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1.
本试验从健康仔猪粪便样品中分离纯化得到5株乳酸菌,并应用16S rRNA基因进化分析对其进行种属鉴定。通过对此5株菌进行耐热、耐酸、耐胆盐、耐贮藏性能和抗生素抗性选育,与伤寒沙门氏菌、大肠杆菌以及金黄色葡萄球菌进行混合培养,探究其对大肠杆菌、鸡白痢沙门等病原菌的抑菌效果,最终筛选出一株具有强抗逆性和优良益生特性的屎肠球菌,并进一步对其生长性能和生理生化特性进行了系统研究,为菌株的开发与应用提供理论参考。
[关键词] 仔猪粪便|屎肠球菌|筛选|抗逆性|益生特性 相似文献
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本研究对实验室自行分离保存的猪源枯草芽孢杆菌BL-Y9进行抑菌、产酶、体外消化率等益生特性研究,并测定了其对小鼠的安全性。结果表明：菌株BL-Y9对猪大肠杆菌K88、鸡大肠杆菌O78、鸡白痢沙门氏菌CVCC533及金黄色葡萄球菌C56011有较好的抑菌效果,抑菌圈直径均可达到10 mm以上,发酵上清液中性蛋白酶及纤维素酶活性分别可达184.94、9.68 U/mL|经模拟动物体消化道的试验结果表明：菌株BL-Y9对三种不同饲料组合的消化效果较好,其中以对玉米面+豆粕组合消化效果最好,经作用后,消化液粗纤维消化率、游离氨基酸增加幅度、可溶性氨基酸增加幅度、还原糖增加幅度及酸溶蛋白增加幅度分别为37.79%、152.94%、438.11%、325.62%、131.39%。动物试验结果显示,每只小鼠灌胃1 ~ 100亿剂量菌体是安全的。菌株BL-Y9可作为畜禽饲料添加剂使用。
[关键词] 枯草芽孢杆菌|产酶特性|抑菌特性|消化率|小鼠安全性 相似文献
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研究旨在从肉鸡肠道中筛选具有良好抑菌效果的产细菌素乳酸菌,并对其生物学特性和抑菌特性进行初步研究。试验采用牛津杯法,以大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌为指示菌,从饲喂菌丝霉素的肉鸡肠道分离筛选具有抑菌功能的乳酸菌。利用形态学、生理生化鉴定及16S rD-NA序列同源性分析进行菌种鉴定,通过热处理、过氧化氢酶、蛋白酶K处理确定抑菌活性物质,并绘制乳酸菌生长曲线及抑菌活性曲线。分离筛选到两株对大肠杆菌、沙门氏菌和金色葡萄球菌均具有较强抑菌活性的乳酸菌LAB12和LAB19,经鉴定菌株LAB12为乳酸片球菌,菌株LAB19为植物乳杆菌。过氧化氢酶处理不影响LAB12和LAB19抑菌活性,加热处理和蛋白酶K处理后抑菌活性减小。乳酸片球菌LAB12接种后2 h进入对数生长期,18 h左右进入稳定期,随着菌体数量增加发酵液上清抑菌作用增强,22 h抑菌活性达到最大且趋于稳定;植物乳杆菌LAB19在发酵2 h进入对数生长期,经约10 h快速生长后,生长速度趋于稳定,抑菌活性也基本保持不变。研究从饲喂菌丝霉素的肉鸡肠道中分离筛选到两株具有良好抑菌功能的乳酸菌,分别为乳酸片球菌LAB12和植物乳杆菌LAB19,初步鉴定这两株菌抑菌活性物质为细菌素。 相似文献
