华东部分地区猪群中猪萨佩罗病毒分子流行病学调查   总被引：1，自引：0，他引：1  

兰道亮  吉文汇  王长松  孙焕  陈莫林  崔立  童光志  华修国 《动物医学进展》2012,33(12)

为了解华东地区猪群中猪萨佩罗病毒(Porcine sapelovirus,PSV)感染流行情况,通过RT-PCR方法对该地区15个规模化养猪场960份猪粪便样本进行了检测.结果表明,所检测的15个养殖场均存在PSV感染,总体平均阳性率为17.2％,其中10周龄～20周龄的猪PSV最易感.进一步系统进化分析表明,所检阳性毒株同源性较高,不同地区的毒株交错分布在一起,不存在明显的地区差异,但大体可分为3个亚群,而且已有的国外PSV株均包括在这3个亚群中,这提示PSV可能至少存在3种不同的抗原亚型.  相似文献   

同时检测猪瘟病毒和北美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒的复合荧光定量RT-PCR方法的建立   总被引：2，自引：0，他引：2  

成丹  赵建军  李娜  孙元  周艳君  朱妍  田志军  涂长春  童光志  仇华吉 《畜牧兽医学报》2009,40(1)

应用猪瘟病毒（CSFV）及北美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）特异性引物和TaqMan水解探针,建立一种同时检测CSFV和PRRSV的复合荧光定量RT—PCR方法。该方法可检测到3．2TCID50的CSFV和1．8TCID50的北美洲型PRRSV,比常规PCR方法敏感性高50倍以上。用复合荧光定量RT—PCR方法对155份现地样品进行检测,结果73份为PRRSV阳性,16份为CSFV阳性,13份为CSFV和PRRSV混合感染,与常规RT—PCR的符合率高达99．4％。该复合荧光定量RT—PCR方法敏感、特异、重复性好。  相似文献   

猪繁殖与呼吸综合征病毒M蛋白B细胞抗原表位的鉴定     

周艳君  田志军  刘金霞  安同庆  彭金美  薛强  蔡雪辉  于海  李国新  刘娣  童光志  王云峰  王玫 《中国预防兽医学报》2009,31(4)

本研究去除了猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)CH-1a株M蛋白基因部分疏水性区域后,克隆于原核表达栽体pGEX-6P-1中进行表达,并利用表达的M蛋白(rtM)为抗原,免疫BALB/c小鼠制备了1株抗M蛋白的单克隆抗体(McAb)M283,IFA试验表明该McAb能够识别PRRSV CH-la株.同时将M蛋白基因进行一系列的氨基酸截短表达,证实M蛋白的117 aa～129 aa是McAb M283的抗原表位;对该抗原表位进行western blot 分析,结果显示该表位能被PRRSV感染猪的血清特异性识别.本研究结果为进一步深入了解M蛋白的抗原特性奠定了基础.  相似文献   

猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5a/ORF5重叠区的分离     

刘闰夏  蔺涛  田德斌  韦祖樟  孙利厂  陆嘉琦  袁世山  童光志 《中国动物传染病学报》2012,(2):29-35

以两个不同基因型的猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)感染性克隆为平台进行反向遗传操作,利用SOE-PCR将I型PRRSV的ORF2～5a替换进II型PRRSV的相应区域,旨在将I型PRRSV的5a从ORF5中独立出来进而研究5a蛋白的功能,同时探讨两型PRRSV的结构蛋白结构与功能关系。研究结果表明,I型PRRSV的ORF2～5a序列能稳定存在于嵌合病毒基因组内,表达的相应蛋白能在II型PRRSV中发挥同样功能。本研究首次将PRRSV的ORF5a序列从ORF5中独立出来,为进一步研究5a蛋白的结构与功能提供了理论依据和基础材料。  相似文献   

猪生殖—呼吸道综合征病毒（PRRSV）CH—1a株N基因的分子克隆,？…   总被引：3，自引：0，他引：3  

仇华吉  童光志 《中国畜禽传染病》1998,20(4):217-220

根据已发表的ＰＲＲＳＶＩＡＦ－ｅｘｐ９１株的核酸序列，设计了一对特异性引物，用ＲＴ－ＰＣＲ扩增了ＰＲＲＳＶＣＨ－１ａ株的Ｎ基因，经补平和磷酸化后，克隆到ｐＵＣ１８ＳｍａＩ位点上，经电泳分析，酶切和ＰＣＲ鉴定证实后，进行序列测定，序列分析表明ＣＨ－１ａ株与ＩＡＦ－ｅｘｐ９１株（美洲型）Ｎ基因核苷酸同一性为９３．２％，氨基酸同一性高达９６．７％，而与ＬＶ株（欧洲株）核苷酸同一性为６３％，氨基酸同一性仅  相似文献   

