猪霍乱沙门氏菌─大肠杆菌K88ac、LT（A~－B~＋）二联基因工程菌对仔猪的     

陈陆平  韩文瑜  梁焕春 《中国兽医学报》1995,(2)

猪霍乱沙门氏菌─大肠杆菌Ｋ８８ａｃ、ＬＴ（Ａ~－Ｂ~＋）二联基因工程菌对仔猪的免疫保护试验陈陆平（长春市农业科学院长春１３０１１１）韩文瑜，梁焕春（农牧大学基础部）将表达大肠杆菌Ｋ８８ａｃ、ＬＴ（Ａ－Ｂ＋）的双表达质粒，导入猪霍乱沙门氏菌弱毒疫苗株构建...  相似文献   

BA—DOT—ELISA方法的建立及其在空肠弯曲菌鉴定上的应用     

韩文瑜  黎诚跃 《动物检疫》1990,(3):13-15

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应用马立克氏病肿瘤细胞表面洗脱的抗体制备肿瘤表面抗原的内…     

韩文瑜  黎诚耀 《中国兽医学报》1996,16(5):428-432

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鼠伤寒沙门菌LH430株asd基因缺失株平衡致死系统的构建及生物学特性分析     

张明亮  孙长江  顾敬敏  崔子寅  韩文瑜 《中国畜牧兽医》2019,46(11):3341-3349

本研究旨在构建基于减毒鼠伤寒沙门菌的平衡致死系统。将打靶基因片段Cat基因重组入鼠伤寒沙门菌LH430株asd基因位置,之后将温敏型质粒pCP20转入菌体中用以消除Cat基因片段,通过PCR技术两步法筛选出缺失株Δasd LH430;将asd⁺的原核表达质粒pYA3493转入Δasd LH430,经PCR及测序鉴定表明鼠伤寒沙门菌平衡致死系统Δasd LH430（pYA3493）构建成功。对构建的基因缺失株研究表明,该缺失株失去了在二氨基庚二酸（DAP）阴性环境中生存的能力;糖发酵试验表明,缺失菌株在利用碳源的能力方面与亲本菌株保持一致;9种生化试验结果显示,缺失菌株遗传了亲本菌株的生化特性;遗传稳定性试验表明,缺失菌株能够稳定遗传缺失的423 bp的基因片段;将绿色荧光基因转入所构建的平衡致死系统,成功构建携带绿色荧光基因的重组菌Δasd LH430（pYA-gfp）,对其研究表明该重组菌能够有效表达绿色荧光蛋白。本研究成功构建了鼠伤寒沙门菌平衡致死系统Δasd LH430（pYA3493）,能够有效表达所携带的基因,该系统可作为疫苗活载体来携带外源基因。  相似文献   

猪链球菌2型毒力相关基因在分离株中的分布与突变研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

贾丽  朱僧  雷斯瑀  李娜  马强  韩文瑜  雷连成  孙长江 《中国预防兽医学报》2018,(1)

猪链球菌2型(SS2)是一种重要的人畜共患病病原,研究表明其致病力与毒力因子的相关性各有不同。为探究SS2毒力因子与致病性间的相关性,明确毒力因子能否用于致病性的评价,本研究通过PCR方法对来自吉林省9个不同规模和经营模式的猪场临床健康猪群的32株SS2分离菌株和5个强毒参考菌株的毒力相关基因(38KD蛋白、GDH、OFS、SLY、HYL、FBPS、GAPDH、ORF2和Ssn A)进行克隆测序,比较这9个毒力相关基因在该37株SS2分离株中的分布差异和突变情况。结果显示各个毒力相关基因在来自临床健康猪群的32个分离株和5个强毒参考株中呈现不均等的分布,在强毒参考菌株中谷氨酸脱氢酶(GDH)、38KD蛋白、分泌性核酸酶(Ssn A)基因的检测阳性率达到100%,在健康猪群分离株中它们的阳性率也超过90%。纤维蛋白原结合蛋白(FBPS)和溶血素(SLY)基因在强毒参考菌株中阳性率为100%,而在健康猪群分离株中FBPS和Sly基因检测率分别为68.75%和65.63%。透明质酸裂解酶(HYL)基因在两类菌株间阳性率相差较大,在强毒参考株中其阳性率约为60%,在健康猪群分离株中HYL阳性率仅为18.75%。通过测序和Blast比对分析显示,健康猪分离株中毒力相关基因突变情况非常少,而SS2强毒参考株中其突变位点较多,并呈现多种突变方式,GAPDH、HYL、Ssn A基因属于保守序列,突变较少。SLY和GDH基因也是保守序列,在健康猪群分离株中只发现一株无意义突变,但在强毒参考株中却发现多个导致氨基酸改变的突变位点和突变方式。OFS、ORF2和FBPS基因在两组菌中均有突变,但在强毒参考株中存在较多的突变,并且可造成其编码的氨基酸序列改变。提示SS2毒力相关因子复杂,仅仅依据毒力基因是否存在不能判断其毒力的强弱,其突变位点及突变方式对毒力的判断也具有一定的参考意义。  相似文献   

