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121.
为了获得多杀性巴氏杆菌PurF蛋白及其多克隆抗体,通过PCR扩增了多杀性巴氏杆菌C51-17株purF基因,将其克隆到表达载体pPROEX-HTa中,构建重组表达质粒pHT-PurF,转化至大肠埃希菌BL21(DE3)感受态细胞中,经IPTG诱导表达。SDS-PAGE检测表明,获得重组蛋白分子质量约56.5ku,主要以包涵体形式存在;Western blot检测表明,表达的蛋白可与多杀性巴氏杆菌制备的高免血清发生特异性反应。将制备的重组蛋白免疫Balb/c小鼠制备多克隆抗体,ELISA检测血清抗体效价,结果显示制备的多克隆抗体滴度达到1∶128 000,Western blot表明可与多杀性巴氏杆菌PurF蛋白发生反应。本研究制备了多杀性巴氏杆菌的PurF蛋白及其多克隆抗体,为进一步研究PurF蛋白在多杀性巴氏杆菌致病中的作用奠定了基础。 相似文献
122.
金黄色葡萄球菌α-溶血素基因的克隆与序列分析 总被引：1，自引：0，他引：1
参考Gary S Gray和Michael Kehce在《传染与免疫》杂志上发表的关于金黄色葡萄球菌α溶血素蛋白的基因序列,设计合成1对引物,从分离自牛体的野生株金黄色葡萄球菌中提取细菌总DNA,对α溶血素蛋白基因进行PCR扩增,产物经琼脂糖凝胶电泳分析,呈现1条约960 bp的条带,回收纯化后,将其克隆至pMD18 T质粒载体中,进行核苷酸序列分析,然后与报道的α溶血素蛋白基因进行比较。结果表明:所鉴定的野生株金黄色葡萄球菌的α溶血素蛋白基因序列与报道的核苷酸的同源性高达99.99%以上,证实为金黄色葡萄球菌Wood 46株α溶血素蛋白基因。 相似文献
123.
牛源金黄色葡萄球菌凝固酶基因的分型 总被引：3，自引：0，他引：3
为了了解我国不同地区奶牛场金黄色葡萄球菌基因型的分布情况,采用凝固酶基因（Coa）扩增的分型方法,对在奶牛乳房炎奶样中所分离到的26株金黄色葡萄球菌进行了分型。结果显示,26株金黄色葡萄球菌共分为5个基因型,黑龙江省分离株以PCR 3型为主（10/16）。发现在同一牛群中的分离株可以存在相同的基因型,也可以存在不同的基因型;而不同牛群中的分离株也可属于同一基因型。这种结果提示,在某个或某些牛群中存在某一金黄色葡萄球菌的流行型,但也可能存在多个金黄色葡萄球菌的克隆。 相似文献
124.
125.
126.
本试验用Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ缓冲液（Ｔ）、ＰＢＳ缓冲液（Ｐ）、生理盐水（Ｓ）和２Ｍ尿素ＰＢＳ缓冲液（Ｕ）以热处理的方法提取大肠杆菌Ｋ９９和Ｆ４１菌毛抗原,并用硫酸铵盐析纯化Ｋ９９以及用１Ｎ醋酸滴定和氯化镁沉淀分别纯化Ｆ４１。根据ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳和蛋白质含量测定结果,四种缓冲液对Ｋ９９的提取量依次是Ｕ〉Ｓ〉Ｐ,而Ｔ检不出Ｋ９９;对Ｆ４１的提取量依次是Ｕ〉Ｔ〉Ｐ〉Ｓ。Ｋ９９纯化后取得了满意的纯化结果, 相似文献
127.
正金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)是一种常见的人畜共患性致病菌之一,可以引起多种组织器官感染,除常见的表皮粘膜感染,还可以导致肺炎、伪膜性肠炎和心内膜炎,严重时甚至会引发败血症、脓毒症等威胁生命的全身性感染~[1]。该致病菌在侵入机体后分泌多种毒力因子,其中肠毒素B(Staphylococcal enterotoxin B,SEB)最为常见,被摄入后引起发热、咳嗽、肌肉痛并导致呼吸窘 相似文献
128.
为了研究壳聚糖与EDTA的协同抗菌效果,采用体外药敏片扩散法和抑菌效应方法,测试了壳聚糖和EDTA联合应用后对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌的抑制效应,来考察EDTA对壳聚糖的抑菌增强效果。结果表明,与壳聚糖对照组相比,壳聚糖和EDTA联合应用能增强壳聚糖对白色念珠菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌的抑制杀伤作用,且对大肠杆菌的抑制杀伤效应更加明显。表明EDTA能够增强壳聚糖对细菌、真菌的抑制效应,为开发一种新型的抗菌剂提供了试验依据。 相似文献
129.
羊口疮(Orf)是由羊口疮病毒(ORFV) 引起的一种急性、接触性和高度嗜上皮性人畜共患的动物传染病,主要感染绵羊和山羊,有时威胁人类。本研究将ORFV(OV/HLJ/04株)纯化后作为试验材料,采用巨噬细胞系RAW264.7作为病毒细胞宿主,RAW264.7在LPS体外激活的情况下,接种ORFV,研究ORFV感染对巨噬细胞凋亡的影响。结果表明,用LPS处理的试验组巨噬细胞形态学改变较大,凋亡量也较大;而没用LPS处理过的试验组巨噬细胞变化则相对较少。Western blotting研究结果显示,细胞凋亡信号Caspase-3与甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)在24 h时对比,凋亡信号明显减弱,表明在24 h的巨噬细胞凋亡水平有所下降。 相似文献