猪支气管败血波氏杆菌的分离鉴定     

《中国兽医杂志》2016,(4)

从河北廊坊养猪场采集有明显呼吸道症状的猪肺脏进行病原菌分离培养,通过对分离菌株进行形态观察、培养特性、16S r RNA测定,以及支气管败血波氏杆菌fla及Dnt基因PCR鉴定,确定成功分离鉴定到4株猪支气管败血波氏杆菌。药敏试验结果显示,分离菌株对庆大霉素、替米考星、氟苯尼考、恩诺沙星及头孢吡肟高度敏感。对小鼠具有一定致病性。  相似文献   

兔支气管败血波氏杆菌的分离与鉴定     

李峰  沈志强  管宇  刘金华 《畜牧与兽医》2008,40(9)

应用16S rRNA基因测序法对兔支气管败血波氏杆菌标准株和分离的5株波氏杆菌进行了16S rRNA基因序列分析。结果表明,5株分离菌与标准株同源性在99.4%~100%之间。后经Blast分析各分离株与已发表的32株波氏杆菌同源性均在98%以上。进一步的生化试验鉴定表明标准株与分离菌株生化反应结果均符合兔支气管败血波氏杆菌生化反应特征。综合各种试验结果表明5株分离菌株均为兔支气管败血波氏杆菌。  相似文献   

应用23S rRNA对禽波氏杆菌分离株的进化分析     

谭燕玲  朱瑞良  马荣德  王慧  魏凯  王新建  郭文龙  朱明华 《中国兽医学报》2011,31(4)

通过PCR扩增分离保存的8株禽波氏杆菌、3株兔支气管败血波氏杆菌及1株猪支气管败血波氏杆菌菌株的23S rRNA基因的片段(710bp),分别克隆到载体pMD18-T后测序。利用BLAST工具进行同源性搜索;用DNAStar分析软件进行同源核苷酸序列的多重比较分析并构建禽波氏杆菌菌株的系统生物进化树。结果显示,8株禽波氏杆菌核苷酸序列之间同源性为99.2%～99.7%,与GenBank中收录的NC_010645株禽波氏杆菌核苷酸序列同源性为92.4%～92.5%,与兔支气管败血波氏杆菌和猪支气管败血波氏杆菌的核苷酸序列同源性均为98.5%～99.2%。国内分离的禽波氏杆菌菌株和支气管败血波氏杆菌菌株均与国外分离菌株在遗传基因上有一定的差异。结果表明,23S rRNA序列分析可以作为鉴定禽波氏杆菌的一种快速简便的方法。  相似文献   

动物园野生动物支气管败血波氏杆菌的分离鉴定与系统发育树的构建   总被引：1，自引：0，他引：1  

李伟杰  赵耘  杜昕波  陈永林  康凯  陈敏 《中国兽医学报》2010,30(3)

采用Biolog和16SrRNA基因序列分析法对分离自北京动物园的8株支气管败血波氏杆菌进行了鉴定。菌株经纯化培养,用Biolog微生物鉴定系统进行了鉴定,结果表明,8株菌株为支气管败血波氏杆菌。菌株经纯化培养,采用菌落PCR方法进行16SrRNA基因序列扩增,扩增产物纯化后直接进行测序。序列经人工校对后用ClustalX1.83软件进行比对分析,最后用Mega3.1软件构建系统发育树,系统发育分析结果表明,8株菌株与支气管败血波氏杆菌DSM10303的同源性达到了99.9%,并在同一个分支内。  相似文献   

猪支气管败血波氏杆菌的分离鉴定和药敏试验     

徐引弟  王治方  朱文豪  梁跃  郭成留 《动物医学进展》2010,31(8):110-112

从2006年-2009年河南省发生的猪高热综合征的168家规模化猪场456份病料中分离出革兰阴性小杆菌,通过培养特性、生化试验和PCR检测,结果鉴定出25株猪支气管败血波氏杆菌。结果显示,所分离的猪支气管败血波氏杆菌对小鼠均有毒力,对阿齐霉素、环丙沙星、阿米卡星敏感。  相似文献   