伪狂犬病病毒Min—A株gE基因序列分析及其真核表达质粒的构建   总被引：1，自引：0，他引：1  

冉智光  童光志 《西南农业学报》1999,12(2):1-6

  相似文献   

传染性喉气管炎的诊断与防制研究进展     

童光志 《养禽与禽病防治》1999,(12)

传染性喉气管炎（ＩＬＴ）是鸡的一种急性病毒性上呼吸道感染，其病原是一种。疽疹病毒。此病呈世界性分布，不同鸡群爆发本病时，其临诊表现的严重程度差别较大。通常，初次爆发的鸡群死亡率可高达４０％，同时表现明显的产蛋下降。因此，此病对于集约化养鸡业来说是一种非常重要的疫病。近年来，ＩＬＴ的发生逐渐趋于温和，而且表现出一定的周期性，散发时与其他呼吸道病（如新城疫、传染性支气管炎、霉浆体感染等）在临诊上难以区分。因此，制定合理而有效的综合措施是防制此病的关键。本文拟就ＩＬＴＶ的特性及本病在诊断和防制方面的研…  相似文献   

伪狂犬病病毒gE/TK基因缺失突变株的构建   总被引：1，自引：1，他引：1  

田志军  仇华吉  倪健强  周艳君  王云峰  童光志 《中国预防兽医学报》2004,26(3):181-185

在伪狂犬病病毒转移载体pBdTK-Uni的多克隆位点中插入由SV40启动子控制下的IacZ基因表达盒,同时在右侧同源臂下游插入一个1.7kb的KpnI片段,构建成一个新的转移载体pUhi-LacZ.用该载体与Bartha-K61株基因组通过脂质体法共转染Vero细胞,经过10代蓝斑筛选纯化和PCR鉴定获得了一株稳定表达LacZ基因的伪狂犬病病毒gE/TK基因缺失突变株,命名为rPrV-LacZ.在不同的细胞(PK-15、IBRS-2、Vero和CEF)上,对该重组病毒与亲本病毒的增殖滴度和细胞病变进行比较,未见显著差异.结果表明转移载体pBdTK-Uni具有实用性,可用于构建伪狂犬病病毒基因工程活载体疫苗.  相似文献   

感染性分子克隆衍生的马传染性贫血病毒的免疫学特性     

袁秀芳  涂亚斌周涛 薛飞吴东来  仇华吉彭金美 王柳相文华  童光志 《中国兽医科技》2005,35(3):163-168

将马传染性贫血病毒驴白细胞毒疫苗(DLA—EIAV)、DLA—EIAV感染性分子克隆衍生毒(vOK8226)以及强弱毒嵌合毒(vOKVltr)分别接种健康马，并于接种后第220d，用EIAV强毒辽宁株(L-EIAV)攻击，观察临床变化，并测定接种后各结构蛋白的抗体变化。结果发现，攻毒后，2匹非免疫对照马和克隆衍生毒接种组中的1匹马体温均出现典型的稽留热并死亡，死亡马呈现典型的马传染性贫血的病理组织学变化，其他免疫马未见任何临床变化；在攻毒后第450d剖杀所有存活马，也未见任何病理组织学变化。抗体检测结果表明，免疫接种后攻毒前各组p11和p9抗体均检测不到，嵌合毒接种组p15、p26和gp45抗体水平高于其他组。攻毒后非免疫对照马体内抗p9、p11、p15、p26和gp45抗体均显著升高，并持续至死亡；嵌合病毒接种马体内各结构蛋白抗体水平与攻毒前没有显著变化，克隆衍生毒接种马体内各结构蛋白抗体水平比攻毒前有所升高。通过临床观察、病理组织学检测以及攻毒后各结构蛋白抗体记忆反应情况分析，置换了强毒LTR的DLA—EIAV感染性分子克隆衍生毒(强弱毒嵌合病毒)免疫马能够抵抗马传染性贫血病毒强毒的攻击，获得完全保护，而DLA—EIAV感染性分子克隆衍生毒免疫马未能完全抵抗强毒的攻击。  相似文献   

牛传染性鼻气管炎间接ELISA诊断方法的建立   总被引：7，自引：0，他引：7  

朱远茂王海燕  薛飞辛九庆  赵立平童光志 郭巍李兆利  相文华 《中国兽医科技》2005,35(12):959-963

以牛肾细胞系（MDBK）培养牛传染性鼻气管炎病毒（IBRV）Bartha Nu/67株,经超速离心纯化病毒,再经超声破碎处理后作为诊断抗原,建立了检测牛血清IBRV抗体的间接酶联免疫吸附试验.该ELISA的判定标准为：血清D490 nm值大于0.369的判为阳性,小于0.295的判为阴性,在0.295与0.369之间的为可疑.特异性和重复性试验结果表明,该方法特异性高、重复性好.与法国进口ELISA抗体诊断试剂盒比较,其符合率为96.3%;与中和试验比较,符合率为95.8%,且敏感性更高.应用该诊断方法调查了我国部分地区IBRV的感染情况,结果显示,这些地区的IBRV感染率为67.1%.  相似文献