家畜传染病学分会第十三次学术研讨会学术报告之五 中国马流感研究现状     

相文华 《动物保健》2009,(10)

一、概括及病原病理马流行性感冒(简称马流感)是由正粘病毒科流感病毒属马A型流感病毒引起马属动物的一种急性暴发式流行的高度接触性、呼吸道传染病。  相似文献   

牛传染性鼻气管炎间接ELISA诊断方法的建立   总被引：7，自引：0，他引：7  

朱远茂王海燕  薛飞辛九庆  赵立平童光志 郭巍李兆利  相文华 《中国兽医科技》2005,35(12):959-963

以牛肾细胞系（MDBK）培养牛传染性鼻气管炎病毒（IBRV）Bartha Nu/67株,经超速离心纯化病毒,再经超声破碎处理后作为诊断抗原,建立了检测牛血清IBRV抗体的间接酶联免疫吸附试验.该ELISA的判定标准为：血清D490 nm值大于0.369的判为阳性,小于0.295的判为阴性,在0.295与0.369之间的为可疑.特异性和重复性试验结果表明,该方法特异性高、重复性好.与法国进口ELISA抗体诊断试剂盒比较,其符合率为96.3%;与中和试验比较,符合率为95.8%,且敏感性更高.应用该诊断方法调查了我国部分地区IBRV的感染情况,结果显示,这些地区的IBRV感染率为67.1%.  相似文献   

马传染性贫血病毒疫苗致弱过程中不同代次毒株LTR序列变异   总被引：2，自引：2，他引：2  

王晓钧  魏丽丽  范秀娟  吕晓玲  相文华  张晓燕  邵一鸣  沈荣显 《中国预防兽医学报》2005,27(3):179-183

有研究认为病毒基因组长末端重复序列LTR与病毒的毒力和复制能力直接相关.中国马传染性贫血弱毒疫苗是由一株高致病力毒株经体外白细胞传代而致弱的疫苗.经过体外超过110代传代后,病毒丧失了对马高致死性毒力并保持了良好的免疫原性.本文对传代过程中的不同代次病毒基因LTR进行了克隆和序列测定,发现传代过程中LTR发生了一系列明确的变异,一是转录起始位点在64代之前均以GGAC为特征,64代之后则表现为不规律的GAAC,AAAC,AGAC或GGTC;二是TAR起始碱基在59代之前多数为A,而64代之后均为G;三是在45代之后(55代除外),poly(A)附加位点一致表现为AA,这种一致的核苷酸变化均发生在毒力明显降低的代次,提示这些突变引起的位点或结构变化很可能与病毒毒力减弱有直接关系.  相似文献   

羊痘病毒P32蛋白的表达   总被引：5，自引：0，他引：5  

郭巍  相文华  李一经 《中国兽医杂志》2005,41(3):8-10

将已获得的Bac—Bacl—P32、Bac—BacHT—P32重组杆状病毒表达载体转染sf9昆虫细胞，得到含羊痘病毒P32基因的重组杆状病毒rBacHT—P32。将P32基因插入到大肠杆菌表达载体pET30a中，转化BL21感受态细胞，IPTG诱导表达。经SDS-PAGE、Western-blot鉴定，在杆状病毒、大肠杆菌中都得到了35kDa重组P32蛋白。  相似文献   

马传染性贫血病毒囊膜基因gp90V3区糖化回复突变感染性克隆的构建     

韩秀娥  张萍  王雪峰  孔宪刚  相文华  周建华 《畜牧兽医学报》2008,39(12)

为阐明我国马传染性贫血病毒（Equine infectious anemia virus,EIAV）弱毒疫苗致弱及免疫保护的分子机制,作者分析了疫苗株及其亲本强毒株共34个囊膜基因序列。结果发现疫苗株在膜基因gp90V3区的潜在N-连接糖基化位点出现稳定的碱基替换,使该位点消失。为研究囊膜糖基化的作用,以疫苗株全长感染性克隆pLG—FD3—8为亲本,利用反向遗传技术对该突变位点进行糖基化序列回复操作,构建全基因感染性克隆pLGFDg5。将pLGFDg5转染驴胎皮肤细胞（FDD）,通过逆转录酶活性和RT-PCR方法评价其感染性。结果表明,将pLGFDg5在FDD细胞中盲传3代后,可在细胞培养上清中检测到逆转录酶活性,用RT—PCR检测到EIAV保守基因片段,在电镜下可见典型的EIAV粒子。在FDD细胞上的病毒复制动力学分析显示,与其亲本克隆pLGFD3—8的衍生病毒pLGFD3-V相比,回复突变克隆衍生的pLGFDg5-V复制速度较慢,获得较低的病毒载量。体外抗体中和试验表明,与其亲本pLGFD3-V相比,引入潜在的糖基化位点g5降低了衍生病毒对中和抗体的敏感性。这一结果为N-连接糖基化在我国马传贫弱毒疫苗致弱机理的作用研究提供了重要依据。  相似文献   