禽波氏杆菌分离株的16S rRNA基因序列分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

刘红芹  朱瑞良  胡晓娜  王伟  李新苍  毕建敏  刘红珍 《中国兽医学报》2008,28(1):32-34

采用PCR方法对本实验室分离保存的10株禽波氏杆菌、3株兔支气管败血波氏杆菌及1株猪支气管败血波氏杆菌菌株,扩增其16SrRNA基因的5′端片段（783bp）,并测定所得片段的DNA序列。用DNAStar分析软件将所获得的序列与GenBank中的禽波氏杆菌序列进行比较,由此构建禽波氏杆菌菌株的系统发育树。结果显示,10株禽波氏杆菌核苷酸序列与GenBank中收录的AF177666株禽波氏杆菌核苷酸序列的同源性为82.0%～82.5%,与兔支气管败血波氏杆菌和猪支气管败血波氏杆菌核苷酸序列的同源性均为99.2%～99.9%,其中P9（山鸡波氏杆菌）、P11（兔支气管败血波氏杆菌）与P14（猪支气管败血波氏杆菌）分别发生1个核苷酸的缺失。本试验结果表明,16SrRNA序列分析是鉴定禽波氏杆菌的一种快速而准确的方法。  相似文献   

应用16S rRNA基因测序法鉴定兔支气管败血波氏杆菌的研究     

李峰  管宇  沈志强  刘金华  林初文 《中国养兔杂志》2008,(1):22-23,28

应用16S rRNA基因测序法对兔支气管败血波氏杆菌Bb-1株进行了16SrRNA基因序列分析。结果表明,能够扩增出与预期结果相符合的片断。经Blastn比较,分离菌与兔支气管败血波氏杆菌RB50株（BX640449）同源性为99．8％。进一步的生化实验鉴定表明,Bb-1株生化反应结果符合兔支气管败血波氏杆菌生化反应特征。综合各种实验结果表明,分离菌Bb-1株为兔支气管败血波氏杆菌。  相似文献   

猪源支气管败血波氏杆菌河南株的分离鉴定   总被引：1，自引：0，他引：1  

张家明  左松  陶家权  张许科 《中国畜牧兽医》2010,37(7):146-148

从河南省多个养猪场采集126份有呼吸道症状猪的肺脏组织样品或鼻拭子,进行支气管败血波氏杆菌的分离鉴定。根据细菌培养特性、革兰氏染色镜检、生化试验和PCR鉴定,确认分离出11株支气管败血波氏杆菌(Bordetella bronchisepti-ca,Bb)。对Bb最重要的3种毒力因子fha、prn、dnt基因进行PCR检测,除2株为prn基因阴性外,其它PCR结果均为阳性。红细胞凝集试验显示各菌株均能不同程度的凝集猪和羊的红细胞。乳鼠皮肤坏死试验表明,各菌株均能不同程度的造成乳鼠皮肤坏死。通过小鼠毒力试验,筛选到4株强毒菌株(HN0710、HN0806、HN0922、HN0827)。  相似文献   

副猪嗜血杆菌的分离鉴定与药敏试验   总被引：6，自引：3，他引：3  

薛国聪  徐成刚  涂玉蓉  蔡绍鑫  阳艳林  蔡丽丽  郑俏伟  张建民  廖明  任涛 《中国畜牧兽医》2010,37(1):134-137

对广东15个送检的疑似猪传染性副猪嗜血杆菌病的病猪样品,用TSA培养基进行细菌的分离,并对分离菌株进行细菌的形态观察、培养特性和生化试验鉴定,以及用副猪嗜血杆菌16S rRNA基因的特异性引物进行PCR鉴定。试验结果表明,有7株分离菌株扩增出了821 bp的特异性目的条带,结合形态观察、培养特性和生化试验鉴定,结果表明成功分离到了7株副猪嗜血杆菌;药敏试验结果显示,分离菌株对氨苄西林、多粘菌素、庆大霉素等药物较敏感。  相似文献   

兔支气管败血波氏杆菌的分离鉴定及耐药基因检测     

王晓芳  刘燕  肖琛闻  鲍国连  崔言顺  李建亮  季权安  韦强 《中国畜牧兽医》2015,42(3):544-548

本试验旨在了解近年来浙江省兔支气管败血波氏杆菌的感染情况及耐药状况,指导合理用药,检测细菌的耐药基因,探究其耐药机理.根据细菌形态、培养特性、生化试验,结合PCR法对分离菌株进行鉴定;K-B纸片扩散法检测细菌对18种常用抗生素的耐药率;设计耐药基因特异性引物,PCR法扩增耐药基因,并进行测序分析.结果显示,分离鉴定出2012-2014年22株兔支气管败血波氏杆菌;药敏结果显示,分离菌对青霉素G、头孢拉定、链霉素、林可霉素、克林霉素、甲氧嘧啶耐药严重,对多黏菌素B、左氟沙星、强力霉素、四环素等药物敏感,耐β-内酰胺类药物的细菌中检测到耐药基因bla_TEM.结果表明,兔支气管败血波氏杆菌是引起兔呼吸道疾病的主要病原菌,分离菌多重耐药,耐药率较高,检测到的耐药基因与耐药表型相符.  相似文献   

