA检测血清抗体，验证其免疫原性。结果显示，所克隆的T24基因片段长716bp，含有1个678bp的开放阅读框，其编码226个氨基酸，与已报道的猪囊虫T24基因核苷酸序列同源性为100％；表达的融合蛋白大小为40ku，并能被猪囊虫阳性血清识别；免疫小鼠在免疫1周后即可检测到血清抗体，第30d达到较高水平，表明该融合蛋白具有较好的免疫原性。 相似文献
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在漯河市某养殖场随机选取2栋(保育13和保育17)健康状况良好的保育猪进行猪蓝耳病(PRRS)疫苗不同免疫剂量的效果试验,每栋舍中猪只随机分为四组(A、B、C、D组),分别免疫不同剂量的蓝耳病疫苗。每组猪群均随机选取15头仔猪标记,分别在免疫前、免疫后7、14、21、28 d进行采血,采用酶联免疫(ELISA)检测试剂盒检测PRRSV抗体水平。结果显示,猪群首次免疫蓝耳病疫苗后第2周抗体水平达到高峰,之后有所下降;不同剂量的疫苗免疫,猪群整体抗体变化趋势一致,说明低剂量的蓝耳病毒即可引起猪群的感染。 相似文献
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用已经建立的检测仔猪副伤寒血清抗体的Dot—PPA—ELISA，对不同仔猪副伤寒抗体水平试验组14头仔猪和对照组4头仔猪进行了血清抗体效价测定，并以沙门菌强毒攻击受试猪，测定血清抗体效价与保护力的关系。试验结果表明，以Dot—PPA—ELISA检测的仔猪副伤寒血清抗体几何平均效价不低于28^8.2时，85．7％的猪能够抵抗沙门菌强毒的攻击。试验初步确定以Dot—PPA—ELISA进行猪群免疫监测时，血清抗体的几何平均效价2^8.0。为仔猪副伤寒的保护临界标准，该标准的确定为集约化猪场用Dot—PPA—ELISA检测仔猪副伤寒血清抗体，进行仔猪副伤寒的诊断、免疫监测及流行病学调查提供了科学依据。 相似文献
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