涉农综合性大学服务“三农”的思考     

韩文瑜  梅士伟 《中国农业教育》2010,(4):1-3,17

涉农综合性大学是高等教育体制改革的产物,在解决我国＂三农＂问题中具有重要地位。涉农综合性大学具有学科综合、基础力量雄厚的优势,但也存在着服务＂三农＂基础差、服务意识淡薄和实践型专家少等问题。因此,涉农综合性大学需要更新服务理念,找准服务定位,突出服务特色,努力搭建综合化的服务平台,创新服务保障机制,从而进一步提升服务＂三农＂的能力。  相似文献   

鱼类抗菌肽的研究进展     

江丽娜  赵瑞利  雷连成  王教玉  韩文瑜 《中国水产》2008,(5)

在治疗高等动物发生的各种细菌性、病毒性疾病及其它病害中,由于大量使用抗生素,某些病原体对药物产生了耐药性,因而无法有效地控制疾病的发生.而筛选新的抗生素也极为困难,特别是人类真菌病害在当前仍是一个难以解决的问题.抗菌肽的发现,尤其是抗菌肽对耐药致病菌有良好的杀灭作用无疑为治疗这几类病害提供了新的途径.  相似文献   

金黄色葡萄球菌氟喹诺酮耐药性与致病性关系试验     

杜锐  韩文瑜  雷连成 《中国兽医杂志》2007,43(5):28-29

金黄色葡萄球菌为临床最常见的病原菌,由于其可以产生多种毒素和酶,在临床上可引起家畜多临床表现的疾病。目前金黄色葡萄球菌的耐药性日益恶化,特别是其对氟喹诺酮类和β-内酰胺类药物呈现超强耐药,给临床治疗带来极大的困难。本试验研究了金黄色葡萄球菌与毒力有关的血浆凝固  相似文献   

牛蛙(Rana catesbeiana)皮肤cDNA文库的构建与鉴定     

赵瑞利  韩俊友  李莲瑞  乔红伟  雷连成  胡博  谢芳  刘丽凡  韩文瑜 《中国兽医学报》2008,28(4):430-433

以牛蛙皮肤组织为材料获得总RNA,用偶联Oligo(dT)的磁珠纯化mRNA后,利用含Sfi Ⅰ酶切位点的CDSⅢ引物在逆转录酶的作用下合成cDNA的第1链,以含Sfi Ⅰ酶切位点的CDSⅢ引物和SMART引物,利用LD-PCR合成双链cDNA,双链cDNA经Sfi Ⅰ酶切,通过T4DNA连接酶连接到经过相同酶切的λTripIEx2载体,体外包装后转染E.coli XLI-Blue 宿主菌,进行滴度测试和文库扩增.结果构建的牛蛙皮肤cDNA 文库原始库容量为1.42×106 PFU/mL,插入片段长度在0.5～1.5 kb,重组率为89.5%,扩增后的文库滴度为1.35×109 PFU/mL,构建的文库质量符合要求,可用于大规模的功能基因分析.  相似文献   

鸡源大肠埃希氏菌大质粒的探讨     

赵爱珍  韩文瑜 《中国兽医科技》2000,30(10):29-30

用碱裂解法提取分离的１０株鸡源大肠埃希氏菌的质粒。结果：多数大肠埃希氏菌株含有大质粒，分子量为５０￣２３０ｋｂ。这些大质粒可能含有毒力相关基因，与细菌的耐药性，大肠埃氏菌素的产生及质粒的传递功能等有关。  相似文献