白僵菌生防菌株Bb10和4株家蚕来源白僵菌分离株的生物学特性研究   总被引：2，自引：2，他引：0  

米红霞  刘吉平 《蚕业科学》2010,36(6)

为探明用于生物防治的白僵菌菌株和家蚕来源白僵菌的关系,用马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)培养基对来自广西壮族自治区的白僵菌生防菌株Bb10和收集自广西象州、宜州、环江等蚕区的4株家蚕白僵菌分离株进行分离鉴定,并对菌株的生物学特性和毒力进行比较。菌株的鉴定结果表明:象州寺村镇的家蚕白僵菌Bb9和广西生防白僵菌Bb10均为卵孢白僵菌;象州中平镇的家蚕白僵菌Bb3和环江家蚕白僵菌Bb12为球孢白僵菌;宜州家蚕白僵菌Bb11为小球孢白僵菌。上述5株白僵菌的菌落形态、营养生长量、产孢量等生物学性状及对家蚕的毒力存在差异。生长最快的是Bb9菌株和Bb10菌株,且二者的菌落形态均呈棉絮状,但Bb10菌株的分生孢子较Bb9菌株的分生孢子要大很多;产孢量最高的是Bb10菌株和Bb11菌株;Bb3菌株对家蚕的毒力最强,Bb9菌株和Bb10菌株的毒力相对较弱。上述结果暗示广西蚕区白僵病的病原来源非常复杂,部分蚕区的家蚕白僵菌与生防用白僵菌有一定程度的相似性,可作为家蚕白僵病的溯源和防控依据。  相似文献   

Pathogenicity of endophytic entomopathogenic fungi to Ornithodoros erraticus and Ornithodoros moubata (Acari: Argasidae)     

Zabalgogeazcoa I  Oleaga A  Pérez-Sánchez R 《Veterinary parasitology》2008,158(4):336-343

The argasid ticks O. erraticus and O. moubata are of great medical and veterinary importance because they are vectors of the African swine fever virus and several species of human relapsing fever borreliae. Biocontrol of these ticks using entomopathogenic fungi has not been previously reported. We examined the pathogenicity to different developmental stages of these two argasids of six strains of the fungal species Beauveria bassiana (strains Bb1764 and Bb2157), Lecanicillium lecanii (strains Ll586, Ll618 and Ll3047) and Tolypocladium cylindrosporum (strain Tc3398). Three strains, Bb1764, Bb2157, and Tc3398, caused in Spanish O. erraticus mean mortality rates between 34.4% and 62% in 14-28 days post-inoculation. Additionally, Bb2157 also induced in African O. moubata mean mortality rates of 31.9%. The remaining strains caused lower mortality rates and were not considered effective. This is the first study in which some strains of entomopathogenic fungi are found to be effective against argasid ticks of the genus Ornithodoros, and its results might justify further efforts towards the application of entomopathogenic fungal strains as anti-argasid biocontrol agents.  相似文献   

用黄粉虫诱集法分离球孢白僵菌及对桑天牛幼虫高毒力菌株的筛选   总被引：11，自引：5，他引：6  

李会平  黄大庄  王晓红  郑建伟 《蚕业科学》2006,32(3):320-323

利用黄粉虫诱集法从不同土壤中分离到球孢白僵菌共9株,分离率为45%,并对桑天牛幼虫进行了生物测定。结果表明,不同菌株的致病力存在差异,其中以Bb00菌株的致病力最强,校正死亡率及感染率分别为100%和86.3%,致死中时LT50为4.13 d,致死中浓度LC50为3.05×106/mL。  相似文献   

