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相似文献
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1.
为评价鸡新城疫和禽流感(H9亚型)二联灭活疫苗不同佐剂的免疫效果,选用Marcol 52、T1和SNB白油及S71油佐剂与鸡新城疫病毒和禽流感病毒混合制成灭活疫苗,免疫适龄SPF鸡,比较不同佐剂对鸡的安全性及新城疫和禽流感的血凝抑制(HI)抗体水平。结果表明,4种佐剂疫苗的安全性、稳定性良好;应用T1白油佐剂的灭活疫苗,免疫SPF鸡产生的新城疫和禽流感HI抗体水平优于其他佐剂,免疫后2周检测新城疫和禽流感的抗体水平均合格,确定为最佳白油佐剂。  相似文献   

2.
为了探讨细菌核酸对 H9亚型禽流感病毒灭活疫苗的免疫增强作用 ,将 1 5日龄蛋用公鸡 1 2 0只随机分为 4组 ,即空白组、抗原组、细菌核酸佐剂组及白油佐剂组 ,每组 30只。于 2 8日龄时 ,细菌核酸佐剂组以灭活 H 9亚型禽流感病毒作为抗原 ,大肠杆菌牦牛株核酸作为佐剂 ,免疫接种于试验鸡 ,用 XTT法检测 T、B淋巴细胞增殖反应 ,并用血凝与血凝抑制法检测血清抗体水平。结果显示 ,在细菌核酸佐剂组 ,鸡的血凝抑制抗体水平和 T、B淋巴细胞增殖反应均显著高于抗原单独免疫组 (P<0 .0 5 ) ,而免疫组均显著高于空白组 (P<0 .0 5 ) ;细菌核酸佐剂组的抗体滴度峰值略高于白油佐剂组 (P>0 .0 5 ) ,但 T、B淋巴细胞增殖指数峰值显著高于白油佐剂组 (P<0 .0 1 )。结论认为 ,大肠杆菌牦牛株核酸可显著增强免疫鸡对禽流感病毒 H9亚型灭活疫苗的免疫反应 ,其免疫增强效果略高于常规油佐剂  相似文献   

3.
为研究重组鸡γ-干扰素(Chicken interferonγ, ChIFN-γ)对鸡新城疫、禽流感(H9亚型)二联灭活苗(La Sota株+WD株)的免疫增强效果,取重组鸡γ-干扰素作为免疫增强剂,联合鸡新城疫、禽流感(H9亚型)二联灭活疫苗免疫SPF鸡,在免疫后24h和48h采集全血进行细胞因子检测,结果显示免疫后联合免疫组的IFN-γ和IL-4细胞因子水平要高于单独免疫疫苗组;免疫后7、14、21、28和35d分别采集血清测定抗体效价,通过检测血清中针对鸡新城疫病毒和禽流感病毒(H9亚型)的HI抗体水平可知,联合免疫组产生的针对鸡新城疫病毒和禽流感病毒(H9亚型)的抗体均高于单独免疫疫苗组。试验结果表明,重组鸡γ-干扰素对鸡新城疫、禽流感(H9亚型)二联灭活苗(La Sota株+WD株)具有免疫增强作用。  相似文献   

4.
检测鸭坦布苏病毒卵黄抗体间接ELISA方法的建立   总被引:1,自引:0,他引:1  
本研究以纯化的鸭坦布苏病毒WR株为包被抗原,建立检测鸭坦布苏病毒卵黄抗体的间接ELISA方法。经优化后确定检测样品的结果P/N([样品孔OD450nm-空白孔OD450nm)/(阴性孔OD450nm-空白孔OD450nm)]≥2.1判为阳性,<1.5者为阴性;1.5≤P/N<2.1者判为可疑,重检后仍可疑者定为阴性。以建立的间接ELISA方法对H9亚型禽流感病毒、H5亚型禽流感病毒、减蛋综合征病毒、鸭瘟病毒和大肠杆菌卵黄抗体进行了检测,结果均为阴性,表明该方法具有良好的特异性。经重复性试验表明,该方法重复性好。本方法的建立对开产种鸭和蛋鸭坦布苏病毒疫苗免疫效果的评价具有十分重要的意义。  相似文献   

