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11.
猪链球菌2型纤连蛋白/血纤蛋白原结合蛋白
全基因的克隆及融合表达 总被引:4,自引:0,他引:4
采用发表的引物对,以猪链球菌2型(Streptococcus suis type 2)江苏分离株HA9801的基因组DNA为模板,采用PCR方法扩增纤连蛋白/血纤蛋白原结合蛋白基因fbps(GenBank登录号为AY565303)克隆于pMD-T18载体构建成载体pMD-T-fbps.经内切酶酶切和测序鉴定后,将由pMD-T-fbps内切酶切下的片段定向克隆于表达载体pET-32a(+),得到重组质粒pfbps.将重组质粒pfbps转化大肠杆菌(Escherichia coli)BL21株,经IPTG诱导,可高水平地表达相对分子量为83 kD的融合蛋白.配体印迹结合试验表明,表达的融合蛋白可与人纤连蛋白结合. 相似文献
12.
为了分离与猪链球菌2型感染密切相关的基因,利用抑制性消减杂交(SSH)技术构建了8周龄A/J小鼠感染猪链球菌2型后的脾脏消减cDNA文库,并对其中169个阳性克隆进行测序,去除冗余的cDNA序列载体并聚类拼接后共获得110条差异表达序列标签(EST)。利用GenBank的BLAST软件分析比较核酸和蛋白质同源性,发现共有36个基因与这些EST具有高度的同源性,它们分别参与细胞成分、免疫、信号转导、凋亡、转录等重要功能。这些差异表达基因主要有ATP/GTP结合蛋白1(Agtpbp1)、天冬氨酸-谷氨酸-丙氨酸-天冬氨酸盒多肽5、核蛋白p68、ATP-依赖RNA解旋酶、真核生物转录因子2亚基(Eif2s2)、Na+/K+-ATP酶转运β3多肽、溶菌酶1、溶菌酶2等基因。结论:这些差异表达基因在猪链球菌2型感染过程中可能发挥重要功能。 相似文献
13.
为探明皖北地区导致仔猪黄痢的大肠杆菌的主要血清型,从皖北地区仔猪黄痢病料中,分离到37株致病性大肠杆菌菌株,并用O抗原单价血清、ELISA试验和菌毛抗原进行了血清型鉴定。结果表明,引发该地区仔猪黄痢的优势血清型为O8、O9、O141,这3种血清型占全部分离菌株的63.6%,其余血清型为O45、O147、O20、O101、O157、O119,占36.4%;对O8、O9、O141分离菌株进行了菌毛抗原的鉴定,菌毛抗原主要有K88、K99、F41。采用分离的优势菌株制成灭活疫苗,免疫妊娠猪,进行疫苗免疫效果比较试验。结果显示,自制分离株灭活苗组、K88-LTB基因工程苗组和对照组仔猪黄痢的发病率分别为11.5%、18.3%和28.4%,死亡率为8.6%、12.0%和18.1%,表明自制分离株灭活苗有较好的保护效果,为下一步有针对性地防制仔猪黄痢提供科学依据。 相似文献
14.
【背景】副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,HPS)是猪的上呼吸道病原菌,引起格拉瑟氏病,主要引起断奶前后和保育阶段的猪发病,通常见于5—8周龄的青年猪,发病率一般为10%—15%。该菌有15种血清型,目前主要养猪国家流行的血清型为4型、5型、12型和13型,是严重危害养猪业发展的主要细菌性病原之一。目前国内还没有检测该菌抗体的商品化试剂盒。【目的】研制一种针对副猪嗜血杆菌的快速、敏感和特异性强的抗体检测试剂盒,为格拉瑟氏病的有效防控提供技术支持。【方法】表达并纯化OppA、DppA、HbpA 3种不同的副猪嗜血杆菌ABC转运体周质底物结合蛋白,使用副猪嗜血杆菌阴、阳性参考血清筛选以上3种蛋白中免疫反应性和反应特异性好的蛋白。以筛选的蛋白为包被抗原,建立检测HPS抗体的间接ELISA方法,优化间接ELISA反应条件,并组装试剂盒。在此基础上,确定该试剂盒的敏感性、特异性;通过对不同时间、不同猪场采集的2 000份临床猪血清样本进行检测,评价该试剂盒的实用性;在以上临床血清样本中随机选取200份,分别以研制的试剂盒、间接血凝试验以及进口商品化试剂盒进行检测,比较检测结... 相似文献
15.