猪萎缩性鼻炎支气管败血波氏杆菌PCR检测方法的建立   总被引：2，自引：0，他引：2  

袁翠霞  罗阿东  徐景峨  唐源  李建华  文明  李永明  周碧君 《中国预防兽医学报》2007,29(11):896-899

对表现猪萎缩性鼻炎临床症状的猪群中分离得到的34株支气管败血波氏杆菌(Bordetella bronchiseptica,Bb),采用针对Bb flagellum gene的一对引物进行PCR扩增,结果所有分离物均能扩增出237bp特异性DNA条带,与传统生化鉴定结果相一致,且其最小检出量为0.64pg;而猪鼻腔和肺组织中常见的多杀性巴氏杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽胞杆菌、铜绿假单胞菌、变形杆菌及大肠埃希氏菌均未能出现任何DNA条带。这表明,本试验建立的PCR方法具有特异性强、灵敏度高、可靠性好等特点,可用于猪萎缩性鼻炎的临床诊断。  相似文献   

兔支气管败血波氏杆菌PRN基因缺失突变株的构建及特性研究   总被引：1，自引：1，他引：0  

李洪广  王芳  姜平  范志宇  胡波 《畜牧兽医学报》2012,43(2):299-305

利用自杀性质粒构建兔支气管败血波氏杆菌百日咳黏附素(PRN)缺失突变株以研究PRN在支气管败血波氏杆菌(Bb)致病机理中的作用,同时为支气管败血波氏杆菌病减毒活疫苗的研究提供理论依据.PCR扩增出PRN1(PRN上游基因)和PRN2(PRN下游基因)2个目的基因片段,运用基因重组技术将庆大霉素抗性基因(GM)连接到PRN1和PRN2之间,将连接好的基因片段克隆到pMEG-375自杀性载体中,构建自杀性载体pMEG375-PRN1-GM-PRN2,将其转化到宿主菌SM-10中,通过宿主菌SM-10与受体菌Bb固相滤膜交配,自杀性载体转移到受体菌,根据同源重组原理,抗性筛选得到基因缺失突变株,命名为Bb(△PRN).对突变株Bb(△PRN)与野生株WT进行了遗传稳定性、生长特性、溶血特性、细胞黏附特性、毒力、免疫保护性等比较研究.结果表明:Bb(△PRN)具有遗传稳定性;与野生株相比,突变株生长速度较慢,毒力有所下降,溶血活性及对Hep-2细胞的黏附能力没有明显变化;小鼠免疫原性试验结果显示,突变株免疫小鼠后可以产生强有力的免疫力,能够抵抗野生株的攻击.Bb(△PRN)突变株构建成功并具有良好的免疫原性,为支气管败血波氏杆菌病减毒活疫苗的研究奠定了基础.  相似文献   

Activation of bovine monocytes and neutrophils by the Bb fragment of complement factor B: demonstration by the uptake of 3H-deoxyglucose.   总被引：2，自引：2，他引：0       下载免费PDF全文

M S Sethi  H Tabel    V Misra 《Canadian journal of veterinary research》1990,54(1):106-112

The Bb fragment is the enzymatically active split product of bovine complement factor B. The Bb fragment was obtained after zymosan treatment of fresh bovine serum and fractionation of the treated serum, first over diethylaminoethyl-Sephacel and then over an affinity column made up of monoclonal antibody to bovine Bb, coupled to cyanogen-bromide-activated Sepharose. Purified Bb has a molecular weight of 64,000, as determined by sodium dodecyl sulphate-polyacrylamide gel electrophoresis. The ability of purified Bb to activate phagocytes was assessed. The activation assay was based on the principle that the primary source of energy for the phagocytes is obtained from glucose. 3H-deoxyglucose, a nonmetabolizable analogue of glucose, was used to obtain the quantitative measurement of the activation process. The activation by Bb was shown by the uptake of the labelled deoxyglucose in the phagocytic cells and was comparable to the activation caused by phorbol myristate acetate and N-formyl-L-methionyl-L-leucyl-L-phenylalanine, run in parallel. These data showed that fragment Bb activates bovine monocytes and neutrophils and also suggested that, when generated after complement activation, Bb may stimulate monocytes and neutrophils for enhanced phagocytosis.  相似文献   

规模化猪场传染性萎缩性鼻炎病原学调查与分析     

李国江  郑伟  刘彪  宋英华  尹柏双 《中国畜牧兽医》2012,39(11):184-186

本试验对吉林部分地区规模化猪场进行猪传染性萎缩性鼻炎病原学调查。采集吉林不同地区6个规模化猪场阳性猪鼻腔黏液148份,进行病原菌的分离与鉴定。结果表明,148头猪中有84头被支气管败血波氏杆菌感染,占56.76%;被产毒素多杀巴氏杆菌感染53头,占35.81%;混合感染的11头,占7.43%。结果提示,吉林地区规模化猪场中猪传染性萎缩性鼻炎多以支气管败血波氏杆菌感染为主,混合感染程度轻微。  相似文献   

