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101.
马传染性贫血病病毒(equine infctious anemiavirus EIAV)导致马持续性感染和反复病毒血症,与人免疫缺陷病毒Ⅰ型(HIV-1)同属反转录病毒科慢病毒属,二者有很多相似的特性[2].EIAV是遗传结构最简单的慢病毒,其感染的潜伏期只有几天至几周,而且在EIAV感染过程中新的抗原变异株的出现与疾病的反复发作相关,这使EIAV有可能作为研究HIV-1分子致病机理及免疫机制的动物模型[3].  相似文献   
102.
猪瘟兔化弱毒疫苗株基因组的遗传变异分析   总被引:1,自引:0,他引:1  
参照已发表的猪瘟病毒基因组序列设计了9对引物,用RT-PCR从猪瘟兔化弱毒疫苗株细胞培养物中扩增得到了覆盖猪瘟病毒基因组全长的9个cDNA片段,将所得cDNA片段分别克隆至pMD18-T载体中,经测序和拼接后,获得了猪瘟兔化弱毒疫苗株基因组全序列。序列分析表明,猪瘟兔化弱毒疫苗株基因组全长12310个碱基,其5’非编码区(5'-NCR)和3'-NCR分别由373和239个碱基组成,在3’末端有富含T的碱基插入,其间为1个大的开放阅读框架,编码3898个氨基酸残基的多聚蛋白,与国内外已发表的另外7个猪瘟兔化弱毒疫苗株基因组全序列相比,核苷酸同源性为98.7%~99.9%,氨基酸同源性为98.6%~99.9%。基因组全序列比较显示,猪瘟兔化弱毒疫苗株基因组在遗传上相当稳定。  相似文献   
103.
利用猪流感病毒(Swineinfluenza virus,SIV)与伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)血清学阴性的4周龄断奶仔猪,对此前构建的表达SIVA/Swine/Inner Mogolian/547/2001(H3N2)血凝素(HA)基因的重组伪狂犬病病毒(rPRV-HA)进行了免疫效力评价。按每头105.0PFU rPRV-HA肌肉注射断奶仔猪(n=12),同时设Bartha-K61免疫对照组(n=5)和非免疫攻毒对照组(n=5)。免疫后35d用2×105.0TCID50的SIVA/Swine/Heilongjiang/74/2000(H3N2)进行强毒攻击。rPRV-HA免疫组免疫后7d均可检测到高滴度针对SIV的血凝抑制(HI)抗体,而所有对照组小猪仅在攻毒后7d才开始产生针对SIV的HI抗体;rPRV-HA免疫组在病理学保护方面明显优于对照组,支气管和肺泡冲洗液病毒分离结果显示,攻毒后7d rPRV-HA免疫组没有检测到病毒,而两个对照组可检测到病毒。以上试验结果表明,rPRV-HA免疫猪对同亚型SIV的攻击具有很好的保护作用。  相似文献   
104.
rNP-ELISA检测抗猪流感病毒抗体工作条件的优化   总被引:1,自引:0,他引:1  
猪流感是生猪养殖的国家普遍都会遇到的猪的呼吸道病[1]。虽然HI检测已经被作为可信赖的抗流感病毒抗体的检测方法[2]。但是,应用ELISA方法检测抗体具有明显的优势,对于待检血清不需要进行任何处理,而且也不必要对应用的抗原进行更换与选择[3]。试验采用的包被抗原为重组NP蛋白  相似文献   
105.
为了探讨牛疱疹病毒Ⅰ型(BHV—1)UL49基因编码的膜蛋白VP22对猪瘟病毒E2基因表达水平的影响,构建了单独表达E2蛋白的pcDNA3.1-E2及融合表达E2-VP22的pcDNA3.1 E2-UL49。将pcDNA3.1-E2与pcDNA3.1-E2-UL49分别转染293T细胞,间接免疫荧光试验结果显示,单独表达E2蛋白的细胞,其荧光主要固缩于核周,而融合表达E2-VP22蛋白的细胞在核周及细胞质内都有大量的荧光;Western-blot分析结果显示,VP22蛋白与E2蛋白都获得了表达.但融合了VP22蛋白的E2蛋白表达量要相对高一些(P〈0.01),表明VP22蛋白可以促进E2蛋白的表达。  相似文献   
106.