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本试验使用形态学鉴定、16S rRNA等分子生物学鉴定方法,结合丁酸梭菌（Clostridium butyricum,C.butyricum）产丁酸、产气等特性,旨在从健康动物粪便、瘤胃液和窖泥等样本中分离筛选具有益生潜力的C.butyricum,并通过产酸能力、抑菌性能、产酶活力、抗氧化能力和体外发酵生物量比较,最终得到2株兼具抑菌和抗氧化活性的C. butyricum。结果表明：本试验筛选分离的8株C. butyricum均能在体外产乙酸、丁酸,其培养上清液均能抑制沙门氏菌ATCC 14028、沙门氏菌CVCC 519和产气荚膜梭菌CVCC 2030的生长。通过进一步评估筛选得到C. butyricum XMC 312和C. butyricum SWY 13,该2株菌能分泌纤维素酶,分别达10.24 U/mL和16.90 U/mL,同时可以清除DPPH自由基,相当于0.125 g/L维生素C的清除力。本试验获得的C.butyricum具备良好的益生性能,用于饲料微生态制剂的开发制备,具有强大的市场前景。 相似文献
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寻找抗生素替代品是养殖业面临的一大课题。片球菌（Pediococcus）是饲料添加目录中允许的益生菌之一,它是一种革兰氏阳性乳酸菌。大量研究表明,片球菌在食品、医疗和养殖行业中有着巨大的应用价值,它们在宿主肠道黏膜细胞表面具有的良好的定植能力,减少了其他细菌的黏附。同时,片球菌能够产生包括片球菌素、有机酸和过氧化氢在内的许多抗菌物质,因而在抑制病原菌生长、改善肠道微生物群落结构、刺激宿主免疫、促进养殖动物生产健康并提升动物生长性能等方面表现出良好的益生性能,但是相比较其他益生菌而言其关注程度不高。作者总结了片球菌产生抑菌物质的种类及其抑菌机制,介绍了片球菌的黏附和免疫调控作用方式,以及片球菌在猪和鸡等畜禽养殖动物生产上的应用,旨在为其在动物生产中的合理应用提供理论参考。片球菌具有广谱、稳定的抑菌效果,丰富的益生性能,它们有利于畜禽动物健康生长,预防病原菌感染,减少疾病发生,因此值得加大推广和应用的力度。 相似文献
8.
本试验以枯草芽孢杆菌和大肠杆菌为供试菌,采用滤纸片法研究辣椒碱对细菌的作用效果。试验一结果显示：辣椒碱对枯草芽孢杆菌、大肠杆菌都有抑菌作用。在浸置3 h时,对于枯草芽孢杆菌,当辣椒碱浓度低于1 mg/mL时,辣椒碱对枯草杆菌的抑菌作用随浓度增加而加强,1 mg/mL时抑菌圈直径达到最大,而浓度大于1 mg/mL时,随浓度增加作用效果减弱|而对于大肠杆菌而言,在浓度为0.125 ~ 3 mg/mL时,辣椒碱的抑菌效果随浓度增加显著加强（P ＜ 0.05）。试验二结果显示：在辣椒碱浓度为1 mg/mL时,对枯草芽孢杆菌的作用效果随浸置时间延长出现降低趋势|而对于大肠杆菌,在同一浸置时间辣椒碱的作用效果为3 mg/mL＞2 mg/mL>1 mg/mL,而对于同一辣椒碱浓度,随着浸置时间延长,作用效果增强。辣椒碱在浓度低于1 mg/mL 时对枯草芽孢杆菌随浓度增加而增强|浓度大于1 mg/mL时,出现减弱趋势|辣椒碱对大肠杆菌抑菌效果在浓度为0.125 ~ 3 mg/mL时随浓度增加而增强,且随浸置时间延长抑菌效果增强。
[关键词] 辣椒碱|枯草芽孢杆菌|大肠杆菌|滤纸片法|作用效果 相似文献
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体外抑菌试验采用牛津杯法,动物试验选用90头21日龄断奶仔猪(杜长大),随机分为空白组、菌粉组、上清液组和发酵液组,试验期49 d,旨在研究乳酸片球菌SKL-03的抑菌性能及其对断奶仔猪肠道菌群及黏膜免疫的影响。试验结果显示:乳酸片球菌SKL-03菌粉、上清液、发酵液对3种常见致病菌均有显著的抑菌效果;动物试验结果显示:相比空白组,饲粮中添加乳酸片球菌SKL-03菌粉、上清液、发酵液可降低盲肠、结肠中的大肠杆菌和沙门氏菌的数量,提高乳杆菌数量和十二指肠、空肠黏膜中SIgA含量。综上所述,乳酸片球菌SKL-03具有改善断奶仔猪肠道菌群,提高小肠黏膜免疫功能的效果。 相似文献