A serological study of exposure to arthropod-borne pathogens in dogs from northeastern Spain     

Solano-Gallego L  Llull J  Osso M  Hegarty B  Breitschwerdt E 《Veterinary research》2006,37(2):231-244

There is limited information regarding the prevalence of many vector borne pathogens in Europe and especially in Spanish dogs. We investigated 206 sick and 260 clinically healthy dogs from three different regions in northeastern Spain for antibodies to Rickettsia conorii (Rc), Ehrlichia canis (Ec), Anaplasma phagocytophilum (Ap), Bartonella henselae (Bh), Bartonella vinsonii subsp. berkhoffii (Bvb), Leishmania infantum (Li) and Borrelia burgdorferi (Bb) and for antigen of Dirofilaria immitis (Di). Total prevalences were the following: Rc (56.4%), Li (30%), Ec (16.7%), Bh (16.8%), Ap (11.5%), Bvb (1.07%), Di (0.6%) and Bb (0.6%). Seroprevalences for Rc, Ec, Ap, Bh, and Bvb and Bb and Di antigens were similar among the three different study sites. The Ec seroprevalence, as determined by Snap 3DX, was statistically lower in dogs from Mallorca (0%) than Tarragona (16%) and Barcelona (5%) (P < 0.0001). Detection of Rc antibodies was associated with seroreactivity to Ec and Ap antigens (P = 0.018 and P = 0.002, respectively). IFA Ec antibodies were associated with Ap seroreactivity (P < 0.0001). There was no association between the clinical status, sex, time of the year when samples were collected, life-style or exposure to fleas or ticks and a positive test result for Ec, Bh, Bvb, or Bb antibodies or Di antigens. Li seroreactivity was associated with illness and living outdoors (P < 0.0001, P = 0.029; respectively), Rc seroreactivity with the male gender (P = 0.028) and Ap seroreactivity with living outdoors (P = 0.045). This study indicates that exposure to Rc, Li, Ec or related Ehrlichia spp., Bh and Ap or a related spp., is common whereas Di, Bb and Bvb is uncommon among dogs from the Mediterranean basin. We also provide serological data that suggests the existence of a novel Ehrlichia species on Mallorca island.  相似文献   

大河乌猪血浆胆固醇脂转移蛋白基因多态性与 生产性能的相关性分析     

李福泉  杨文  郭斌  霍金龙  史宪伟 《中国畜牧兽医》2013,40(4):167-173

试验应用PCR-RFLP技术对云南培育品种大河乌猪4代(F4)、5代(F5)和6代(F6))共334头个体的血浆胆固醇脂转移蛋白(cholesteryl ester transfer protein,CETP)基因内含子1436 bp进行扩增,用限制性内切酶AvaⅡ对其酶切可得到3种基因型:BB、Bb和bb,F4、F5、F6都以b等位基因为优势等位基因,其等位基因频率分别为0.5821、0.6042和0.6885。取不同基因型纯合子样品进行测序,共发现7个单核苷酸多态位点(SNPs),其有3个为转换,4个突变为颠换,多态位点分别位于19、69、132、175、203、224、234 bp处。应用最小二乘分析不同基因型和不同性别的基因型对生长性状(初生重、45日龄重、4月龄体重、6月龄体重、体高、体长、管围、背膘厚)的影响。结果显示,F4代Bb和bb基因型个体体长显著高于BB基因型(P＜0.05);bb基因型6月龄管围显著高于BB基因型(P＜0.05),与Bb基因型个体间差异不显著(P＞0.05);F5代Bb和bb基因型个体初生重显著高于BB基因型(P＜0.05),两者之间差异不显著(P＞0.05);F6代bb基因型个体初生重、45日龄重显著高于BB基因型(P＜0.05),与Bb基因型个体间差异不显著(P＞0.05);其余性状不同基因型间无显著差异(P＞0.05)。另外,bb基因型雄性和雌性个体在初生重都存在显著差异(P＜0.05)。研究结果提示,CETP基因对猪生长性状(特别是初生重)存在一定影响;选择带有b等位基因的个体有望提高猪体质量相关的生长性状,该SNP可能是改良猪生长速度性状的重要分子标记位点。  相似文献