5.
为了明确持续低产蛋率开产蛋鸭群的主要病毒病感染情况,应用已建立的间接ELISA方法和血凝抑制试验对2013年1月至2015年10月采自福建、广东、广西、江西、浙江、江苏和安徽等7省(区)免疫过H5亚型和H9亚型禽流感灭活疫苗但未免疫禽1型副黏病毒病疫苗和禽坦布苏病毒病疫苗,表现为持续低产蛋率的29个开产蛋鸭群的4 737份血清样品进行抗体检测,同时采集蛋鸭卵巢组织进行RT-PCR检测。结果显示,29个开产蛋鸭群中,H5亚型禽流感、H9亚型禽流感、禽1型副黏病毒病和禽坦布苏病毒病抗体的群阳性率分别为100.0%,100.0%,10.3%和100.0%,群内阳性率分别为79.4%~100.0%,82.5%~100.0%,0.0%~13.1%和33.7%~100.0%;蛋鸭卵巢组织中H5亚型禽流感病毒、H9亚型禽流感病毒、禽1型副黏病毒和禽坦布苏病毒的阳性率依次为13.8%(4/29),0.0%(0/0),3.5%(1/29)和86.2%(25/29)。上述结果表明,我国以上7省(区)表现持续低产蛋率的开产蛋鸭群存在禽坦布苏病毒的严重感染,应引起养鸭生产者的高度重视。  相似文献   

6.
为评价H9N2亚型禽流感病毒HF株灭活疫苗对流行毒株的免疫保护效果,将禽流感病毒HF株灭活疫苗和商品化鸡新城疫、禽流感(H9亚型)二联灭活疫苗分别以0.3 mL/只接种21日龄SPF鸡,3周后采血测定HI抗体效价,并用2018年-2019年分离的4株H9亚型禽流感病毒分别进行攻毒。结果显示,免疫后21 d, HF株灭活疫苗免疫组HI抗体效价达到9.1 log2以上,商品化疫苗HI抗体效价几何平均值则为6.3 log2以内。4株H9亚型禽流感病毒流行毒株以10~(7.0)EID_(50)的剂量静脉攻毒后,HF株灭活疫苗免疫组可抵抗流行毒株的攻击,保护率为100%;而商品化疫苗对流行毒株的攻毒保护率仅为40%~60%。说明H9N2亚型禽流感病毒HF株灭活疫苗具有较强的免疫原性,能使免疫鸡抵抗流行毒株的攻击。  相似文献   

7.
评价鸭坦布苏病毒病灭活疫苗(HB株)免疫16日龄北京鸭的效力、免疫产生期和持续期。利用实验室制备的3批鸭坦布苏病毒病灭活疫苗(201401、201402和201403批),以0.5 mL/只的剂量分别经肌肉或皮下注射途径免疫16日龄DTMUV抗体阴性北京鸭,首次免疫后14 d按照同样的剂量和途径进行二次免疫。分别于首免后14 d,二次免疫后7、14、42、60d和100 d采血分离血清,用ELISA方法检测抗体。采血后以0.5 mL/只含500 DID50的剂量经胸部肌肉注射鸭坦布苏病毒进行攻毒,攻毒后2 d采血,分离血清进行病毒分离。3个批次疫苗免疫16日龄北京鸭,二次免疫后7 d均可检测到血清抗体,至60 d检测时抗体阳性率在80%以上。三批疫苗二次免疫后7 d即对试验鸭产生保护,保护率可达到60%以上,其中皮下注射途径的免疫持续期为60 d,肌肉注射途径的免疫持续期为100 d。鸭坦布苏病毒病灭活疫苗对16日龄北京鸭采用二次免疫的程序可获得良好的保护效果,胸部肌肉注射途径优于皮下注射途径。  相似文献   