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为获得抑制奶牛乳房炎源金黄色葡萄球菌(S. aureus)的乳酸菌(LAB),本研究从新疆巴音布鲁克牧区鲜牛乳和哈萨克族乳制品奶疙瘩样品中分离培养LAB,通过传统的分离鉴定与16S rDNA基因序列测序相结合的方法鉴定LAB种类,同时以临床奶牛乳房炎源金黄色葡萄球菌S. aureus N2为指示菌,采用双层琼脂扩散法检测分离株的抑菌能力。通过测定生长曲线确定分离株的生长稳定期,进而利用硫酸铵沉淀法透析提取稳定期内分离株的细菌素,并检测其细菌素抑菌效价。结果显示:从样品中筛选获得5株能够抑制指示菌生长的LAB,分别为希氏乳杆菌、干酪乳杆菌、粪肠球菌、戊糖片球菌和乳酸乳球菌亚种。生长规律曲线表明20 h^30 h为5株LAB的稳定期,此期培养液pH值维持在3.8~4.5。从培养20 h的5株LAB上清液中提取到了细菌素,经检测其具有抑菌活性,抑菌效价分别为457 IU/mL、1 023 IU/mL、676 IU/mL、1 862 IU/mL和1 023 IU/mL。本研究结果表明5株LAB通过在生长稳定期内维持较低酸性环境(pH<4.5),代谢产生细菌素对乳房炎源S. aureus发挥抑制生长作用。本研究为S. aureus性奶牛乳房炎的生物防治提供了实验依据。 相似文献
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《动物医学进展》2020,(7)
为了探索从日本处理有机废弃物样品中分离的乳酸片球菌(Pediococcus acidilactici)耐酸耐盐特性和抑菌作用,采用浸注培养法从处理有机废弃物样品中进行菌株分离,并对分离菌株R-4、B-7、D-13进行生理生化及16S rDNA鉴定;分别将其接种于pH4的MRS肉汤培养基和50 mg/mL NaCl的MRS肉汤培养基中37℃培养48 h,观察其生长情况;通过牛津杯法测其培养液对大肠埃希菌K88、枯草芽胞杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门菌的抑菌作用。结果从日本处理有机废弃物样品中分离得到13株乳酸球菌,其中菌株R-4、B-7、D-13经鉴定均为乳酸片球菌;并在50 mg/mL NaCl和pH4的MRS肉汤培养基中生长良好且呈现较好的耐酸耐盐特性;3株乳酸片球菌的培养液对4种指示菌均呈现抑制作用,其中菌株B-7的培养液对金黄色葡萄球菌的抑菌作用最强,抑菌圈直径达17.02 mm±0.33 mm,但其培养液中酸性产物及H_2O_2产物排除结果说明,对金黄色葡萄球菌的抑菌作用可能与其在生长过程中产生的酸有关。研究结果为乳酸片球菌特性及其应用的进一步研究提供了科学依据,为筛选出处理有机废弃物的微生物发酵菌奠定了基础。 相似文献
12.
《饲料广角》2017,(11)
本试验通过筛选产细菌素的粪肠球菌,研究其体外益生特性,为其在动物生产中的应用奠定基础。利用肠球菌选择性培养基进行分离,孔穴琼脂扩散法进行抑菌活性筛选,并通过形态学和生理生化试验对菌种进行鉴定,然后测定其体外益生性能。研究发现,从猪粪中筛选出9株菌,经鉴定3株为粪肠球菌,通过抑菌试验,菌株DY-F03对大肠杆菌K88、大肠杆菌K99、鸡白痢沙门氏菌和金黄色葡萄球菌抑菌圈直径分别为20.63mm、22.08mm、18.58mm和18.82mm,抑菌性能在各菌株中最强,选取菌株DY-F03进行益生性能评价。通过致病菌共培养、耐酸、耐胆盐及温度耐受试验,发现菌株DY-F03具有较强的益生及抗逆性能,作为潜在的抗生素替代品具有较大开发利用价值。 相似文献
13.
