应用聚合酶链反应检测山羊关节炎—脑炎病毒   总被引：1，自引：0，他引：1  

相文华  丁恩雨 《中国兽医学报》1995,15(3):243-245

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测了山羊关节炎－脑炎病毒（ＣＡＥＶ）人工感染山羊后其前病毒的动态学变化，从而阐明了ＣＡＥＶ与实验动物外周血单核细胞整合机制问题。  相似文献   

马流感病毒(A/equine/Qinghai/1/94)核蛋白基因的序列测定及同源性分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

杨建德  薛飞  王晓钧  朱远茂  赵立平  吕晓玲  沈荣显  相文华  李景鹏 《中国预防兽医学报》2003,25(2):96-98

根据已发表的马流感病毒核蛋白基因序列，设计并合成一对特异性引物，经反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）成功扩增出了我国马流感病毒（A/equine/Qinghai/1/94核蛋白基因。将该片段连接到PGEM-T-EASY载体并转化DH5α，提取阳性菌落的质粒径EcRo1酶切的PCR鉴定其大小为1.5kb左右，对其测序并进行分析发现，与A/Equine/Kentucky/2/86,A/Equine/Miami/1/63等关系较近，同源率为93.3%--93.4%，而与我国马流感吉林A/Equine/Jilin/1/89株关系较远，同源率仅为84.6%。  相似文献   

羊种布氏杆菌M5-90菌苗对绵羊附睾种布氏杆菌病预防效果的病理形态学观察     

褚桂芳  吴东来  尹训南  相文华  王继科 《中国兽医杂志》1992,(10)

由Br. ovis菌引起的公羊附睾炎可导致公羊生育能力下降、种用年限缩短、商品价值降低。据报道,我国从国外引进的种公羊中,已有由Br. ovis引起的布氏杆菌病的发生。但我国尚无针对Br. ovis  相似文献   

哈兽研马传贫琼扩抗原又销往蒙     

杨建德  相文华 《畜牧兽医科技信息》2003,19(8)

  相似文献   

鹅和番鸭细小病毒全基因克隆与序列分析     

张云  耿宏伟  郭东春  胡奇林  相文华  刘明  杨涛  林巍 《中国预防兽医学报》2008,30(6):415-419

本研究采用PCR技术扩增了鹅和番鸭全长细小病毒基因;其中鹅和番鸭细小病毒非结构蛋白基因（NS）全长为1884bp,编码627个氨基酸;结构基因（VP）全长为2199bp,编码732个氨基酸;序列分析表明：鹅和番鸭细小病毒NS之间的核苷酸和氨基酸同源性分别为80．9％～82．9％和89．5％～91．2％,而相应的鹅细小病毒之间的同源性为93．7％～99.8％和96．8％～99．7％,番鸭细小病毒之间的同源性为98．8％～99.8％和98.6％～99．5％;在核苷酸和氨基酸水平上,鹅和番鸭细小病毒VPI之间的同源性分别为79．7％～88．7％和85．5％～93．3％,而相应的鹅细小病毒之间的同源性为88．8％～99．6％和91．5％～99.2％,番鸭细小病毒之间的同源性为98．1％～99．6％和97．1％～98．8％;番鸭和鹅细小病毒NS和vp1基因的系统进化树分析表明：番鸭和鹅呼细小病毒来自共同的祖先,但随着宿主的不同而演化为不同的分支。  相似文献   

马传染性贫血病毒LTR在驴胎皮肤细胞中的基因进化及启动子活性比较     

全滟平  沈楠  郭巍  赵立平  周建华  沈荣显  相文华 《中国预防兽医学报》2008,30(7)

将EIAV驴白细胞弱毒疫苗株在驴胎皮肤细胞中连续传代,分别提取第13代、18代、21代、23代、26代病毒培养物的前病毒DNA,以LTR特异性引物PCR扩增前病毒LTR,并进行克隆及测序分析。与本实验室已测定的驴白细胞毒株LTR的序列比较发现,驴胎皮肤细胞毒株LTR的U3负调节区出现大段的插入、点突变、缺失,U3增强子区变异较小。将LTR片段插入到pCAT-basic载体CAT报告基因前,转染驴胎皮肤细胞,通过检测CAT表达量来评价LTR的启动子活性。驴胎皮肤细胞毒株LTR的启动子活性随着病毒传代次数的增加而逐渐增强,而驴白细胞弱毒株LTR的启动子活性很低。  相似文献   