8.
不同油佐剂ND-AI二联苗及ND-IB-EDS三联苗比较试验   总被引:1,自引:0,他引:1  
对用两种不同油佐剂(10号白油佐剂及NL白油佐剂)制备出的鸡新城疫(ND)-H9亚型禽流感(AI(H9))型二联灭活疫苗及鸡新城疫(ND)-传染性支气管炎(IB)-减蛋综合征(EDS)三联灭活疫苗进行了物理性状、安全性及效力比较试验。结果显示,这两种不同油佐剂制备出的二联苗及三联苗均为乳白色,剂型为油包水型,性状稳定,NL油佐剂疫苗的黏度低于10号白油佐剂疫苗;用两种油佐剂疫苗接种SPF鸡后,均未出现任何局部及全身不良反应;NL白油佐剂疫苗诱导产生的ND、IB、AI(H9)及EDS HI抗体滴度均高于10号白油佐剂疫苗,提高幅度为0.2 log2~2.2 log2;NDV及AIV(H9)强毒攻击后,两种不同油佐剂疫苗免疫组鸡均10/10保护,NDV攻毒对照组全部死亡,AIV(H9)攻毒对照组鸡分毒全部呈病毒阳性。  相似文献   

9.
为了掌握重组禽流感(H5+H7)二价灭活疫苗在鸡中的免疫效果,分别在东莞选取5个规模养殖场和14个镇(街)散养鸡免疫疫苗21天后,采集血清样品进行H5亚型和H7N9亚型禽流感病毒抗体检测,结果为H5亚型禽流感病毒(Re-8株)抗体阳性率为79.23%(683/862),H7N9亚型禽流感病毒抗体阳性率为64.15%(553/862)。结果表明,该疫苗在鸡群中能够产生比较好的应答,H5亚型禽流感病毒(Re-8株)抗体阳性率均能达到免疫规范要求的70%以上。H7N9亚型禽流感病毒抗体阳性率,在种鸡场和肉鸡场能到70%以上,但散养鸡抗体阳性率较低,有不能抵御野毒侵袭的风险,还需要进行二次免疫。  相似文献   

10.
为了研究湘西自治州规模化鸭场的高致病性禽流感的免疫情况和潜在的感染风险,笔者于2008年从湘西自治州各县市采集了规模化鸭场血清标本共480份,采用血凝试验和血凝抑制试验对4个免疫了H5亚型禽流感病毒灭活疫苗的规模化鸭场的不同日龄家鸭进行了H5和H7亚型禽流感病毒抗体的检测。结果表明:4个规模化鸭场H5亚型禽流感病毒抗体合格率分别为65.56%(59/90)、67.78%(61/90)、53.33%(48/90)、47.78%(43/90),说明规模化鸭场的H5亚型免疫抗体水平还有待提高,以对家鸭提供确实的保护;H7亚型禽流感病毒抗体阳性率为0,规模化鸭场没有H7亚型禽流感病毒感染。  相似文献   

11.
本试验旨在建立一种能同时快速检测H9亚型禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)和鸭坦布苏病毒(duck Tembusu virus,DTMUV)的二重PCR检测方法。根据GenBank中H9亚型 AIV的HA基因和DTMUV的NS2基因序列,分别设计了1对针对H9亚型AIV和DTMUV保守基因序列的引物。利用这2对引物对混有H9亚型AIV和DTMUV的cDNA模板进行二重PCR扩增,得到了2个大小与试验设计相符的特异性扩增条带。利用本试验建立的二重PCR对其他鸭病病原体进行PCR扩增,结果均为阴性。利用这2对引物对H9亚型AIV和DTMUV进行敏感性检测,结果显示最低检测极限分别为6.3和 6.6 pg。对临床235份样品检测的结果表明该二重PCR检测方法具有快速、敏感、特异等优点,适用于临床检测的应用。  相似文献   