《动物营养学报》2021,33(6)
本研究旨在探寻益生特性优良、可作为抗生素替代品的乳酸菌,并为后续应用于畜禽养殖提供理论依据。本试验以青海黑藏羊和西藏白绒山羊瘤胃内容物为菌株分离来源,采用含有碳酸钙的MRS固体培养基分离纯化乳酸菌,经生理生化和16S rRNA测序鉴定及产酸产气试验分离得到22株同型发酵乳酸菌,测定并评价其生长速率、产酸能力、耐酸和耐胆盐性能、抑菌能力、自凝集率及抗生素敏感性。综合比较不同菌株之间的生物学特性,分别在片球菌属、肠球菌属、乳杆菌属中筛选获得2株戊糖片球菌、1株海氏肠球菌、2株戊糖乳杆菌。结果表明:2株戊糖片球菌均在4 h后进入对数生长期,16 h达到稳定期,24 h后菌液pH达到4.0以下,能耐受pH 3.0和0.3%的胆盐环境;1株海氏肠球菌在2 h后进入对数生长期,12 h达到稳定期,24 h后pH达到4.5以下,能耐受pH 4.0和0.3%的胆盐环境;2株戊糖乳杆菌均在2 h后进入对数生长期,16 h达到稳定期,16 h后pH达到4.0以下,能耐受pH 3.0和0.3%的胆盐环境,5株乳酸菌自凝集率、抑菌能力及安全性均表现优良。综上所述,本试验筛选获得的5株不同种属乳酸菌生物学特性良好,可作为后续开发微生物发酵饲料及动物微生态制剂的菌种来源。 相似文献
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研究旨在探究百里香酚和植酸对猪源大肠杆菌和沙门氏菌的抑制效果，为进一步改善猪舍环境和猪肠道功能研究提供参考。试验采用牛津杯法、二倍稀释法和平板涂布法，分别测定百里香酚和植酸对两种猪源致病菌的抑菌圈直径、最小抑菌浓度（MIC）和最小杀菌浓度（MBC）的影响。结果表明：猪源大肠杆菌和沙门氏菌对50 mg/mL百里香酚表现为高度敏感，对17.5%植酸表现为极度敏感。百里香酚对猪源大肠杆菌MIC和MBC分别为1.56 mg/mL和3.12 mg/mL，对猪源沙门氏菌MIC和MBC均为1.56 mg/mL；植酸对猪源沙门氏菌的抑制效果强于猪源大肠杆菌，对猪源大肠杆菌MIC和MBC均为4.37%，对猪源沙门氏菌MIC和MBC均为2.18%。说明百里香酚和植酸对猪源大肠杆菌和沙门氏菌具有较好的抑菌效果，在抑菌活性物质筛选中具备较好的应用前景。 相似文献
16.
选用金黄色葡萄球菌(S.aureus)、大肠杆菌(E.coli ATCC 43889)、福氏志贺菌(Shigella flexneri CMCC 51334)3株常见的食源性致病菌,用于测定L-乳酸、D-乳酸的最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)及最小杀菌浓度(minimum bactericidal concentration,MBC),并比较L-乳酸、D-乳酸对3株食源性致病菌抑菌效果差异.结果表明:L-乳酸、D-乳酸对3株食源性致病菌均有不同程度的抑制作用,金黄色葡萄球菌MIC0.1 mg/mL、MBC 3.2 mg/mL,大肠杆菌MIC 0.1 mg/mL、MBC 1.6 mg/mL,福氏志贺菌MIC 0.1 mg/mL、MBC3.2mg/mL.在所选3株指示菌浓度105～106 CFU/mL、乳酸0.2 mg/mL质量浓度下,L-乳酸的抑菌效果显著高于D-乳酸. 相似文献
17.
《动物营养学报》2020,(7)
为获得犬科动物源乳酸菌并对其益生潜能进行评价,本研究通过测定生长曲线、产酸能力、对低pH和高胆盐环境的耐受性、在体外模拟胃肠道溶液中的存活能力、抑菌能力、抗生素抗性、对蓝狐小肠上皮原代细胞的黏附能力及抗氧化性评价了菌株ZJBF004的益生特性。结果表明:利用固体乳酸细菌培养基从蓝狐的肠道内容物中分离到1株优势乳酸菌,将其命名为菌株ZJBF004,经菌落菌体形态、生理生化特性和16S rRNA基因序列分析鉴定其为约氏乳杆菌(Lactobacillus johnsonii)。菌株ZJBF004产酸能力较强且在37℃培养时能迅速进入对数生长期;在pH=5的培养基中耐受6 h时仍能保持较好的生长情况,在胆盐浓度为3 g/L的条件下至少可耐受6 h,且存活率高于70%,在人工模拟胃液和肠液中耐受3 h时存活率高于90%;对大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌具有良好的抑菌效果;对蓝狐小肠上皮原代细胞的黏附能力为(18.67±3.12)个/细胞;1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基清除率为28.50%,表明菌株ZJBF004具有一定的抗氧化活性。由此可见,新分离的蓝狐源约氏乳杆菌菌株ZJBF004具有优良的体外益生性能,可作为潜在犬科动物用益生菌进一步研究。 相似文献
18.