氟是动物机体的必需微量元素,适量的氟有利于骨骼、牙齿的生长,过量的氟则会引起机体慢性全身性中毒,主要影响骨骼、牙齿的正常生长,另外对消化系统、生殖泌尿系统、神经系统、内分泌系统和免疫系统也产生中毒影响。作者从氟中毒机制的国内外研究现状和进展出发,就过量氟化物对动物机体的影响进行综述,以期为动物氟中毒病相关研究提供参考。 相似文献
16.
皖北地区仔猪水肿病流行病学调查 总被引:4,自引:0,他引:4
[目的]研究皖北地区猪水肿病的发病规律。[方法]对皖北地区猪场及各乡镇发生猪水肿病(EDP)进行较详细的流行病学调查。[结果]研究发现猪水肿病在皖北地区呈零星散发,具有传染性,发病率在0.69%~2.14%,死亡率在0.21%~0.94%,病死率18.0%~46.0%。[结论]溶血性大肠杆菌是引发猪水肿病的病原,环境卫生、饲料、管理、微量元素、应激因素等是该病的主要诱发因素。 相似文献
17.
生长激素释放肽(Ghrelin)是一种在动物体内广泛存在的生长激素促分泌素受体(GHSR)的内源性配体, Ghrelin与位于下丘脑的GHSR结合后,具有促进生长激素释放、增加食欲、调节消化系统功能及能量代谢等作用。文章就Ghrelin的结构、分布、生物学效应及在畜牧业上的应用前景等方面进行综述,以期促进Ghrelin的进一步深入研究。 相似文献
18.
用加入金属离子螯合剂EDTA的TSB(胰酪胨大豆肉汤)培养基,培养鸭疫里氏杆菌(Riemerella anatipestifer,RA)Ⅰ型,将未加入EDTA的TSB培养的RAⅠ型菌株作对照。比较后发现,加入EDTA组的外膜蛋白(OMPs)的SDS-PAGE图谱发生改变,从34 ku~100 ku增加了多条蛋白条带,特别是39 ku,60 ku和110 ku蛋白浓度较大。电泳胶经Western-blot(康复血清作为一抗,自制酶标兔抗鸭为二抗),与对照组相比,实验组增加了39 ku条带。实验证明,加入金属离子螯合剂EDTA对外膜蛋白的表达和免疫原性均有影响。 相似文献
19.
20.
为研究副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,Hps)外膜蛋白P5对豚鼠骨髓来源的树突状细胞(Dendritic cell,DC)刺激淋巴细胞增殖功能及细胞因子分泌的影响,以GM-CSF、IL-4联合诱导骨髓细胞生成未成熟DC,加入不同剂量副猪嗜血杆菌外膜蛋白P5,观察DC形态,检测混合淋巴细胞反应,ELISA法测IL-6、IL-12p70、TNF-α分泌情况.结果显示:经副猪嗜血杆菌外膜蛋白P5刺激后,可获得具有典型树突状突起形态的DC;经5μg·mL-1P5刺激的DC较对照IL-6、TNF-α分泌量极显著增加(P<0.01),IL-12的分泌量有所增加(P>0.05);50 μg·mL-1P5刺激的DC较对照IL-6分泌量极显著增加(P<0.01),IL-12p70和TNF-α分泌量均极显著下降(P<0.01).诱导后的DC刺激同种异体T淋巴细胞增殖的能力极显著增强(P<0.01).本研究证明P5能影响骨髓细胞来源的DC的分化、成熟及功能的发挥,且不同剂量的P5对DC的成熟程度影响有差异. 相似文献