根据GenBank中的猪瘟病毒强毒和弱毒株基因组序列设计了1对针对猪瘟病毒的通用引物和2条分别针对猪瘟病毒强毒和猪瘟兔化弱毒疫苗株的特异性TaqMan水解探针,建立了一种能区分猪瘟病毒强毒和兔化弱毒疫苗株的复合实时荧光定量RT—PCR检测方法。结果显示,该方法能将我国大陆流行的不同基因亚群的猪瘟病毒强毒株与猪瘟兔化弱毒疫苗株完全区分开来,而不与其他猪源病毒发生非特异反应,分别可检测到初始模板中41.8和81.5个拷贝的病毒RNA,与已建立的复合RT-套式PCR的敏感性相近,两种方法对152份样品检测的符合率达96.9%~100%。通过对8份猪瘟兔化细胞疫苗效价的检测,证实本方法与兔体反应热测定法有一定的相关性,可用于猪瘟病毒强毒株和兔化弱毒疫苗的定量和鉴别检测。  相似文献   
107.
断乳仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)于1991年首次在加拿大报道。该病临床主要呈现渐进性体重减轻、呼吸困难、有些出现黄疸、间质性肺炎、肝炎、肾炎、淋巴结损伤等症状。加拿大的Ellis博士自具有PMWS症状的猪体分离到1株小病毒,且鉴定为圆环类病毒,实验证明,感染猪呈现的PMWS症状与圆环病毒间存在着密切的关系。该病毒被命名为Ⅱ型猪圆环病毒(PCV-2)。将PMWS在SPF仔猪中复制试验表明,可以检测到PCV-2的高滴度抗体,表明PMWS与PCV-2感染具有密切的关系。  相似文献   
108.
猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF6基因在毕赤酵母中的表达   总被引:2,自引:0,他引:2  
根据酵母表达系统的密码子偏爱性、poly(A)信号以及外源基因mRNA5’端的二级结构等特性 ,对猪繁殖与呼吸综合征病毒 (PRRSV)ORF6基因进行简并改造和人工合成 ,然后以正确的读码框架插入到分泌型酵母高效表达载体pPICZαA的α因子信号肽编码序列 3’端 ,构建成酵母转移载体 ,用化学方法转化受体酵母菌GS115 ,经PCR和酶切鉴定证实 ,目的基因已整合到重组酵母菌染色体中。对重组酵母进行诱导表达 ,并通过SDS_PAGE和Westernblot分析进行筛选 ,获得了一株高效表达目的蛋白的重组酵母菌 ,该重组蛋白具有免疫学活性 ,其表达水平可达 2 .0g/L ,而未经改造的ORF6基因则不表达  相似文献   
109.
乙型脑炎简称乙脑 ,是由日本脑炎病毒 (Japaneseen cephalitisvirus ,JEV)引起的一种急性传染性人畜共患病。此病首次于 1935年在日本马群中发生大流行 ,1937年日本学者证明其病原与当地人流行性脑炎病毒相同。随后 ,乙脑在我国、南亚、东南亚等地陆续发生。几十年来 ,乙脑流行给我国及周边国家造成了巨大的经济损失。Siraprapasiri等开展了实施乙脑疫苗免疫程序的风险投入和效益分析[1] 。我国未进行过乙脑感染的经济调查分析 ,猪群及其它动物流行病学、经济损失、免疫状况及防制现状均有待调查…  相似文献   
110.
为探索鸽新城疫的流行特点,在分子水平上阐明鸽新城疫病毒分离株与鸡新城疫病毒株之间的相互关系,我们用RT-PCR技术获得了分离株F0裂解位点附近300bp的基因片段,将其克隆到pUC19载体上得到一重组克隆pNDV21,序列分析表明,插入片段与鸡新城疫强毒Texas相应区域的同源性为87.7%;而与弱毒株D26/76及LaSota的同源性分别是91.7%和98%。其F0裂解点的氨基酸顺序为Gly-Arg-Gln-Gly-Arg。证明该分离株属于新城疫弱毒  相似文献   
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