山羊关节炎-脑炎荧光抗体制备及初步应用     

相文华  丁思雨  吕晓玲  秦运安  沈荣显 《中国预防兽医学报》1993,(4)

山羊关节炎-脑炎(CAE)是年80年代新发现的一种由反转录病毒科慢病毒亚科成员引起的山羊慢病毒传染病。由于该病与马传染性贫血(EIA)、绵羊进行性肺炎(OPP)以及人类艾滋病(AIDS)等慢病毒密切相关而引起极大重视,相继建立了CAE琼脂扩散试验和酶联免疫吸附试验等诊断方法。流行病学普查结果表明,美洲CAE感染率为83％,欧洲为61％,我国在1985年从进口萨能氏奶山羊检出CAE阳性羊。迄今为止,  相似文献   

马传染性贫血病毒受体选择性剪切及功能性研究的进展     

吕树文  王宇  赵文成  相文华 《畜牧兽医科技信息》2008,(10)

病毒的特异性的细胞受体是病毒入侵细胞的门户,决定病毒的宿主范围、组织及细胞,嗜性。从受体角度阐明病毒入侵机制,是病毒性疾病的药物研发及疫苗研制的一个重要方面。选择性剪接可使同一基因编码出功能不同蛋白,选择性剪接对满足生物体复杂性所需蛋白多样性具有重要意义。鉴定不同选择性剪接变异体的功能已成为生物学界研究的热点。  相似文献   

马传贫驴白细胞弱毒疫苗株基质蛋白基因的克隆与表达   总被引：5，自引：0，他引：5  

薛飞  朱远茂  王晓钧  杨建德  相文华  刘志英  赵立平  吕晓玲  沈荣显 《中国预防兽医学报》2003,25(1):1-4

从感染驴白细胞的马传贫驴白细胞弱毒疫苗株前病毒DNA中克隆了编码基质蛋白（p15)的基因，并在大肠杆菌中进行了表达，所表达的蛋白是一种可溶性的融合蛋白，其氨基端带有6个组氨酸的标签，因此可以用固定化金属离子亲和层析法在非变性条件下进行纯化，在间接ELISA和免疫印迹试验中，重组的基质蛋白可与马传贫阳性血清样品发生反应，而与健康马血清无任何反应，这表明该重组蛋白具有良好的抗原性和特异性，可用于马传贫弱毒疫苗株在体内外复制及在接种马体人免疫应答的研究中。  相似文献   

马传贫白细胞弱毒疫苗接种马攻击强毒后病理学和免疫形态学变化的探讨     

褚桂芳  相文华  尹训南  曹志平  吴东来 《中国预防兽医学报》1989,(Z1)

本试验对46例马传贫白细胞弱毒接种后3～55个月的马用中国马传贫强毒辽系和美国马传贫强毒Wyoming株攻击,攻击3个月后迫杀,经剖检、组织学和组织化学观察和比较,基本可归纳为三种类型的形态学改变:Ⅰ型有典型的马传贫规律性病变,免疫活性细胞减少,其变性、坏死程度较强毒攻击对照马略轻;Ⅱ型无马传贫规律性病变,免疫活性细胞活化、增殖,但肝内有铁反应;Ⅲ型无马传贫病理性损伤,免疫系统明显活化、增殖。疫苗接种马经两强毒株攻击后出现各型变化的马匹比例数有一定差异,但80％以上疫苗接种后强毒攻击的马均呈Ⅱ、Ⅲ型形态学改变,即这些马均处于免疫状态,从而对攻毒马建立了病理形态学和免疫形态学相结合的检测手段。此外,本研究也提出了马传贫白细胞苗的免疫持续期可长达3年以上的形态学根据。  相似文献   

中国马流感研究现状     

相文华 《动物保健》2009,(10):18-19

一、概括及病原病理 马流行性感冒（简称马流感）是由正粘病毒科流感病毒属马A型流感病毒引起马属动物的一种急性暴发式流行的高度接触性、呼吸道传染病。该病发病率高，死亡率低，临诊特征为发烧、结膜潮红、咳嗽、流浆液性鼻液一脓性鼻漏、母马流产等。病理学变化为急性支气管炎、细支气管炎、间质性肺炎与继发性支气管肺炎。世界动物卫生组织（OIE）将其列为B类疾病，是法定报告动物疾病，我国列为三类动物疾病。  相似文献