《动物营养学报》2020,(6)
本试验旨在研究乳酸片球菌对生长猪生长性能、粪便菌群、血清生化和免疫指标的影响。选取平均体重为(23.21±0.84) kg的"长×大"二元杂交生长猪140头,随机分为对照组和试验组,每组5个重复,每个重复14头。对照组饲喂基础饲粮,试验组在基础饲粮中添加2.70×10~9CFU/kg乳酸片球菌冻干制剂。预试期为5 d,正试期为34 d。结果显示:与对照组相比,1)试验组生长猪的平均日增重提高了5.64%(P0.05),料重比降低了4.62%(P0.05);2)试验组生长猪粪便中乳酸菌数量显著提高(P0.05),大肠杆菌和金黄色葡萄球菌数量显著降低(P0.05);3)乳酸片球菌能够提高生长猪粪便菌群的物种丰富度,增加厚壁菌门及普雷沃菌属、巨球菌属和乳酸杆菌属的比例;4)试验组生长猪血清中总蛋白、球蛋白、免疫球蛋白G和免疫球蛋白A含量分别提高了13.45%(P0.05)、14.91%(P0.05)、20.91%(P0.05)和44.00%(P0.05),血清尿素氮、结合珠蛋白含量分别降低了19.46%(P0.05)和38.71%(P0.05)。结果表明,饲粮中添加乳酸片球菌(添加剂量为2.70×10~9CFU/kg)能够改善生长猪的肠道菌群组成,增强机体免疫功能,从而提高生长猪的生长性能。 相似文献
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本研究从猪的新鲜粪便中分离纯化出一株具有较强产酸效果的乳酸菌HF14,综合形态、生理生化、16SrDNA序列分析,初步鉴定该菌株为乳酸菌片球菌(Pediococcus acidilactici)。对HF14固态发酵豆粕、麸皮、玉米粉与稻壳粉等饲料原料的产酸类别进行分析发现,产生的有机酸以L-乳酸与乙酸为主,其中,发酵玉米粉的pH最低,为3.77,L-乳酸与丙酸含量最高,分别为21.91、1.03mg/g;发酵麸皮的pH降幅最大,丁酸含量最高,为0.72mg/g;发酵稻壳粉的乙酸含量最高,为6.15mg/g,L-乳酸含量最低;发酵豆粕的各个指标居中。 相似文献
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本研究以从断奶仔猪肠道分离的益生菌为试验菌株,将大肠杆菌K88和益生菌接种到体外培养的猪小肠上皮细胞(intestinal porcine epithelial cell-1,IPEC-1)中,测定培养2.5h上清液中的乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)活性,同时将益生菌和大肠杆菌K88体外混合培养2.5h,进行平板计数,统计大肠杆菌K88菌数的变化,筛选出可以抑制大肠杆菌K88的益生菌。试验结果显示,干酪乳杆菌和凝结芽孢杆菌能显著降低IPEC-1培养上清液中的LDH活性(P<0.05),降低大肠杆菌K88对细胞的损伤;凝结芽孢杆菌能降低DMEM培养基中大肠杆菌K88的生长速度,结合模拟制粒过程及胃肠道环境的耐高温、耐酸及耐胆盐研究进行综合分析,该凝结芽胞杆菌对大肠杆菌K88有较好的抑制作用且具有良好的耐高温、耐酸及耐胆盐性能,具有作为微生态制剂菌株的应用潜力。本试验建立了能够抑制大肠杆菌K88的益生菌体外筛选技术模型。 相似文献