12.
H9亚型禽流感在我国家禽中广泛流行,给养禽业造成巨大经济损失的同时,也严重威胁着公共卫生安全。H9亚型禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)具有高度遗传变异性,导致流行株和疫苗株之间抗原匹配性差,从而影响疫苗的临床保护效果,急需研发一种高效、具有交叉保护性的通用型H9亚型禽流感疫苗。马赛克疫苗是针对遗传多样性病原体设计,通过整合所有抗原序列获得一条抗原表位覆盖最广泛的嵌合蛋白,并制备疫苗。本研究参考mosaic疫苗设计原则,设计、优化并合成了一条H9亚型禽流感病毒的mosaic血凝素(hemagglutinin,HA)基因序列,采用反向遗传操作技术,以H1N1亚型流感病毒PR8株为骨架,以mosaic H9HA序列替换PR8株的HA片段,获得重组病毒rPR8-HAm/H9。将其制备为灭活疫苗并免疫SPF雏鸡,监测抗体水平、攻毒保护效果,评价其交叉保护效果。结果表明,重组病毒rPR8-HAm/H9灭活疫苗免疫SPF雏鸡,可诱导机体产生较高水平的HI抗体和中和抗体,可显著抑制攻毒后病毒的脱落,对H9N2 AIV JM0305株的攻毒保护率为80%。rPR8-HAm/H9灭活疫苗可以对异源H9N2 AIV JM0305株产生较好的交叉攻毒保护,为研发基于马赛克技术的禽流感通用疫苗提供了前期基础。  相似文献   

13.
将H9亚型禽流感病毒尿囊液,经甲醛灭活,以矿物油为佐剂制成油乳剂灭活疫苗,疫苗物理性状良好,接种鸡无不良反应,接种疫苗后14d,食流感病毒HIGMT(Log2)为7.7-7.8,21d为8.9-9.3,于接种疫苗后14、21、30、60d,攻击同型禽流感病毒,接种疫苗鸡全部获得保护,现地实验取得了良好地免疫效果。证明制备的油乳剂灭活疫苗安全,免疫原性良好。  相似文献   

14.
为建立H9N2亚型禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)免疫层析快速检测技术,本研究以差速离心法纯化H9N2亚型AIV免疫BALB/c小鼠,将免疫小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0进行细胞融合和HAT选择性培养;以H9N2亚型AIV感染MDCK细胞建立异源免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA)的单克隆抗体检测方法,通过对杂交瘤细胞的IPMA筛选和连续克隆化筛选鉴定抗H9N2亚型AIV中和性单克隆抗体;以胶体金标记HA单克隆抗体,配对HA单克隆抗体和羊抗小鼠IgG为检测线和质控线,制备H9N2亚型AIV快速检测试纸条,测定其特异性和敏感性。结果显示,获得了11株稳定分泌抗H9N2亚型AIV单克隆抗体的杂交瘤细胞,其单克隆抗体腹水IPMA效价在1.28×10-4至2.56×10-5之间。单克隆抗体3A2、5H6、6B8、7E10和9G12血凝抑制试验(HI)显示血凝抑制活性,其(HI)效价在6log2~9log2之间。单克隆抗体3A2、6B8和9G12在病毒中和试验中对H9N2亚型AIV有显著病毒中和活性,中和效价分别1∶6 400、1∶25 600和1∶25 600。Western blotting结果提示,该中和单克隆抗体识别HA蛋白线性抗原表位。利用配对单克隆抗体3A2和9G12研制的H9N2亚型AIV检测试纸条检测H9N2亚型AIV尿囊液的效价为9log2,灵敏度与经典血凝试验(HA)相当,与其他亚型AIV (H1、H3、H5、H7),以及新城疫病毒和鸡传染性法氏囊病病毒等相关病毒均无交叉反应。本研究制备了具有病毒中和活性的抗H9N2亚型AIV单克隆抗体,并初步研制了H9N2亚型AIV检测试纸条,为H9N2亚型AIV新型疫苗研制和快速检测奠定良好的研究基础。  相似文献   