噬菌体展示技术在动物病毒研究中的应用   总被引：1，自引：0，他引：1  

吕树文  张园园  才琳  赵文成  裴世春  相文华 《畜牧兽医科技信息》2008,(10)

噬菌体展示技术是20世纪80年代逐步建立并发展起来的一项分子生物学新技术。它以噬菌体或噬粒为载体,使外源肽或蛋白基因与噬菌体表面特定蛋白基因在其表面进行融合表达,进而通过亲和富集法筛选表达有特异肽或蛋白质的噬菌体。利用噬菌体表面展示技术可以构建抗体库、随机肤库、蛋白质突变体库和cDNA文库,从而广泛用于抗原表位、抗体、配体、细胞内信号转导以及药物筛选等研究,具有广阔的应用前景。本文跟踪了目前噬菌体展示技术在动物病毒检测领域的最新研究进展和发展前景。  相似文献   

马动脉炎病毒GL、M和N蛋白主要抗原域的原核表达及抗原性鉴定     

王贵宾  郭巍  赵立平  李红梅  赵敏  相文华 《兽医大学学报》2012,(7):958-961

采用RT—PCR方法从EAVBucyrus株扩增了截短的GL、M和全长的N基因片段,将三者分别克隆到表达载体pGEX-6p-1中,测序验证后转化Rosetta（DE3）宿主菌中经IPTG诱导表达,诱导后菌体裂解物经SDS-PAGE分析。试验结果表明,重组菌表达出约35000、34000和38000的特异性条带,通过条件优化及切胶纯化获得较高浓度的目的蛋白。经Western-blot和间接ELISA分析,纯化的蛋白只与抗马动脉炎病毒阳性血清发生特异性反应,证实该蛋白具有良好的反应原性和特异性。  相似文献   

中国华南、华中、东北和西北地区马动脉炎病毒（EAV）感染马血清流行病学调查     

李红梅  侯玉杰  时成龙  郭巍  胡兰  赵立平  相文华 《中国动物检疫》2012,29(11):54-56

马病毒性动脉炎(EVA)是一种由马动脉炎病毒(EAV)引起马属动物主要通过呼吸系统和生殖系统传播的传染病,是危害养马业及赛马业的重要疾病之一.本试验应用纯化EAV全病毒为抗原建立EAV-IgG间接ELISA方法与西班牙INGEZIM-ARTERITIS试剂盒分别检测华南、华中、东北和西北地区共计383份马血清样品.其结果为:华南地区赛马动脉炎阳性率为26%,华中地区赛马动脉炎阳性率为0,东北地区役用马动脉炎阳性率为8.26%,西北地区役用马动脉炎阳性率为7.55%.鉴于此,有必要加强EVA检测,掌握EVA在我国分布,以有效的预防和控制本病传播.  相似文献   

应用TaqMan荧光定量PCR检测H3N8亚型马流感病毒   总被引：2，自引：1，他引：1  

戴伶俐  郭巍  李雪峰  黄文强  赵立平  阿依吐拉·肉孜  相文华 《中国预防兽医学报》2009,31(8)

为建立马流感病毒(ETV)的检测方法,本试验针对H3N8亚型ETV血凝素(HA)基因高度保守序列设计并合成了2对引物和1条TaqMan荧光探针,建立了TaqMan荧光定量PCR方法.经用TaqMan荧光定量PCR、RT-PCR和病毒分离方法分别检测新疆等省135份疑似EIV马鼻拭子样品,其结果表明:3种方法的马流感检出率分别为54.07%、37.78%、0.89%;TaqMan荧光定量PCR可检出马流感病毒基因组RNA的灵敏度可达10拷贝/反应.而且与其他马呼吸道病毒均无交叉反应,具有良好的特异性、敏感性和重复性.该方法为H3N8亚型马流感的早期诊断及分子流行病学调查等提供了一种新的快速、准确的定量检测技术.  相似文献