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1.
随着分子生物学的发展，聚丙烯酰胺凝胶电泳分析技术在小分子量PCR产物的分离中的应用越来越多，但因操作步骤繁多、耗时长，不利于大量分析工作的开展。对聚丙烯酰胺凝胶电泳的银染方法做些改进，合并常规银染过程中的固定和银染两步骤。与常规方法相比，该方法具有操作简便、耗时短、条带清晰的特点，该方法适用于实验室大规模PCR产物的分离。 相似文献
3.
4.
银染mRNA差异显示方法在致突变实验中的初步应用 总被引：2，自引：0，他引：2
为建立在药物致突变研究中应用银染 m RNA差异显示的方法 ,试验提取未经过 /经过环磷酰胺处理的 Balb/c小鼠肝组织的总 RNA ,并以此为模板 ,采用 d T1 2 CG、d T1 2 AG、d T1 2 GG为锚定引物 ,通过反转录、差异显示 PCR反应 ,以 6 %变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离差异条带 ,回收后将其再扩增。结果表明 ,RNA投入量为 3μg、镁离子浓度为 1.5～ 2 .0 mm ol/L、退火温度为 4 0℃时 ,扩增的片段条带清晰、背景低 ,差异条带明显 ,再扩增条带单一。银染 m RNA差异显示技术可成功应用于药物致突变的研究。 相似文献
5.
为研究干燥作用对捻转血矛线虫L3期幼虫mRNA表达的影响,筛选并分析干燥相关表达基因,本试验利用mRNA差异显示技术得到了捻转血矛线虫干燥相关基因,通过相对荧光定量PCR验证所获基因的表达情况,并在秀丽隐杆线虫中通过RNA干扰抑制相关同源基因的表达检测干燥后复苏虫体生存率以研究基因抗干燥功能。结果显示,差异表达序列GH-U02A与已知捻转血矛线虫谷胱甘肽-S-转移酶(GST)氨基酸同源性为94%。对秀丽隐杆线虫Ce-gst-7基因进行RNA干扰后,虫体在干燥后的生存率降低,证明gst基因在线虫中有抗干燥功能。 相似文献
6.
琴鱼的核型、C带和银染分析 总被引：1，自引：0，他引：1
采用秋水仙素-低渗-空气干燥法和银染,以肾细胞为材料,对琴鱼(Ctenogobius giurinus)染色体的核型、C带和银染(Ag-NORs)进行了研究。结果表明:(1)琴鱼2n=44,核型组成为2n=8m+12sm+24t,NF=64,没有异型性染色体分化;(2)所有染色体着丝粒为阳性C带,而且第1对染色体短臂也呈C带阳性,其着色强度与该对染色体上的着丝粒C带相同;(3)Ag-NORs数目在不同细胞中表现出多态性,数目为1~2个,出现1个Ag-NORs的频率最低(9.8%),出现2个Ag-NORs的频率最高(78%),Ag-NORs主要出现在m1对和sm3对同源染色体上。 相似文献
7.
采用群体分析法,证明猪Ag—NORs的遗传方式属等显性。提出了细胞型频率与染色体型频率、平均细胞型频率与平均染色体型频率的概念及其估算方法。发现在随机交配群体中,按Ag—NORs标记的(平均)细胞型频率与(平均)染色体型频率之间存在着类似于哈代—温伯格定律的关系,平均染色体型频率有类似于基因频率的作用,可用于群体间遗传相似性的分析。猪Ag—NORs的多态性主要是由于8Ag—NORs平均染色体型频率的不同所致。 相似文献
8.
梅花基因组AFLP银染反应体系的建立和优化 总被引：13，自引：7，他引：13
采用改进的SDS DNA提取方法从梅花的嫩叶和老叶中提取获得总DNA .所得DNA样品的OD2 6 0 OD2 80 值在1 7～ 1 9之间 ,琼脂糖凝胶上主带清晰、较少降解、样品纯度高、蛋白去除干净且得率高 .该体系对原提取程序作了多处简化 ,使操作简便、快捷、高效 ,适合于梅花DNA提取 ,所提取的DNA样品不含PCR反应抑制剂及其他酶反应抑制剂 ,可被限制性内切酶MseⅠ和EcoRⅠ完全酶切 ,适合AFLP PCR反应应用 ,得到清晰的指纹式样 . 相似文献
9.
10.
（ＳＤ—Ⅰ）系猪银染核仁组织区具有较高的稳定性。其有效银染核仁组织区的位点分布集中在１０号和８号染色体的次缢痕处。当只有一个有效银染发生时，它一定出现在１０号染色体的一条单位上。在本次试验中。仅发现一例其有效银染发生在６号染色体上。有效银染核仁组织区的数量分布在１～４之间，优势银染数目为三。认为细胞悬液保存技术不适于核仁组织区银染处理。 相似文献