15.
检测禽流感病毒抗体的重组核蛋白间接ELISA方法的建立   总被引:9,自引:3,他引:9  
以大肠杆菌系统表达的H9N2亚型禽流感病毒(AIV)核蛋白(NP)为抗原,建立了禽流感间接酶联免疫吸附试验抗体检测技术(NP—ELISA)。对263份待检血清(包括临床收集的243份血清和20份H9N2亚型AIV免疫鸡阳性血清)进行检测,NP—ELISA与琼脂免疫扩散试验(AGP)的总符合率为83.3%,与血凝抑制试验(HI)的总符合率为92%。特异性试验表明,NP—ELISA方法可以检测H5、H7和H9亚型AIV特异性抗体,检测为阳性的血清样品能够被阳性鸡胚尿囊液阻断。敏感性试验证实,NP—ELISA最早可以检测鸡感染后7d的血清样品,并于感染后10d确定100%血清阳性,而AGP检测直到首免后21~28d才出现部分血清阳性,HI检测直到10~14d才出现部分血清阳性,并且NP-ELISA要比HI敏感4~40倍。试验证明,NP—ELISA是检测AIV血清型特异性抗体的一种特异、敏感、快速、经济的血清学检测技术。  相似文献   

16.
为探讨番鸭呼肠孤病毒(MDRV)和H9亚型禽流感病毒(H9 AIV)共感染对番鸭法氏囊免疫应答能力的影响,本研究将MDRV或/和H9 AIV人工感染8日龄番鸭,观察法氏囊病理组织学变化,检测法氏囊B细胞增殖能力及RE-5 AIV疫苗免疫后抗体变化规律.结果显示:H9 AIV感染组番鸭发病率低(10%),无死亡,法氏囊无病理变化,显著抑制番鸭法氏囊细胞增殖反应;MDRV感染番鸭发病率70%,死亡率40%,生长迟缓,法氏囊病理变化为萎缩,淋巴细胞减少,局部出现范围较小的坏死灶,番鸭法氏囊细胞增殖反应下降;共感染组番鸭发病率100%,死亡率80%,番鸭生长迟缓,法氏囊萎缩和淋巴细胞增殖反应下降程度均比单一病毒感染组严重.病毒感染使番鸭对RE-5 AIV疫苗免疫应答能力明显下降,其共感染组抑制抗体应答程度最严重;共感染组的病毒检出时间早于并且检出率大于单一病毒感染组.表明MDRV与H9 AIV共感染在番鸭免疫应答抑制方面有协同作用.  相似文献   

17.
Avian influenza viruses (AIV) of the H9 subtype cause serious health problems in chickens, resulting in great economic losses to the poultry industry worldwide. The killed vaccine (KV) against H9 subtype AIV has been widely used in China since 1998 but has been linked with side effects in chickens and only partial protection. A few studies have demonstrated the immunostimulatory effects of the hemagglutinating virus of Japan envelope (HVJ-E) in cancer therapy. In this study, the adjuvant efficacy and the protective effects of HVJ-E, in combination with H9N2 AI KV against AIV were evaluated. The maturation of murine dendritic cells treated by HVJ-E was verified by FACS in the current experiment, then the antibody hemagglutination inhibition (HI) titers and cytokines and the post-challenge virological profiles (oropharyngeal and cloacal virus shedding) were investigated to define the immune responses in chickens. Our findings indicate that HVJ-E could induce dendritic cell (DC) maturation in mice. Injection of HVJ-E in chickens resulted in raised levels of IFN-β and IFN-γ being present in sera suggesting a stimulatory effect in these animals. The antibody responses to AIV of chickens inoculated with HVJ-E adjuvanted killed H9-AIV were higher than those of chickens inoculated with oil adjuvanted H9-HIV. Furthermore, although inoculation of either HVJ-E or oil adjuvanted AIV reduced virus shedding following challenge, compared to controls, HVJ-E adjuvanted AIV was more effective in reducing shedding than oil adjuvant.  相似文献   

18.
为弄清上海地区活禽批发市场中H9禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)的流行情况及鸡群的免疫情况,2009年对上海三大活禽批发市场进行了采样监测。采用HI试验检测H9 AIV抗体、荧光RT-PCR试验和鸡胚接种分离鉴定病毒。共采集110批次1 646份血样和喉头泄殖腔棉拭样品,平均抗体合格率为60.27%,分离到H9病毒134株,其中4-6月和9-11月为全年中病毒分离的2个高峰期(样品带毒率均超过了10.00%),明显比其它月份要高(其他月份均低于5.00%),样品带毒率平均为8.14%。不同市场、不同地区采集的样品其抗体合格率和样品的带毒率也存在一定的差异。在30批分离到病毒的样品中,13批次已免疫H9N2油乳剂灭活苗且抗体合格率均大于70.00%的样品中分离到45株病毒(45/195),其中6批次抗体合格率达到100%的样品中也分离到了病毒(8/90),但带毒率明显比未经疫苗免疫的样品(79/255)低。调查结果表明养殖户对肉鸡群H9N2油乳剂灭活苗免疫重视程度不够,鸡群中带毒现象较普遍。疫苗免疫后能产生较高的免疫抗体,且抗体能减轻临床症状,降低带毒率,但不能完全阻止病毒复制,存在高抗体下带毒现象。  相似文献   

19.
不同剂型的佐剂对疫苗的免疫效果有较大的影响,本试验旨在对比不同剂型佐剂的新城疫-禽流感(简称"新-流")二联灭活疫苗的免疫效果,从而为生产上选择最佳剂型佐剂应用于新城疫-禽流流感二联灭活疫苗提供依据。分别将油包水型、水包油型、水包油包水型佐剂与新城疫及禽流感灭活抗原乳化成不同剂型的新城疫-禽流感(H9亚型,HP株)二联灭活疫苗,将这三种不同剂型的新城疫-禽流感(H9亚型,HP株)二联灭活疫苗分别免疫一组7日龄SPF鸡。每羽颈部皮下注射0.2 m L,同时设一组未免7日龄SPF鸡作为对照组,各免疫组与对照组SPF鸡于免疫组免后6、10、15、21、28、35 d进行采血,检测新城疫与禽流感抗体水平。结果表明:免疫油包水型疫苗组SPF鸡免疫后新城疫与禽流感抗体上升最快,在免后10、15、21、28、35 d的新城疫与禽流感抗体也最高,其次是免疫水包油包水型的,而免疫水包油型疫苗组的SPF鸡新城疫与禽流感抗体上升最慢,而且在免后10、15、21、28、35 d的新城疫与禽流感抗体也最低。此外,从各免疫组可以看出,在免后6 d时新城疫抗体已开始产生,在1log2以下,而禽流感抗体仍未产生。可见免疫新-流二联苗后,新城疫抗体比禽流感抗体更早产生,油包水型新-流二联苗的免后抗体高于水包油包水及水包油型,而且能持续刺激机体产生高水平抗体,更具优势。  相似文献   

20.
In 2013,one case of suspected H9 subtype avian influenza occurred in a chicken farm of Jilin povince.Clinical samples were collected from the diseased farm,inoculated into the allantoic cavity of 9-day-old SPF chicken embryo,and then one strain of virus was isolated.The results of HA test,HI test and molecular biology test all showed that the isolate belonged to H9 subtype avian influenza virus (AIV).The HA cleavage site of the isolate was RSSR↓GLF,which was consisted with the molecular characteristic of low pathogenic AIV.The HA peptide chain had 9 potential glycosylation sites which were same as other isolates of recent years.The isolate had 8 receptor binding sites,including 234 receptor binding site by glutamine (Q) mutating into threonine (T).The phylogenetic tree revealed the isolate belonged to Eurasian lineages and it had far genetic relationship with the earliest domestic isolate (A/Chicken/Beijing/1/94(H9N2)),but had close genetic relationship with the representative strain (A/Chicken/Guangxi/55/2005(H9N2)) of major epidemic branch since 2007.We prepared an inactivated oil-emulsion vaccine of the isolate,and then vaccinated SPF chicken.21 days after vaccination,the HI titer of chicken serum antibody reached up to 10log2.The result suggested the isolate had good immunogenicity.  相似文献   

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